小腦頂核對大鼠胃缺血-再灌注損傷的調(diào)控機制.pdf

1、目的:傳統(tǒng)認為小腦是皮層下的軀體性運動控制中樞,但近年來的研究資料表明,小腦不僅具有經(jīng)典的軀體性運動調(diào)節(jié)功能,還參與了非軀體性活動的調(diào)節(jié)。本研究旨在探討刺激小腦頂核在減輕大鼠胃缺血-再灌注損傷中的作用及其調(diào)控機制。
　　 方法:本實驗采用健康Sprague-Dawley大鼠,采用化學刺激(注射L-Glu)、電刺激以及夾閉大鼠腹腔動脈30 min,松開動脈夾血流復(fù)灌1 h的胃缺血-再灌注(gastric ischemia-repe

2、rfusion,GI-R)模型,觀察了FN注射一定劑量L-谷氨酸(L-Glu)對大鼠GI-R后胃黏膜損傷指數(shù)和細胞增殖凋亡相關(guān)因子的表達變化;進一步采用損毀小腦上腳交叉(XSCP)、下丘腦外側(cè)區(qū)(LHA)、下丘腦室旁核(PVN)、切斷膈下迷走神經(jīng)或切除腹腔交感神經(jīng)節(jié)及應(yīng)用受體阻斷劑、激動劑,觀察了其他相關(guān)核團、外周神經(jīng)以及抑制性神經(jīng)遞質(zhì)GABA在FN刺激減輕大鼠GI-R損傷中的作用;最后運用免疫組化及免疫印跡等實驗技術(shù),觀察了Fas,F

3、asL蛋白在刺激FN對大鼠GI-R損傷的保護效應(yīng)中的表達變化。
　　 結(jié)果:
　　 (1)電、化學刺激小腦FN,使GI-R損傷顯著減輕,且有強度和劑量-效應(yīng)依賴關(guān)系;
　　 (2)刺激小腦FN,使胃黏膜細胞的凋亡率降低,增殖率升高;
　　 (3)事先化學損毀小腦FN,然后對其再行刺激,則可消除對GI-R損傷減輕的作用;
　　 (4)刺激小腦FN,使內(nèi)臟大神經(jīng)放電頻率減少和放電幅度降低;化學損毀雙側(cè)

4、下丘腦外側(cè)區(qū)(lateral hypothalamic area,LHA),再刺激FN,內(nèi)臟大神經(jīng)的放電頻率、幅度都無明顯變化,與刺激FN前相比,差異無統(tǒng)計學意義;
　　 (5)化學損毀雙側(cè)LHA能取消刺激小腦FN對大鼠GI-R損傷的減輕作用;
　　 (6)刺激小腦FN使缺血-再灌注的胃黏膜的超氧化物歧化酶(SOD)活性升高、丙二醛(MDA)含量降低;
　　 (7)事先FN內(nèi)注射GABA合成標志酶.谷氨酸脫羧酶抑

5、制劑3-MP或LHA內(nèi)注射GABAAR拮抗劑bicucullin methbromide能取消刺激小腦FN對大鼠GI-R損傷的減輕作用;
　　 (8)事先LHA內(nèi)注射GABAAR激動劑muscimol能加強刺激小腦FN對GI-R損傷的減輕作用;
　　 (9)LHA內(nèi)單獨注射GABA能減輕GI-R損傷;
　　 (10)刺激小腦FN能夠增加再灌注不同時間點的GMBF:
　　 (11)刺激小腦FN能明顯降低胃缺

6、血.再灌注不同時間點Fas蛋白的表達水平,而對FasL蛋白的表達變化無明顯影響。
　　 結(jié)論:刺激小腦FN對大鼠GI-R損傷有保護作用;該保護作用是由FN釋放抑制性氨基酸GABA,作用于IMA神經(jīng)元胞膜上的GABAAR,促使交感神經(jīng)的下傳沖動減少,支配胃的血流量增多所致:GMBF的增多直接或間接地促進了胃黏膜細胞的增殖,抑制了胃黏膜細胞的凋亡,同時增強了胃黏膜細胞的抗氧化能力,從而減輕胃黏膜的損傷;此外,刺激FN減輕大鼠GI-R