白藜蘆醇自微乳的研制.pdf

1、目的:
　　白藜蘆醇(Resveratrol，Res)是一種含有芪類結(jié)構(gòu)的非黃酮類多酚化合物，大量存在于葡萄、花生等一些人們常吃的食物中。白藜蘆醇對(duì)維護(hù)人類的健康有重要作用，具有抗炎、抗癌、抗菌、抗氧化和保護(hù)心血管的作用。由于白藜蘆醇具有難溶于水、穩(wěn)定性差、生物利用度低、半衰期短、代謝和消除速率快等特性，大大限制了其臨床應(yīng)用。本研究根據(jù)白藜蘆醇的疏水性，制成自微乳制劑，旨在顯著提高白藜蘆醇的水溶性、穩(wěn)定性和生物利用度。
　　

2、方法:
　　1.白藜蘆醇自微乳的制備:通過(guò)比較白藜蘆醇在各種油相、表面活性劑和助表面活性劑中的溶解度，選取溶解度大的油相、表面活性劑和助表面活性劑進(jìn)行處方研究。通過(guò)偽三元相圖研究，以是否形成納米乳和成乳區(qū)域面積大小為標(biāo)準(zhǔn)，篩選并確定最佳處方。以三乙酸甘油酯作為油相、聚氧乙烯蓖麻油(Cremophor EL)和聚氧乙烯氫化蓖麻油(CremophorRH40)(2∶1)作為乳化劑、以異丙醇作為助乳化劑，在37℃水浴條件下，磁力攪拌混合

3、均勻，得到空白自微乳。將適量白藜蘆醇加入空白自微乳中，超聲溶解，即可得白藜蘆醇自微乳。
　　2.白藜蘆醇自微乳的鑒定方法:采用透射電鏡和粒徑檢測(cè)方法對(duì)白藜蘆醇自微乳的形成進(jìn)行驗(yàn)證。
　　3.白藜蘆醇自微乳的質(zhì)量研究:建立了HPLC法測(cè)定白藜蘆醇自微乳的含量和溶出度，并進(jìn)行方法學(xué)考察。以外觀、含量為指標(biāo)進(jìn)行影響因素和加速試驗(yàn)，考察其穩(wěn)定性情況。
　　4.大鼠在體單向腸灌流試驗(yàn):以SD大鼠為受試動(dòng)物，自制白藜蘆醇混懸液為參

4、比制劑。采用HPLC法測(cè)定腸灌流液中白藜蘆醇的濃度，通過(guò)重量法計(jì)算腸吸收速率、表觀分布系數(shù)，并對(duì)白藜蘆醇自微乳和混懸液的腸吸收情況進(jìn)行比較。
　　5.藥物動(dòng)力學(xué)試驗(yàn):以SD大鼠為受試動(dòng)物，自制白藜蘆醇混懸液為參比制劑。采用HPLC法測(cè)定灌胃白藜蘆醇自微乳后大鼠血液中的藥物濃度，對(duì)藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)和相對(duì)生物利用度進(jìn)行研究。
　　結(jié)果:
　　1.根據(jù)溶解度結(jié)果，選取中碳鏈脂肪酸甘油脂(MCT)、三乙酸甘油酯、Cremopho

5、r EL、Cremophor RH40、PEG400和異丙醇進(jìn)行處方研究。通過(guò)偽三元相圖研究，以是否形成納米乳和成乳區(qū)域面積大小為標(biāo)準(zhǔn)，確定最佳處方∶三乙酸甘油酯∶Cremophor EL∶ Cremophor RH40∶異丙醇∶=22∶27∶13.5∶37.8。
　　2.采用透射電鏡和粒徑檢測(cè)方法對(duì)白藜蘆醇自微乳進(jìn)行驗(yàn)證。透射電鏡結(jié)果顯示，形成的納米乳液滴，外觀圓整，大小均一，粒徑在15nm左右。采用馬爾文粒度儀檢測(cè)粒徑，結(jié)果顯

6、示粒徑在13-15nm，符合納米乳要求。表明白藜蘆醇自微乳制備成功。
　　3.建立了HPLC測(cè)定白藜蘆醇含量的方法，考察結(jié)果表明，在10μg/mL～200μg/mL范圍內(nèi)白藜蘆醇濃度與峰面積有良好的線性關(guān)系，回收率、穩(wěn)定性、精密度均符合方法學(xué)要求。白藜蘆醇自微乳穩(wěn)定性試驗(yàn)表明，在高溫40℃，相對(duì)濕度75％的條件下，其外觀仍為淡黃色澄清溶液，含量也無(wú)明顯變化。但在光照條件下，雖然外觀無(wú)明顯變化，但含量變化明顯，原因是白藜蘆醇在光照條

7、件下會(huì)發(fā)生順?lè)串悩?gòu)反應(yīng)和降解反應(yīng)，故需避光操作和保存。
　　4.通過(guò)大鼠在體單向腸灌流試驗(yàn)得出，白藜蘆醇自微乳的吸收速率常數(shù)(Ka)(×10-2min-1)和表觀分布系數(shù)(Papp)（×10-3cm/min）分別為1.352±0.05860，1.497±0.07827;白藜蘆醇混懸液的吸收速率常數(shù)(Ka)(×10-2min-1)和表觀分布系數(shù)（Papp）（×10-3cm/min）分別為0.659±0.08570，0.657±0.0

8、8991，且具有顯著性差異(P＜0.05)。結(jié)果表明，白藜蘆醇自微乳的腸吸收情況明顯好于白藜蘆醇混懸液。
　　5.通過(guò)大鼠藥物動(dòng)力學(xué)試驗(yàn)得出，白藜蘆醇的血管外給藥符合單室模型，自制白藜蘆醇自微乳與白藜蘆醇混懸劑相比，血藥峰時(shí)間Tmax和MRT有所延長(zhǎng)，峰濃度Cmax和AUC明顯增加。
　　結(jié)論:
　　白藜蘆醇自微乳的處方制備工藝，簡(jiǎn)單可行，且重現(xiàn)性好。有效提高了白藜蘆醇的溶解性，在一定程度上改善了白藜蘆醇光照易分解的特