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1、化學修飾電極在分子層面上實現(xiàn)了對電極功能的設(shè)計,可以按意圖賦予電極預(yù)定的功能,以便能選擇性地進行檢測反應(yīng)。本文主要研究了三種化學修飾玻碳電極的制備及其在生物傳感與化學傳感中的應(yīng)用,主要包括以下內(nèi)容：
⑴通過共價鍵合法將轉(zhuǎn)錄因子Sp1修飾在玻碳電極表面,并以之作為探針使用交流阻抗法(EIS)與差示脈沖法(DPV)檢測其與樣品DNA的特異性結(jié)合。結(jié)果顯示,我們的方法可有效地將活性Sp1修飾到電極表面,且該修飾電極不僅可用于研究
2、Sp1與其DNA識別序列在不同條件下的結(jié)合和解離,還可用于研究點突變與抑制劑(抗癌藥品光輝霉素)對結(jié)合的影響。此外,對該修飾電極的特異性、靈敏度、重復性以及再生能力都進行了研究,結(jié)果表明其能夠在大量無關(guān)DNA序列中檢測出低至1×10-10mol/L的特異性結(jié)合序列(wtDNA)。
⑵在上述修飾電極的基礎(chǔ)上,為進一步提高電極性能,以葡萄糖為原料通過水熱法制備了有良好生物相容性和導電性的碳納米球(CNP),使用CNP修飾玻碳電
3、極后再與Sp1通過酰胺鍵偶聯(lián)。結(jié)果顯示,CNP的修飾進一步優(yōu)化了該蛋白修飾電極的檢測性能,具體表現(xiàn)在:檢測信號的背景干擾降低、信噪比明顯增大,對wtDNA檢測限降低了5個數(shù)量級達到1 fM,且電極的再生能力得到了極大的增強,有望成為一種快速而有效的檢測手段,以用于DNA結(jié)合蛋白與其識別序列間相互作用的研究,及對其新DNA識別位點的篩查和新型藥物抑制劑的篩選。
⑶使用Nafion膜將半胱氨酸修飾的碳納米球固定在玻碳電極表面,
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