Neuroserpin對視網(wǎng)膜缺血再灌注損傷的保護功能及其作用機制的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:Neuroserpin作為一種功能性的絲氨酸蛋白酶抑制劑，在中樞發(fā)揮重要的神經(jīng)保護功能，并且其神經(jīng)保護功能是否跟其組織型纖溶酶原激活劑的抑制活性相關頗受爭議。本課題旨在探討NSP對視網(wǎng)膜缺血再灌注損傷的保護功能及其保護功能是否依賴于對組織型纖溶酶原激活劑的抑制。
　　方法:本課題主要使用了野生鼠(WT)和tPA基因敲除鼠（tPA-/-）。先采用微量注射器對成年鼠玻璃體腔注射1ul的NSP或者時等體積胎牛血清(BSA)對照液，

2、然后采用前房灌注系統(tǒng)急性升高眼內(nèi)壓至120mmhg并持續(xù)60mins，建立視網(wǎng)膜缺血再灌注損傷模型。在建模之后1天、7天采用ERG技術對缺血再灌注損傷后視網(wǎng)膜功能進行評估，采用TUNEL染色對視網(wǎng)膜結(jié)構進行評估，同時采用蛋白印記(western blot)技術對視網(wǎng)膜caspase-3、cleaved caspase-3、caspase-9、cleaved caspase-9、caspase-8、cleaved caspase-8、PA

3、RP及cleaved PARP進行測量。最后，采用免疫熒光技術和western blot技術探究NSP在視網(wǎng)膜缺血灌注注損傷中的表達及其表達的分布。
　　結(jié)果:通過實驗發(fā)現(xiàn)，視網(wǎng)膜缺血再灌注損傷導致嚴重的視網(wǎng)膜功能損害和視網(wǎng)膜神經(jīng)元凋亡，而預先玻璃體腔預注射NSP顯著保護視網(wǎng)膜損傷，而且NSP的視網(wǎng)膜保護功能在WT和tPA-/-鼠中相似。同時實驗發(fā)現(xiàn)在缺血損傷的視網(wǎng)膜中，caspase-3， caspase-9、PARP顯著激活，

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