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文檔簡介
1、目的:研究新化合物(HRG)即人參皂苷結(jié)構(gòu)修飾物對人肝癌抗腫瘤作用及作用機(jī)制。
方法:(1)體外培養(yǎng)人肝癌SMMC-7721細(xì)胞,經(jīng)不同濃度(25、50、100μg·ml-1) HRG作用:采用MTT實驗檢測HRG作用24、48、72h后細(xì)胞增殖抑制率、細(xì)胞計數(shù)實驗檢測生長曲線的變化、細(xì)胞集落實驗檢測集落形成率、流式細(xì)胞技術(shù)分析細(xì)胞周期的分布;(2)采用劃痕實驗、Transwell小室穿膜實驗檢測HRG對細(xì)胞遷移、侵襲能力的影
2、響,采用Western blot實驗檢測HRG對腫瘤細(xì)胞遷移相關(guān)蛋白整合素(αvβ3)和基質(zhì)金屬蛋白酶-2(MMP-2)的表達(dá)情況;(3)HRG作用于HepG2-CAM移植瘤模型,觀察藥物對移植瘤體積、誘導(dǎo)血管數(shù)、瘤重和抑瘤率的影響。
結(jié)果:(1)人肝癌SMMC-7721細(xì)胞經(jīng)(25、50、100μg·ml-1) HRG處理后:各組細(xì)胞形態(tài)與對照組相比均發(fā)生不同程度的改變;各濃度組HRG均能夠抑制腫瘤細(xì)胞的增殖,并具有一定的劑
3、量和時間依賴性;HRG能夠抑制腫瘤細(xì)胞的集落形成率,與對照組比較有顯著差異;HRG能夠調(diào)控腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞周期,對腫瘤細(xì)胞S時相有明顯阻滯作用,使進(jìn)入分裂期的細(xì)胞減少,與對照組比較有顯著差異。(2)50μg·ml-1、100μg·ml-1 HRG可明顯降低腫瘤細(xì)胞的遷移能力;HRG能夠明顯抑制細(xì)胞侵襲作用,與對照組比較有顯著差異;HRG能夠抑制腫瘤細(xì)胞遷移相關(guān)蛋白整合素(αvβ3)和基質(zhì)金屬蛋白酶-2(MMP-2)的表達(dá)。(3)HRG能夠
4、顯著抑制HepG2-CAM移植瘤的生長,與模型組比較,25μg· ml-1組對移植瘤的生長抑制作用呈統(tǒng)計學(xué)差異P<0.05;50μg·ml-1組呈顯著性差異P<0.01;100μg· ml-1組呈極顯著性差異P<0.001。
結(jié)論:(1)HRG對人肝癌SMMC-7721細(xì)胞增殖有抑制作用,且具有一定的劑量和時間依賴性,同時能夠調(diào)控細(xì)胞周期,從而抑制細(xì)胞的增殖。(2) HRG具有抑制人肝SMMC-7721細(xì)胞遷移和侵襲的作用;其
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