電刺激大鼠小腦頂核對缺血再灌注條件下視網(wǎng)膜的保護(hù)作用及其機(jī)制的研究.pdf

1、[目的]:對視網(wǎng)膜缺血-再灌注損傷模型大鼠的小腦頂核進(jìn)行電刺激,通過檢測內(nèi)視網(wǎng)膜厚度比率;觀察視網(wǎng)膜細(xì)胞超微結(jié)構(gòu);檢測視網(wǎng)膜細(xì)胞膜Na<'+>-K<'+>-ATP酶活力;檢測視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞凋亡率及視網(wǎng)膜細(xì)胞Bcl-2蛋白和Bax蛋白的表達(dá),探討電刺激大鼠小腦頂核(cerebellar fastigial nucleus,CFN)對視網(wǎng)膜缺血-再灌注損傷的保護(hù)作用及其機(jī)制.[方法]:99只大鼠隨機(jī)均分為三組,缺血-再灌注損傷組、缺血-再

2、灌注治療組和假手術(shù)組.①缺血-再灌注損傷組是通過結(jié)扎大鼠視網(wǎng)膜血管和視神經(jīng)不同時間(30分鐘、60分鐘或90分鐘),再恢復(fù)血液灌注6小時制作,其后摘除眼球;②缺血-再灌注治療組是在缺血-再灌注損傷組的基礎(chǔ)上,于再灌注時用腦循環(huán)功能治療儀電刺激大鼠小腦頂核1小時,再恢復(fù)血液灌注6小時后摘除眼球;③假手術(shù)組大鼠的小腦頂核插入電極,縫線只圍繞視網(wǎng)膜血管及視神經(jīng)但不結(jié)扎,分別持續(xù)30分鐘、60分鐘或90分鐘后去除縫線,再等待6小時,其后摘除眼球

3、.所有大鼠均取左眼作為檢測標(biāo)本.檢測方法如下:(1)用圖像分析儀定量內(nèi)視網(wǎng)膜厚度、視網(wǎng)膜總厚度,計算內(nèi)視網(wǎng)膜厚度比率改變;(2)通過透射電鏡觀察視網(wǎng)膜細(xì)胞形態(tài)和超微結(jié)構(gòu)的變化;(3)用ATP酶試劑盒檢測細(xì)胞Na<'+>-K<'+>-ATP酶活力;(4)用TUNEL試劑盒檢測視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞凋亡率;(5)用免疫組織化學(xué)染色法檢測視網(wǎng)膜細(xì)胞Bcl-2蛋白和Bax蛋白的表達(dá).[結(jié)論]:電刺激小腦頂核(cerebellar fastigal n