脫氧核糖核酸酶1基因多態(tài)性與Graves病相關(guān)性研究.pdf

1、研究背景：
　　 Graves病(Graves'disease，GD)，又稱毒性彌漫性甲狀腺腫，是一種伴甲狀腺激素(TH)分泌增多的器官特異性自身免疫病，是甲狀腺功能亢進癥(hyperthyroidism，簡稱甲亢)的主要病因。一般認為，GD是在遺傳易感的基礎(chǔ)上，因感染、精神創(chuàng)傷等應(yīng)激因素共同作用下誘發(fā)體內(nèi)的免疫功能紊亂，導(dǎo)致自身免疫疾病。雖然其發(fā)病機制尚未完全闡明，但已有充分證據(jù)表明，遺傳因素在其發(fā)病過程中起著重要作用。脫氧核

2、糖核酸酶Ⅰ(deoxyribonucleaseⅠ，DNaseⅠ)是發(fā)現(xiàn)最早的一種特異性DNA水解酶，能夠水解DNA。近來研究發(fā)現(xiàn)，DNaseⅠ是一種與細胞凋亡、細胞壞死等有關(guān)的多功能型酶。大量研究表明DNase1與多種自身免疫疾病相關(guān)，已有研究表明在自身免疫性甲狀腺疾病疾病患者中DNase酶活性較正常人明顯降低。DNA酶Ⅰ存在蛋白及基因水平的多態(tài)性，其基因多態(tài)性主要包括8外顯子單核苷酸多態(tài)性(SNP)rs1053874。目前，關(guān)于中國漢

3、族人群DNA酶Ⅰ基因多態(tài)性的分布特點及多態(tài)性與GD的關(guān)系尚無報道。本研究通過檢測中國部分漢族人群DNA酶Ⅰ基因型，總結(jié)其多態(tài)性分布特征，分析DNA酶Ⅰ基因多態(tài)性與GD易感性的關(guān)系。
　　 研究目的：
　　 1.探討中國漢族人群中DNASE1基因多態(tài)性SNP rs1053874的分布情況。
　　 2.探討DNASE1基因多態(tài)性與Graves病的相關(guān)性。
　　 研究方法
　　 應(yīng)用聚合酶鏈反應(yīng)-限制性

4、片段長度多態(tài)性(Polymerase ChainReaction-Restriction Fragment Length Polymorphism，PCR-RFLP)結(jié)合直接測序的方法，檢測487例中國漢族無親緣關(guān)系的個體DNASE1 SNP rs1053874的分布情況。研究對象共分為兩組：正常對照組(N組)203例，病例組(GD組)284例，對各組等位基因頻率、基因型頻率進行比較分析。應(yīng)用SPSS11.5統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)分析。

5、>　　 實驗結(jié)果：
　　 1.正常對照組、GD組均存在DNASE1基因SNP rs1053874多態(tài)性位點。rs1053874基因型在正常對照組中的分布符合Hardy-Weinberg平衡(x2=1.35，P=0.25)，提示樣本具有群體代表性。
　　 2.基因型A/A、A/G、G/G在正常對照組的分布頻率分別為29.56％、45.81％、24.63％；GD組的分布頻率分別為23.94％、38.03％、38.03％。兩

6、組差別有統(tǒng)計學(xué)意義(x2=9.71，P=0.00)。正常對照組主要等位基因為A(52.46％)、GD組主要等位基因為G(57.04％)，兩組存在統(tǒng)計學(xué)差別(x2=8.59，P=0.00)。
　　 3.GD患者中，三種基因型A/A、A/G、G/G的平均發(fā)病年齡分別為30(24～44)歲，34(25～42)歲，32(25～43)歲，三組比較無統(tǒng)計學(xué)差異(x2=0.34，P=0.84)。
　　 4.按性別分層后GD男性組總體基

7、因型分布與對照組比較二者無統(tǒng)計學(xué)差異(x2=4.10，P=0.13)。正常對照組、GD女性組主要基因型均為A/G(45.86％VS40.67％)，二者存在統(tǒng)計學(xué)差異(x2=7.63，P=0.02)。正常對照組、GD男性組A等位基因頻率分別為51.43％、46.00％，G等位基因頻率分別為48.57％、54.00％，二者無統(tǒng)計學(xué)差異(x2=0.85，P=0.36)。正常對照組、GD女性組A等位基因頻率分別為53.01％、41.87％，G等

8、位基因頻率分別為46.99％、58.13％，二者有統(tǒng)計學(xué)差異(x2=8.12，P=0.00)。GD患者中男性組與女性組之間基因型及等位基因比較差異均無顯著性(P＞0.05)
　　 5.按有無家族史分層分析后無家族史GD組與正常對照組相比較基因型分布及等位基因頻率分布差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(x2=11.02，P=0.00和x2=7.90，P=0.00)。有家族史GD組的總體基因型分布與等位基因頻率正常對照組相比均無統(tǒng)計學(xué)差異(x2=3

9、.19，P=0.20和x2=3.45，P=0.06)；GD患者中有家族史組與無家族史組之間比較無論是基因型或等位基因頻率差異均無顯著性(x2分別為2.82和0.07，P分別為0.25和0.79)。
　　 6.按有無眼病分層分析后GO組、非GO組與正常對照組相比較基因型分布差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(x2分別為9.83和8.40，P分別為0.00和0.02)，GO組與非GO組之間比較有統(tǒng)計學(xué)差異(x2=6.17，P=0.046)。非GO組

10、與正常對照組等位基因分布頻率比較，差別有統(tǒng)計學(xué)意義(x2=8.33，P=0.00)。GO組與正常對照組等位基因分布頻率比較，差別無統(tǒng)計學(xué)意義(x2=1.37，P=0.24)。GO組與非GO組比較，等位基因分布無統(tǒng)計學(xué)意義的差異(x2=0.00，P=0.98)。
　　 7.按有無復(fù)發(fā)史分層，有復(fù)發(fā)史組與正常對照組相比較基因型分布及等位基因頻率分布差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(x=27.40，P=0.00和x2=18.98，P=0.00)，無

11、復(fù)發(fā)史組與正常對照組相比基因型分布無統(tǒng)計學(xué)差異(x2=4.54，P=0.10)，等位基因分布存在統(tǒng)計學(xué)差異(x2=4.24，P=0.04)。有復(fù)發(fā)史組與無復(fù)發(fā)史組比較，基因型分布及等位基因頻率分布差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(x2=16.48，P=0.00和x2=11.36，P=0.00)
　　 結(jié)論：
　　 1、DNASE1基因SNP rs1053874位點的G等位基因是中國漢族人群中GD的易感因素；
　　 2、DNAS