人參皂苷脂肪酸結(jié)構(gòu)修飾與體外抗腫瘤活性研究.pdf

1、研究發(fā)現(xiàn)人參有抗腫瘤作用，其主要活性成分是人參多糖和人參皂苷。人參多糖的抗腫瘤作用可能是通過調(diào)節(jié)機體免疫功能實現(xiàn)的。人參皂苷的抗腫瘤作用及機制較為廣泛，其抗腫瘤機制可能是增強機體免疫力，抑制或殺傷腫瘤細(xì)胞。其抗腫瘤作用的最大優(yōu)勢是毒副作用很小。人參皂苷口服或靜脈注射后，在體內(nèi)以脂肪酸酯的形式被吸收。藥理實驗表明人參皂苷脂肪酸酯的抗腫瘤活性強于人參皂苷。本實驗根據(jù)上述機理，對人參皂苷進(jìn)行脂肪酸結(jié)構(gòu)修飾，以增加其抗腫瘤活性。 本實驗

2、采用ODS反相柱層析甲醇梯度洗脫分離人參莖葉總皂苷，60％甲醇洗脫部分直接獲得單體人參皂苷Rd。人參皂苷Re、Rg<,1>集中在20％-30％的甲醇洗脫部分。用ODS反相填料容易富集到目標(biāo)化合物，即二醇型皂苷、三醇型皂苷兩部分。通過硅膠柱層析分離得到人參皂苷Rg<,1>、Re，對他們進(jìn)行了物理、化學(xué)及高效液相色譜分析，確定了結(jié)構(gòu)。單體人參皂苷的獲得是本實驗研究脂肪酸修飾的前提。 本實驗根據(jù)人參皂苷腸內(nèi)菌代謝機理，前人研究體外合成

3、人參皂苷脂肪酸酯的基礎(chǔ)上，對單體人參皂苷Rg<,1>、Re進(jìn)行體外棕櫚酸?；Y(jié)構(gòu)修飾研究，得到兩種酯化產(chǎn)物，分別為人參皂苷Rg<,1>棕櫚酸二酯和3β，6α，12β-三棕櫚酸?；?20(22)，24-二烯-原人參三醇。方法是人參皂苷Rg<,1>和棕櫚酸酰氯按照一定比例混合，吡啶為溶媒，加熱反應(yīng)3小時后，濃縮回收溶劑得到黃色物質(zhì)。黃色物質(zhì)經(jīng)硅膠柱層析，氯仿-甲醇-水梯度洗脫，得到化合物Ⅰ?；衔铫窠?jīng)常規(guī)化學(xué)方法和現(xiàn)代波譜手段確定其結(jié)構(gòu)為R

4、G<,1>棕櫚酸二酯。同時該反應(yīng)中也獲得副產(chǎn)物人參皂苷Rh<,1>。采用反相高效液相色譜法測定了人參皂苷Rg<,1>棕櫚酸二酯的轉(zhuǎn)化率，轉(zhuǎn)化率結(jié)果為11.3％。高效液相色譜條件是40％乙腈等度洗脫，人參皂苷Rg<,1>棕櫚酸二酯與其它產(chǎn)物可達(dá)到基線分離。方法學(xué)考察結(jié)果表明該方法測定轉(zhuǎn)化率可靠、穩(wěn)定。 Re和棕櫚酸酰氯按照一定比例混合，氯仿為溶劑，加熱一定時間，得到褐色物質(zhì)。硅膠柱層析，石油醚一乙酸乙酯梯度洗脫，分離得到化合物Ⅱ，

5、經(jīng)常規(guī)化學(xué)方法和現(xiàn)代波譜手段確定其結(jié)構(gòu)為3β，6α，12β-三棕櫚酸酰基-20(22)，24-二烯-原人參三醇。 本實驗對兩種酯化產(chǎn)物進(jìn)行體外抗腫瘤活性研究。采用MTT法檢測兩種酯化產(chǎn)物對腫瘤細(xì)胞的抑制作用。結(jié)果表明兩種化合物對MFC胃癌細(xì)胞有不同程度的殺傷作用。 本文研究了ODS填料分離、純化人參莖葉總皂苷的方法；人參皂苷的酯化反應(yīng)及產(chǎn)物的分離、結(jié)構(gòu)鑒定；以及人參皂苷酯化產(chǎn)物的體外抗腫瘤實驗研究。此項研究為人參皂苷抗癌