高度近視眼及相關眼遺傳病的分子遺傳學研究.pdf

1、中國協和醫(yī)科大學中國醫(yī)學科學院博士學位論文高度近視眼及相關眼遺傳病的分子遺傳學研究姓名：睢瑞芳申請學位級別：博士專業(yè)：眼科學指導教師：趙家良20070601中國協和醫(yī)科大學研究生畢業(yè)論文中文摘要目的對高度近視眼及相關眼遺傳病家系進行連鎖分析，檢驗是否和己知的高度近視眼位點連鎖。對兩個X連鎖隱性遺傳家系進一步確診，并鑒定其致病基因。方法收集高度近視眼及相關眼遺傳病家系資源。對入選對象進行詳細的臨床檢查，包括詢問家族史、測量視力、驗光、檢查

2、眼前、后節(jié)、測量眼軸和眼壓，懷疑為高度近視眼相關遺傳病時要檢查視網膜電圖(ERG)、熒光素眼底血管造影、暗適應和視野。采集入選對象靜脈血5～8ml并提取基因組DNA。所有數據錄入數據庫。選擇高度近視眼致病基因位點MYP2(18p1131)、MYP3(12q2123)、MYP4(7q36)和MYP5(17q2122)區(qū)域的微衛(wèi)星標記，對高度近視眼家系進行連鎖分析。用G淵can和G耐yper軟件確定基因型，用Linkage軟件計算Lod值。

3、臨床分析確定家系HMzJH為完全型先天性靜止性夜盲，通過連鎖分析確定該病致病基因的定位于Xpll4后，應用聚合酶鏈反應(PCR)擴增候選基因外顯子及其側翼，直接測序確定致病的基因突變。采用PCR／直接測序法進行群體分析。l瞄床分析確定家系HMLG為不完全型先天性靜止性夜盲，應用聚合酶鏈反應(PCR)擴增致病基因CACNAlF外顯子及其側翼，直接測序分析基因序列改變。結果共收集高度近視眼及相關眼遺傳病大家系21個，其中常染色體顯性遺傳(A

4、D)家系19個，x連鎖隱性遺傳(xR)家系2個。選擇4個AD家系HMFAN，HMNM，HM—ZLX和HMLH，計算致病基因與所選的微衛(wèi)星標記的Lod值，所有標記的Lod值均1。XR家系HMZJH的患者除高度近視外，ERG表現為視桿反應消失；白光下視桿視錐混合反應呈負波形；Ops(震蕩電位)缺失；視錐反應基本正常。連鎖分析DXS8035在F=O0時最大Lod值為223。家族中所有患者NYX基因外顯子2發(fā)生了錯義突變，核苷酸772位的腺嘌呤