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文檔簡介
1、復(fù)方雞血藤膏為傳統(tǒng)中藥,收載于《中國藥典》(2005版一部),由滇雞血藤膏粉、川牛膝、續(xù)斷、紅花、黑豆等加工而成,功能補血、活血、調(diào)經(jīng),用于血虛、手足麻木、關(guān)節(jié)酸痛和月經(jīng)不調(diào)。該制劑療效確切、歷史悠久,但由于基礎(chǔ)研究薄弱,劑型落后,缺乏特征性的定性定量指標(biāo)。本課題關(guān)鍵目的是研究制定可控性強的復(fù)方雞血藤制劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),為此首先需要對滇雞血藤進(jìn)行化學(xué)成分研究,闡明主要藥效物質(zhì)基礎(chǔ),并改革復(fù)方雞血藤膏傳統(tǒng)工藝,制備量小、方便的新制劑。
2、 滇雞血藤膏粉為滇雞血藤的水提干浸膏粉,為方中君藥,功效明顯、劑量大,是復(fù)方雞血藤制劑質(zhì)量控制研究的重點。滇雞血藤主要來源于五味子科南五味子屬內(nèi)南五味子(Kadsura interior A.C.Smith)和異型南五味子(K.heteroclita(Roxb.)Craib.)的藤莖。我們對滇雞血藤化學(xué)成分進(jìn)行研究,采用硅膠柱色譜、HPLC制備色譜以及紅外、紫外、旋光譜、質(zhì)譜、核磁共振(氫譜、碳譜、HMQC、HMBC和NOESY)
3、等波譜技術(shù)從滇雞血藤乙酸乙酯部位分離鑒定了17個木脂素、2個三萜(甘五酸、馬五味子酸)和β-谷甾醇。木脂素類化合物包括聯(lián)苯環(huán)辛烯類木脂素10個:南五味子酯甲、南五昧子酯乙、滇南五味子酮、南五味子素、異型南五味子丙素、內(nèi)南五味子酯丙、五脂酮A、binankadsurin A、angeloylbinankadsurin A、戈米辛U;螺苯駢呋喃型聯(lián)苯環(huán)辛烯類木脂素6個:南五味子酯丙、滇南五味子酯、異型南五味子丁素、內(nèi)南五味子素、schiar
4、isanrin C、異型南五味子庚素;2,3-二甲基-1,4二芳基丁烷類木脂素1個:內(nèi)消旋二氫愈創(chuàng)木脂酸。其中南五味子酯甲、乙、丙和滇南五味子酯為新化合物,滇南五味子酮為首次從自然界中分離得到;南五味子酯丙為首個C-2位無氧取代的聯(lián)苯環(huán)辛烯類木脂素;異型南五味子丁素含量高,具有抗氧化、抗病毒活性,且能明顯抑制KCl、CaCl2和NA產(chǎn)生的血管收縮以及ADP和PAF誘導(dǎo)的兔血小板聚集,可作為復(fù)方雞血藤膏質(zhì)量控制的指標(biāo)成分。
5、復(fù)方雞血藤膏工藝改革同時以有效成分含量和藥效為考察指標(biāo)。建立了變色酸鈉-濃硫酸比色法測定總木脂素的含量,以小鼠腸系膜微循環(huán)實驗進(jìn)行藥效學(xué)研究。比較發(fā)現(xiàn),滇雞血藤醇提浸膏粉的總木脂素含量和促微循環(huán)作用都明顯高于水提滇雞血藤膏粉,說明總木脂素含量的高低可反映藥效強弱,因而滇雞血藤采用乙醇提取較為合理。采用正交設(shè)計優(yōu)選出滇雞血藤的最佳提取方案為:80%乙醇冷浸24小時,以每3小時1倍體積的流速滲漉,共收集滲漉液40倍體積。滇雞血藤膏粉(醇提)
6、新的處方劑量通過滇雞血藤醇、水提取物的量效關(guān)系考察確定為原水提滇雞血藤膏粉的1/4。新處方制備成復(fù)方雞血藤膠囊后,每次服藥劑量由10g降至1.2g(4粒)。另外,單純改變傳統(tǒng)劑型,制備了復(fù)方雞血藤顆粒劑。新制劑克服了復(fù)方雞血藤膏劑量大、服用不方便的缺點。
質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究重點建立指標(biāo)成分的含量測定方法。通過優(yōu)化色譜條件,建立了滇雞血藤藥材、滇雞血藤膏粉、復(fù)方雞血藤顆粒、復(fù)方雞血藤膠囊及其中間體中異型南五味子庚素、戈米辛A、內(nèi)南
7、五味子素、內(nèi)南五味子乙素、異型南五味子丁素、南五味子素、五味子甲素和五味子丙素8個木脂素的HPLC-DAD含量測定方法,并進(jìn)行了方法學(xué)考察。結(jié)果表明采用HPLC方法測定以上五個樣品中的木脂素含量可行,滇雞血藤醇提浸膏粉、復(fù)方雞血藤膠囊及其中間體中8個木脂素成分均可準(zhǔn)確定量;復(fù)方雞血藤顆粒和滇雞血藤藥材中除五味子甲素外7個木脂素可準(zhǔn)確定量。三批樣品測定結(jié)果表明,異型南五味子丁素、南五味子素、內(nèi)南五味子素3個木脂素在滇雞血藤及其復(fù)方制劑中含
8、量普遍較高,批次間無明顯差異;其中異型南五味子丁素含量最高,活性較強,其抑制血管收縮和血小板聚集的作用體現(xiàn)了復(fù)方制劑的活血功效,被確定為復(fù)方雞血藤制劑含量測定的指標(biāo)成分。根據(jù)三批樣品的測定結(jié)果建議復(fù)方雞血藤膠囊每粒含丁素含量不得少于0.35mg;復(fù)方雞血藤顆粒丁素含量不得少于8.2μg/g。另外,建立了復(fù)方雞血藤制劑中滇雞血藤、川牛膝和續(xù)斷的TLC定性鑒別方法,特征明顯。
本文明確了滇雞血藤主要藥效物質(zhì)基礎(chǔ)和指標(biāo)成分,為復(fù)
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