重組人NAMPT蛋白靜脈注射對正常小鼠生理生化指標(biāo)及腦結(jié)構(gòu)的影響.pdf

1、第一部分、重組人NAMPT蛋白靜脈注射對正常小鼠生理生化指標(biāo)及腦結(jié)構(gòu)的影響
　　目的:觀察較長時間靜脈注射尼克酰胺磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶(NAMPT)蛋白，即增加血清NAMPT水平對正常小鼠多種生理生化指標(biāo)及腦結(jié)構(gòu)的影響。
　　方法:32天內(nèi)每3天經(jīng)尾靜脈給正常小鼠注射重組野生型NAMPT蛋白或酶活性大大降低的H247A突變型NAMPT蛋白10、30、100μg/kg，檢測體重、血壓、心率、血糖、血脂等生理生化指標(biāo)的變化，并觀察對腦

2、內(nèi)海馬區(qū)神經(jīng)元、星形膠質(zhì)細(xì)胞、小膠質(zhì)細(xì)胞等形態(tài)的影響。
　　結(jié)果:NAMPT野生型和突變型蛋白長期注射對正常小鼠體重、血壓、心率、血糖、總膽固醇、甘油三酯等均無明顯影響;對正常小鼠海馬CA1區(qū)神經(jīng)、星形膠質(zhì)細(xì)胞和小膠質(zhì)細(xì)胞的形態(tài)和數(shù)量均未見顯著改變。
　　結(jié)論:血清中NAMPT水平增高對正常小鼠的生理生化指標(biāo)及海馬神經(jīng)元、星形膠質(zhì)細(xì)胞及小膠質(zhì)細(xì)胞等腦神經(jīng)基本結(jié)構(gòu)無顯著影響，提示血NAMPT增高可能不是正常個體代謝性疾病及神經(jīng)

3、系統(tǒng)功能障礙的誘發(fā)因素，獨(dú)立的致病風(fēng)險較低。
　　第二部分、NAMPT在小鼠神經(jīng)行為發(fā)生中的作用及機(jī)制
　　目的:觀察NAMPT在小鼠神經(jīng)行為發(fā)生中的作用，以及其發(fā)生作用的機(jī)制。
　　方法:通過側(cè)腦室注射，以FK866（10-7M、3×10-TM、5×10-7M，每只10μL）特異性抑制小鼠腦內(nèi)神經(jīng)元的NAMPT活性，以慢病毒為載體的shRNA或者全長NAMPT質(zhì)粒來下調(diào)或者上調(diào)神經(jīng)元NAMPT的表達(dá)，觀察小鼠神經(jīng)行為

4、（活動量、學(xué)習(xí)記憶等），腦形態(tài)（海馬和皮層神經(jīng)元、星形膠質(zhì)細(xì)胞、小膠質(zhì)細(xì)胞等），腦生化（GFAP表達(dá)、炎癥因子、轉(zhuǎn)運(yùn)子、NAD等）的變化。
　　結(jié)果:結(jié)果發(fā)現(xiàn)，側(cè)腦室注射FK866劑量依賴的減少小鼠在開放場的活動量，減少小鼠對開場中心區(qū)的探索活動。FK866側(cè)腦室注射對小鼠海馬和皮層神經(jīng)元和小膠質(zhì)細(xì)胞的形態(tài)和數(shù)量無明顯影響，但免疫熒光顯示，海馬區(qū)星形膠質(zhì)細(xì)胞的數(shù)量顯著增加，免疫熒光及Western blot結(jié)果均顯示GFAP的表達(dá)