白介素家族成員基因多態(tài)性與Graves病遺傳相關(guān)性研究.pdf

1、研究背景
　　 Graves病(GD)是一種器官特異性自身免疫性疾病,其確切病因仍不清楚,但已有充分證據(jù)表明,遺傳因素在其發(fā)病過(guò)程中起重要作用,可能有多個(gè)基因共同參與了GD的發(fā)病。在GD發(fā)病的每一階段都有細(xì)胞因子白介素(Imerleukin,IL)家族的參與,而在GD發(fā)病中具有重要免疫調(diào)節(jié)作用的前炎癥因子、Th1、Th2及Th17細(xì)胞相關(guān)白介素基因多態(tài)性與GD發(fā)病易感性的關(guān)系更值得探討。
　　 目的
　　 通過(guò)上

2、海和廈門(mén)兩組不同地區(qū)病例.對(duì)照研究,檢測(cè)IL-1、IL-10、IL-12、IL-3、IL-4、IL-5、IL-9、IL-13、IL-17及IL-23等細(xì)胞因子的基因多態(tài)性在GD和GD相關(guān)眼病(GO)患者及健康人群中的分布狀況,分析多種前炎癥因子、Th1、Th2及Th17白介素基因多態(tài)性與GD和GO的關(guān)系。
　　 研究方法
　　 1.選擇兩地兩組人群,上海:760例GD(其中192例GO)患者和755例正常對(duì)照者；廈門(mén):4

3、34例GD患者和415例正常對(duì)照者。采用高通量SNPstream芯片及Taqman探針技術(shù)檢測(cè)上述人群中細(xì)胞因子IL-1、IL-10、IL-12、IL-3、IL-4、IL-5、IL-9、IL-13、IL-17及IL-23基因多態(tài)性,分析其基因型頻率、等位基因頻率及單倍型頻率在各組人群中的分布狀況。利用循證醫(yī)學(xué)Meta分析對(duì)有關(guān)位點(diǎn)進(jìn)行綜合分析。
　　 2.采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測(cè)43例初發(fā)GD患者、46例活動(dòng)性GO患

4、者、45例穩(wěn)定期GD患者和40例正常對(duì)照者血清中IL-17和IL-23的濃度。
　　 結(jié)果：
　　 1.GD組中IL-1α基因rs1800587(T-889C)多態(tài)性的T等位基因明顯高于正常對(duì)照組[9.7％vs6.7％,OR=1.50(1.15-1.96),p=0.003;TT+CTvs.CC,OR=1.55(1.17-2.05),P=0.002]。GO組中該多態(tài)性與正常對(duì)照組差異更顯著[11.6％vs.6.7％,OR=

5、1.83(1.26-2.66),P=0.001；TT+CT vs.CC,OR=1.97(1.31-2.94),P=0.001]。GD和GO組中IL-1β基因rs16944(A-511G)多態(tài)性AA基因型顯著低于正常對(duì)照組[GD:17.5％ vs.23.3％；AA vs.GA+GG OR=0.74(0.57-0.95),P=0.02；GO:13.6％ vs.23.3％；AA vs.GA+GG,OR=0.55(0.35-0.86),P=0.

6、0065]。Meta分析證實(shí)rs1800587和rs16944在GD組和正常對(duì)照組中有顯著的差異(P=0.03,P=0.002)。1L-10和IL-12A基因型及單倍型分析顯示:在上海和廈門(mén)兩組人群中IL-10的rs1800896(G-1082A)多態(tài)性G等位基因均與GD有顯著相關(guān)性(Pallele=2.6×10-4,Pallele=0.0057);IL-12A的rs568408位點(diǎn)A等位基因頻率在GD患者組顯著低于正常對(duì)照組(Pall

7、ele2.96×10-7,Pallele=0.044),提示IL-1、IL-10、IL-12A基因多態(tài)性與GD易感性間存在相關(guān)性。
　　 2.選擇位于5q31-33區(qū)域的Th2相關(guān)白介素IL-3、IL-4、IL-5、IL-9、IL-13基因上的標(biāo)簽多態(tài)性位點(diǎn)(tagSNPs)-rs40401(IL-3)、rs2070874(IL-4)、rs2069812(IL-5)、rsl859430(IL-9)、rs2069868(IL-9)

8、和rs20541(IL-13)進(jìn)行病例-對(duì)照關(guān)聯(lián)分析。結(jié)果顯示,rs40401及rs2069812與GD和GO間存在顯著的相關(guān)性[GD:Pallele=0.028,Pallele=0.022,GO:Pallele=0.015,Pallele=0.003]。且兩個(gè)位點(diǎn)具有疊加效應(yīng),其中的CC單倍型在GD組中的頻率顯著高于正常對(duì)照組[18.32％ vs.10.68％,P1.818×10-5,OR=1.70(1.33-2.18)],在GO組中

9、該差異更顯著[21.09％ vs.10.68％,P1.007×10-5,OR=2.18(1.53-3.09)]。單倍型分析顯示,ATAACC單倍型使GD患病風(fēng)險(xiǎn)提高3.7倍,使GO患病風(fēng)險(xiǎn)提高7.01倍。
　　 3.GD患者的血清IL-17和IL-23水平較正常對(duì)照者明顯升高(P＜0.001,P=0.0014)?；蚨鄳B(tài)性分析發(fā)現(xiàn),在IL-17A,IL-17F和IL-23a三個(gè)基因中有多個(gè)位點(diǎn)(8/12)與GD有顯著的相關(guān)性,其

10、中IL-17A的rs8193036和rs8193037,IL-17F的rs9463772及IL-23a的rs11171806差異最顯著(Pallele9.2×10-6,Pallele6.7×10-4,Pallele7×10-5,Pallele=0.002)。驗(yàn)證人群的結(jié)果顯示,上述4個(gè)多態(tài)性同樣與GD顯著相關(guān)(Pallele=0.0167,Pallele=0.0013,Pallele=0.019,Pallele=0.0063)。我們的研