化學(xué)修飾改造RhD（+）稀有血型.pdf

1、該實(shí)驗(yàn)的目的是選擇適合修飾人工紅細(xì)胞Rh血型的甲氧基聚乙二醇衍生物,將RhD(+)血型改造為RhD(-)血型,為解決臨床上RhD(-)血源嚴(yán)重缺乏打下基礎(chǔ).實(shí)驗(yàn)比較了四種不同端基的甲氧基聚乙二醇(mPEG)對(duì)RhD(+)血型抗原的修飾效果;觀察了mPEG修飾對(duì)紅細(xì)胞結(jié)構(gòu)功能及形態(tài)的影響;建立了雙水相分離系統(tǒng)將修飾與未修飾的紅細(xì)胞分開并判定修飾的比例;觀察了修飾后紅細(xì)胞4℃下保存期;分析了mPEG與紅細(xì)胞膜的結(jié)合穩(wěn)定性;并使用mPEG修飾

2、小鼠紅細(xì)胞,進(jìn)行小動(dòng)物輸血實(shí)驗(yàn),觀察了mPEG修飾對(duì)紅細(xì)胞在受試動(dòng)物體內(nèi)壽命的影響.實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明在四種mPEG中,以mPEG-BTC的修飾效果最好,在溫和、接近于生理的條件下可以將RhD(+)抗原充分遮蔽,表現(xiàn)出RhD(-)紅細(xì)胞的性質(zhì);mPEG修飾沒有影響紅細(xì)胞的結(jié)構(gòu)功能,包括滲透脆性、自身溶血、乙酰膽堿酯酶活性、膜膽固醇含量、ATP、2,3-DPG、紅細(xì)胞變形性以及紅細(xì)胞形態(tài)等;mPEG修飾紅細(xì)胞的比例可達(dá)80％以上;修飾后紅細(xì)胞4

3、℃下可保存21天;保存期內(nèi)mPEG與紅細(xì)胞膜穩(wěn)定結(jié)合;小鼠的體內(nèi)實(shí)驗(yàn)證明修飾不會(huì)減短紅細(xì)胞在受試動(dòng)物體內(nèi)的壽命.該實(shí)驗(yàn)還收集到臨床疑難配血病例6例,用譜細(xì)胞篩查方法確認(rèn)它們均含有RhD抗體,病例來自新生兒溶血病產(chǎn)婦及腫瘤和肝硬化患者,這些病例均難以找到合適的供體紅細(xì)胞.采用mPEG-BTC修飾后的紅細(xì)胞可與患者血清相配,聚凝胺及抗人球蛋白法檢測(cè)結(jié)果說明修飾后紅細(xì)胞與疑難血清不出凝集現(xiàn)象,為解決輸血中含RhD抗體患者的疑難配血和輸血問題打