阿魏酸鈉對家兔胃缺血-再灌注損傷的影響.pdf

1、目的：本實驗通過建立家兔失血性休克-再灌注致胃粘膜損傷模型，觀察阿魏酸鈉對其胃粘膜組織一氧化氮(NO)、內(nèi)皮素(ET)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、血栓素B2(TXB2)、6-酮前列環(huán)素-F1a(6-Keto-PGF1a)的含量及光、電鏡下胃粘膜組織結(jié)構(gòu)的影響，以探討阿魏酸鈉對家兔胃缺血.再灌注損傷的作用及其機制，為臨床救治急性失血性休克，并避免或減少有此所致的缺血.再灌注損傷并發(fā)癥提供參考。 方法：將60只家兔

2、采用隨機數(shù)字表法分成4組：A組為正常對照組，B組為胃缺血-再灌注損傷模型組，C組再灌注前20 min應用阿魏酸鈉組，D組為再灌注后30 min應用阿魏酸鈉組，每組15只。動物稱重后，耳緣靜脈注射戊巴比妥鈉30mg/kg。麻醉成功后，于耳緣靜脈固定留置針接三通待用于輸血、輸液及用藥。將動物仰臥位固定于兔臺上，頸腹部剪毛后，于頸正中切口行氣管切開插管術(shù)，保留自主呼吸。將動物全身肝素化(3mg/kg)后，分離右頸總動脈并置管連接BL-420E

3、+生物機能實驗系統(tǒng)記錄儀，以連續(xù)監(jiān)測平均動脈壓與心率。分離股動脈放置留置針并固定，接三通用于放血。A組行上述操作后不放血，B、C及D組上述操作完成后穩(wěn)定20min，從股動脈快速(10min內(nèi))放血至平均動脈壓(MAP)降至35～40mmHg，維持60min，然后自耳緣靜脈30min內(nèi)回輸全部失血及等量生理鹽水(再灌注)。 再灌注前20min，C組由耳緣靜脈于5min內(nèi)一次性緩慢靜脈注射阿魏酸鈉30mg/kg(阿魏酸鈉注射液用生理

4、鹽水稀釋至20ml)，而A、B及D三組注入等容量生理鹽水。再灌注后30min時，D組以同樣方法自耳緣靜脈緩慢注射阿魏酸鈉30mg/kg，而A、B及C三組注入等容量生理鹽水。于再灌注90min時經(jīng)耳緣靜脈空氣栓塞處死所有動物，迅速取胃。取胃體近大彎側(cè)部分胃粘膜組織，按所測生化及放免指標的要求制備相應的組織勻漿，行指標測定：用考馬斯亮蘭法測定組織蛋白含量，用硫代巴比妥酸法測定MDA含量，用黃嘌呤氧化酶法測定SOD活性，用硝酸還原酶法測定NO

5、含量，用放射免疫法測定ET、TXB2及6-Keto-PGF1a的含量，計算TXB2/6-Keto-PGF1a比值。上述所測指標均用組織蛋白含量校正。另取胃體近大彎側(cè)部分全層胃組織，制作光、電鏡標本。光鏡下觀察胃粘膜組織結(jié)構(gòu)的改變，掃描電鏡下觀察胃粘膜超微結(jié)構(gòu)的變化。結(jié)果：60只家兔均進入實驗結(jié)果分析，于再灌注90min時間點。 結(jié)果： 1.光鏡顯示：A組胃粘膜上皮細胞基本完整，腺體結(jié)構(gòu)排列整齊，未見炎性細胞浸潤；B組胃粘

6、膜上皮細胞壞死、重度脫落，腺體結(jié)構(gòu)排列紊亂，有大量炎性細胞浸潤和出血點，并有潰瘍侵及腺體中部；C組胃粘膜上皮細胞輕度脫落，腺體結(jié)構(gòu)排列不規(guī)則，有少量炎性細胞浸潤；D組胃粘膜上皮細胞中度脫落，腺體結(jié)構(gòu)缺損、排列紊亂，有炎性細胞浸潤，并有累及腺體上部的小潰瘍。 2.掃描電鏡顯示：A組胃粘膜表面稍呈波浪狀，胃粘膜上皮細胞緊密排列在胃腺孔周圍，大小相似，如卵石堆砌； B組胃粘膜上皮細胞潰爛、脫落，細胞界限不清，胃腺細胞缺損不易辨

7、認，胃小凹明顯增寬；C組胃粘膜表層細胞呈扁平或不規(guī)則形態(tài)，少部分細胞缺損或破潰，細胞間隙正常，胃小凹開口稍有增寬；D組胃粘膜表層細胞形態(tài)明顯不規(guī)則，部分缺損或破潰，細胞間隙基本正常，胃小凹開口增寬。 3.胃粘膜組織MDA含量和SOD活性：與A組比較，B、C、D三組MDA含量均升高(P<0.01)，SOD活性均降低(P<0.01.)。與B組比較，C、D兩組MDA含量均降低(P<0.05或0.01)，SOD活性均升高(P<0.05或

8、0.01)。與C組比較，D組MDA含量升高(P<0.05)，SOD活性降低(P<0.05)。 4 TXB2、6-keto-PGF1a含量及TXB2/6-keto-PGF1a比值：與A組比較，B、C、D三組TXB2含量及TXB2/6-keto-PGF1a比值均升高(P<0.01)，而6-keto-PGF1a含量均降低(P<0.05或0.01)。與B組比較，C、D兩組TXB2含量及TXB2/6-keto-PGF1a比值均降低(P<0

9、.05或0.01)，而6-keto-PGF1a含量均升高(P<0.05或0.01)。與C組比較，D組TXB2含量及TXB2/6-keto-PGF1a比值均升高(P<0.05或0.01)，而6-keto-PGF1a含量降低(P<0.05)。 5 胃粘膜組織ET和NO含量： 與A組比較，B、C、D三組ET和NO含量均升高(P<0.01)。與B組比較，C、D兩組ET和NO含量均降低(P<0.05或<0.01)。與C組比較，D組