四物湯類方治療婦科血瘀證的物質(zhì)基礎(chǔ)與配伍規(guī)律研究——少腹逐瘀湯及其組方藥材的效應(yīng)物質(zhì)基礎(chǔ)研究.pdf

1、論文共分四章開展對少腹逐瘀湯及其組方藥材的效應(yīng)物質(zhì)基礎(chǔ)研究。
　　 第一章文獻綜述部分，介紹了中國傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)、現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對原發(fā)性痛經(jīng)的認識，以及寒凝血瘀原發(fā)性痛經(jīng)的中醫(yī)藥治療概況，并對少腹逐瘀湯及其組方藥材的臨床應(yīng)用以及化學(xué)、藥理研究進展進行綜述。
　　 實驗研究部分分為兩個主要研究內(nèi)容，一是少腹逐瘀湯全方的研究，二是少腹逐瘀湯組方藥材的研究。具體研究內(nèi)容和結(jié)論如下：
　　 第二章以少腹逐瘀湯臨床傳統(tǒng)用藥方式--湯劑

2、為研究對象，采用水煎煮的方法進行提取，并采用大孔吸附樹脂技術(shù)、膜分離技術(shù)等現(xiàn)代分離手段進一步分離富集，最后獲得18個極性不同的樣品供效應(yīng)評價和化學(xué)分析用。
　　 選擇與痛經(jīng)有關(guān)的兩個效應(yīng)評價模型：離體器官模型（離體子宮收縮模型）和體外篩選模型（血小板聚集等），從不同的角度對少腹逐瘀湯及其不同分離部位進行生物效應(yīng)評價。
　　 1.小鼠離體子宮收縮試驗結(jié)果表明，少腹逐瘀湯揮發(fā)油部位（SF-1）、少腹逐瘀湯水煎液部位(SF-2

3、)、醇沉上清液部位(SF-5)、大孔樹脂吸附后40％乙醇洗脫部位(SF-14)、60％乙醇洗脫部位(SF-13)均呈現(xiàn)出對子宮收縮的顯著抑制活性；而沉淀部分（生物大分子物質(zhì)）中相對分子質(zhì)量小于5kD部位(SF-19)則對小鼠離體子宮收縮呈現(xiàn)興奮作用。
　　 2.體外抑制ADP誘導(dǎo)的血小板聚集試驗表明，少腹逐瘀湯經(jīng)大孔樹脂吸附后10％~40％乙醇洗脫部位(SF-9~SF-11)具有顯著抑制ADP誘導(dǎo)的血小板聚集的活性(P＜0.05

4、，P＜0.01，P＜0.001)，其中40％乙醇洗脫部位(SF-11)活性最強(P＜0.001)。
　　 3.采用薄層色譜法、高效液相色譜法、液一質(zhì)聯(lián)用技術(shù)等現(xiàn)代分析手段對少腹逐瘀湯主要效應(yīng)部位(SF-11)進行分析研究。通過標準品對照，質(zhì)譜解析確定了40％乙醇洗脫部位(SF-11)中7個化學(xué)成分，分別為香草酸、咖啡酸、芍藥內(nèi)酯苷、芍藥苷、阿魏酸、香蒲新苷、異鼠李素-3-0-新橙皮苷。采用HPLC-DAD法建立了少腹逐瘀湯主要效

5、應(yīng)部位中7個主要成分的含量測定方法，結(jié)果測得香草酸、咖啡酸、芍藥內(nèi)酯苷、芍藥苷、阿魏酸、香蒲新苷、異鼠李素-3-0-新橙皮苷的含量分別為：1.28％、0.24％、0.71％、0.23％、12.05％、2.00％、2.98％，為少腹逐瘀湯及有效部位的復(fù)雜效應(yīng)物質(zhì)的闡明及質(zhì)量控制提供依據(jù)。
　　 第三章少腹逐瘀湯組方藥材揮發(fā)油部位生物效應(yīng)及成分分析。
　　 1.選擇離體子宮收縮模型對少腹逐瘀湯組方藥材揮發(fā)油進行效應(yīng)評價，試驗

6、結(jié)果表明等生藥劑量下少腹逐瘀湯組方藥材揮發(fā)油對小鼠離體子宮收縮均有不同程度的抑制活性，比較ED50以及95％可信限值可以看出，組方藥材揮發(fā)油的活性強弱依次為：川芎油＞當(dāng)歸油＞小茴香油＞肉桂油＞干姜油，且組方藥材揮發(fā)油的活性均強于少腹逐瘀湯揮發(fā)油。
　　 2.采用GC-MS聯(lián)用技術(shù)對少腹逐瘀湯及其組方揮發(fā)油的化學(xué)成分進行了分析，鑒定了揮發(fā)油中的大部分成分，并通過比較揮發(fā)油總離子流圖，認為少腹逐瘀湯揮發(fā)油低沸點成分主要來自于肉桂、干

7、姜、小茴香，而高沸點成分主要來自于當(dāng)歸、川芎，且組方藥材揮發(fā)油與復(fù)方揮發(fā)油中的主要成分有較大差異。
　　 3.采用體外抑制ADP誘導(dǎo)的血小板聚集模型對肉桂揮發(fā)油進行了進一步的效應(yīng)評價，血小板聚集試驗結(jié)果顯示，肉桂油、肉桂醛對ADP誘導(dǎo)的血小板聚集有顯著的抑制作用。
　　 4.采用小鼠離體子宮收縮模型、芳香化酶抑制劑體外篩選模型評價沒藥揮發(fā)油的生物效應(yīng)；采用GC-MS聯(lián)用技術(shù)對沒藥揮發(fā)性成分進行分離分析、鑒定。小鼠離體子宮