郝老師單克隆抗體的制備

1、單克隆抗體的制備,應急處置：洗、擠、消毒24小時內(nèi)接種疫苗，5針，28天內(nèi)打完咬傷較嚴重者先注射狂犬病病毒抗毒血清和破傷風桿菌抗毒血清，后接種疫苗。,,閱讀思考,常規(guī)抗體的缺點？為什么血清中分離的抗體純度低？,常規(guī)抗體,（多克隆抗體）,純度低、特異性差、產(chǎn)量低,1、單克隆抗體 由一個B淋巴細胞增殖分化形成的漿細胞群產(chǎn)生的抗體?；瘜W性質(zhì)單一，特異性強。,,,被免疫過的B細胞（漿細胞）,設想：,B細胞,骨髓瘤細胞,,,,,,,雜交

2、瘤細胞：既能產(chǎn)生特異性抗體，又能無限增殖,,細胞融合技術(shù),細胞培養(yǎng),,,,,,,,,抗原,,,,,2、單克隆抗體制備過程,,,,,B1、B2、B3…多種淋巴細胞,骨髓瘤細胞（設定為A）,+,PEG,選擇培養(yǎng)基,,BB AB1 AB2 AB3…AA,細胞合成DNA有D和S兩條途徑，其中D途徑能被氨基喋呤阻斷。試驗用骨髓瘤細胞（缺陷型）只有D途徑，沒有S途徑。,雜交瘤細胞克隆化培養(yǎng),抗體檢測,產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞,獲取

3、,單克隆抗體體內(nèi)制備,單克隆抗體體外制備,優(yōu)點：特異性強、靈敏度高、可大量制備,將以下單克隆抗體的制備步驟排序,3、單克隆抗體的應用,①用于治療疾病和運載藥物，如生物導彈,131I,制備甲胎蛋白的單克隆抗體，與藥物結(jié)合，定向運輸?shù)桨┘毎恢谩?癌細胞膜具特殊蛋白質(zhì)，甲胎蛋白、癌胚蛋白。,“生物導彈” ＝單克隆抗體＋藥物,②作為診斷試劑：,,,,人絨毛膜促性腺激素的單抗,雜交瘤技術(shù)是上世紀方法學上的一個重大突破，開創(chuàng)了大量生產(chǎn)具有專一特