單克隆抗體的制備

1、2.2.2單克隆抗體,,1、簡述單克隆抗體制備的過程。2、了解單克隆抗體在醫(yī)學(xué)實(shí)踐中的應(yīng)用。,【學(xué)習(xí)目標(biāo)】,,什么是抗體？抗體是怎么產(chǎn)生的？ 抗體是機(jī)體受抗原刺激后產(chǎn)生的、并能與該抗原發(fā)生特異性結(jié)合的具有免疫功能的球蛋白。,,知識(shí)回顧,（一）獲得抗體的傳統(tǒng)方法（血清抗體）,1、把某種抗原反復(fù)注射到動(dòng)物體內(nèi)，使動(dòng)物產(chǎn)生抗體，然后，從動(dòng)物血清中分離出所需的抗體。,2、血清抗體的缺點(diǎn)： 產(chǎn)量低，純度低，特異性差。,,為了解決血清

2、抗體產(chǎn)量低、純度低，特異性差這一難題，科學(xué)家們進(jìn)行了多年的研究和探索。他們發(fā)現(xiàn)，哺乳動(dòng)物感染病原體后，體內(nèi)會(huì)形成相應(yīng)的B淋巴細(xì)胞。B淋巴細(xì)胞能分泌抗體，凝集或殺死這些病原體。動(dòng)物在免疫反應(yīng)的過程中，體內(nèi)產(chǎn)生的特異性抗體的種類可多達(dá)百萬種以上，但是每一個(gè)B細(xì)胞只分泌一種特異性抗體。,熟讀精思：,,所以，要想獲得大量的單一抗體，必須克隆單一的B淋巴細(xì)胞，形成細(xì)胞群。,1、B淋巴細(xì)胞是一種高度分化的細(xì)胞，有沒有可能通過細(xì)胞培養(yǎng)進(jìn)行無限增殖？,

3、不可能,2、我們學(xué)過的什么細(xì)胞具有這樣的能力？,癌細(xì)胞,3、有什么辦法讓B淋巴細(xì)胞也具有這樣的能力？,細(xì)胞融合,,用單個(gè)B淋巴細(xì)胞進(jìn)行（無性繁殖）克隆，得到的基因型相同的細(xì)胞群能夠分泌一種化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體。,單克隆抗體的概念：,（二）單克隆抗體的制備過程,創(chuàng)始人：米爾斯坦,柯勒,1975年設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn),1984年獲得諾貝爾生理學(xué)和醫(yī)學(xué)獎(jiǎng),,,單克隆抗體的制備,,例題1、科學(xué)家用小鼠骨髓瘤細(xì)胞與某種細(xì)胞融合，得到雜交細(xì)胞，經(jīng)培養(yǎng)可

4、產(chǎn)生大量的單克隆抗體，與骨髓瘤細(xì)胞融合的是（ ） A、經(jīng)過免疫的B淋巴細(xì)胞 B、不經(jīng)過免疫的T淋巴細(xì)胞 C、經(jīng)過免疫的T淋巴細(xì)胞 D、不經(jīng)過免疫的B淋巴細(xì)胞,,2. 單克隆抗體制備過程中，骨髓瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞誘導(dǎo)融合后，要用特定培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞，在這種培養(yǎng)基上不能存活增殖的細(xì)胞是（ ） ①淋巴細(xì)胞　②小鼠骨髓瘤細(xì)胞?、跙淋巴細(xì)胞自身融 合細(xì)胞?、苄∈蠊撬枇黾?xì)胞自身融合細(xì)胞　

5、 ⑤雜交瘤細(xì)胞 A． ②④ B．①③⑤　　 C． ①②③④ 　 D．②③,,考考你！,1.在制備單克隆抗體的過程中，選用哪兩種細(xì)胞進(jìn)行融合？為什么選擇這兩種細(xì)胞？,漿細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞漿細(xì)胞能產(chǎn)生單一抗體，但不能無限增殖；骨髓瘤細(xì)胞能無限增殖，但不能產(chǎn)生單一抗體。,,2、在這過程中進(jìn)行了幾次篩選？分別在哪個(gè)步驟進(jìn)行篩選？,兩次篩選。第一次在B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞

6、融合以后篩選出雜交瘤細(xì)胞；第二次在雜交瘤細(xì)胞中篩選出能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞。,3、單克隆抗體具有哪些優(yōu)點(diǎn)？,特異性強(qiáng)，靈敏度高，可大量制備,,3、動(dòng)物細(xì)胞融合的目的中最重要的是（ ）A、克服遠(yuǎn)緣雜交不親和 B、制備單克隆抗體C、培育新物種 D、生產(chǎn)雜種細(xì)胞,,（三）單克隆抗體的應(yīng)用,1、作為診斷試劑：在臨床生化診斷、病理組織定位、體內(nèi)腫瘤的定位等,與常規(guī)抗體相比,具有準(zhǔn)確、高效、簡易、快速特點(diǎn).,,用抗

7、人絨毛膜促性腺激素單克隆抗體做成的“早早孕診斷試劑盒”，靈敏度很高。在妊娠第8天就可以做出診斷。比原來的診斷方法提前了10天左右，可以避免孕婦在不知道妊娠的情況下因服用藥物而對(duì)胎兒造成不利影響。該方法檢測的準(zhǔn)確率在90%以上。,2、用于治療疾病和運(yùn)載藥物：主要用于癌癥治療。生物導(dǎo)彈：抗癌細(xì)胞的單克隆抗體+放射性同位素+化學(xué)藥物或細(xì)胞毒素。（單克隆抗體：導(dǎo)向。準(zhǔn)確找到癌細(xì)胞位置，原位殺死癌細(xì)胞。）,4、研究單克隆抗體治療癌癥的思路是（

8、 ）A．利用單克隆抗體特異性地對(duì)抗癌細(xì)胞 B．以單克隆抗體作抗癌藥物殺死癌細(xì)胞C．抗癌物質(zhì)在克隆細(xì)胞中大量合成D．單克隆抗體攜帶抗癌藥物特異性地與癌細(xì)胞結(jié)合,,5．只能使動(dòng)物細(xì)胞融合的常用誘導(dǎo)方法（ 　） A．PEG　 B．滅活的病毒 C．電刺激 D．離心6、“生物導(dǎo)彈”是指 （　 ） A.單克隆抗體 　　B.雜交瘤細(xì)胞 C.產(chǎn)生特定抗體的B淋巴細(xì)胞　　 D