IGF-IR單克隆抗體對Jurkat細(xì)胞株增殖及凋亡的影響.pdf

1、背景：急性淋巴細(xì)胞白血病(acute lymphoblastic leukemia，ALL)是兒童最常見的惡性腫瘤，傳統(tǒng)的化療方法缺乏特異性，化療相關(guān)死亡率較高。胰島素樣生長因子Ⅰ受體(insulin-like growth factor-Ⅰ receptor，IGF-IR)在多種腫瘤細(xì)胞中均呈過度表達，參與腫瘤的發(fā)生發(fā)展。據(jù)此推測IGF-IR在兒童ALL細(xì)胞株Jurkat細(xì)胞中也呈過度表達，通過應(yīng)用靶向IGF-IR的單克隆抗體(mon

2、oclonal antibodies，MAb)可以抑制Jurkat細(xì)胞的生長。本課題就此進行了相關(guān)的研究。
　　 目的：探討IGF-IR在Jurkat細(xì)胞株的表達和定位及IGF-IR MAb對Jurkat細(xì)胞株增殖及凋亡的影響。
　　 方法
　　 Jurkat細(xì)胞株培養(yǎng)于含有10％胎牛血清(fetal bovine serum，F(xiàn)BS)的RPMI1640培養(yǎng)基中。
　　 1.應(yīng)用免疫細(xì)胞化學(xué)方法檢測Jur

3、kat細(xì)胞株IGF-IR的表達和定位。
　　 2.用濃度為0.001μg/ml、0.01μg/ml、0.1μg/ml、1μg/ml、10μg/ml的IGF-IR MAb分別作用于Jurkat細(xì)胞48小時，應(yīng)用CCK-8法測定細(xì)胞的增殖。
　　 3.根據(jù)CCK-8的結(jié)果，選用10μg/ml的IGF-IR MAb作用于Jurkat細(xì)胞48小時，應(yīng)用流式細(xì)胞儀(flow cytometry，F(xiàn)CM)檢測細(xì)胞的凋亡情況。

4、　　 結(jié)果
　　 1.IGF-IR在Jurkat細(xì)胞株普遍表達，陽性表達率100%，以細(xì)胞膜及細(xì)胞漿混合型表達為主。
　　 2.濃度為0.001μg/ml、0.01μg/ml、0.1μg/ml、1μg/ml、10μg/ml的IGF-IR MAb作用Jurkat細(xì)胞48小時，細(xì)胞的增殖受到抑制，抑制率分別為：(9.67±1.17)%、(14.89±1.06)%、(17.64±0.81)%、(20.15±1.14)%、(2

5、4.10±1.11)%，隨著IGF-IRMAb濃度的增大，細(xì)胞的增殖抑制率逐漸增加，不同濃度組組間兩兩比較，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。
　　 3.濃度為10μg/ml的IGF-IR MAb作用Jurkat細(xì)胞48小時，細(xì)胞的早期凋亡率為(13.73±1.16)%，晚期凋亡率為(20.44±2.47)%，總凋亡率為(34.18±3.41)%；對照組細(xì)胞的早期凋亡率為(6.27±0.67)%，晚期凋亡率為(10.18±0.

6、81)%，總凋亡率為(16.45±1.38)%。IGF-IR MAb組細(xì)胞的早期凋亡率、晚期凋亡率及總凋亡率均較對照組增加，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。
　　 結(jié)論
　　 1.IGF-IR在Jurkat細(xì)胞株呈普遍表達，以細(xì)胞膜及細(xì)胞漿混合型表達為主。
　　 2.IGF-IR MAb可以抑制Jurkat細(xì)胞的增殖，IGF-IR MAb對Jurkat細(xì)胞的增殖抑制作用呈劑量依賴性。
　　 3.IGF