安徽省艾滋病重點(diǎn)監(jiān)測(cè)人群的HCV基因型分布特征調(diào)查.pdf

1、目的：闡明安徽省艾滋病重點(diǎn)監(jiān)測(cè)人群（DUS、MSM、FSW、STD、DRV、MPO、PRG、YST）的HCV基因型分布特征，分析并比較不同人群的HCV基因型分布是否存在差異；闡述安徽省HCV基因型在人群的性別、年齡和感染途徑等社會(huì)人口學(xué)特征中的分布差異性，為分析HCV傳播和流行提供科學(xué)依據(jù)。
　　方法：本研究采取橫斷面調(diào)查的方法，南北中共選取蕪湖、安慶、宿州、阜陽(yáng)、合肥五個(gè)地級(jí)市為調(diào)查點(diǎn)；根據(jù)全國(guó)艾滋病哨點(diǎn)監(jiān)測(cè)方案，在2012年至

2、2014年4月1日-6月30日期間分別采用滾雪球（DUS和MSM）、分層比例抽樣和動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)（FSW）、動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)（STD、DRV、PRG）、網(wǎng)絡(luò)招募（MSM）和分階段整群抽樣（YST）5種不同抽樣方法對(duì)監(jiān)測(cè)人群進(jìn)行HCV抗體篩查。本研究蕪湖市共篩查6098人，抗-HCV陽(yáng)性37人，從中收集樣本28份血清；安慶市共篩查4421人，抗-HCV陽(yáng)性24人，從中收集樣本22份血清；宿州市共篩查2216人，抗-HCV陽(yáng)性18人，從中收集樣本13份血

3、清；阜陽(yáng)市共篩查3784人，抗-HCV陽(yáng)性48人，從中收集樣本35份血清；合肥市共篩查9700人，抗-HCV陽(yáng)性291人，從中收集樣本265份血清。將2012-2014年全部HCV抗體陽(yáng)性者共363份血清進(jìn)行RT-PCR檢測(cè)，提取RNA并對(duì)其擴(kuò)增，擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行測(cè)序后用于基因比對(duì)及分型。所有監(jiān)測(cè)人群的招募對(duì)象在進(jìn)行知情同意后，進(jìn)行匿名問卷調(diào)查。另外，本研究還收集合肥和滁州醫(yī)院門診及住院病例抗-HCV陽(yáng)性血漿進(jìn)行核酸檢測(cè)，并對(duì)其基本信息進(jìn)行

4、登記。
　　血清學(xué)檢測(cè)包括HCVRNA的提取和擴(kuò)增；分子生物學(xué)包括HCV核酸擴(kuò)增產(chǎn)物測(cè)序和基因型分型。測(cè)定序列拼接使用ContigExpress/ChromasPro和BioEdit軟件；基因型判別通過運(yùn)用Mega6.0的臨近法與Genbank中的標(biāo)準(zhǔn)株全基因序列比對(duì),共同構(gòu)建HCV NS5B和CE2區(qū)段系統(tǒng)進(jìn)化樹。
　　調(diào)查資料運(yùn)用Epi Data3.1建立數(shù)據(jù)庫(kù)，錄入數(shù)據(jù)，采用SPSS17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，統(tǒng)計(jì)分析方

5、法主要包括頻數(shù)分布、正態(tài)性檢驗(yàn)、χ2檢驗(yàn)和方差分析。
　　結(jié)果：
　　1.篩查艾滋病重點(diǎn)監(jiān)測(cè)人群共26219人，抗-HCV陽(yáng)性共418人，其中DUS1770人（抗-HCV陽(yáng)性286人）、FSW4648人（抗-HCV陽(yáng)性39人）、STD4866人（抗-HCV陽(yáng)性32人）、MSM2871（抗-HCV陽(yáng)性21人）、DRV813人（抗-HCV陽(yáng)性2人）、MPO3209人（抗-HCV陽(yáng)性23人）、PRG4000人（抗-HCV陽(yáng)性12人

6、）、YST4042人（抗-HCV陽(yáng)性3人），抗體陽(yáng)性率分別為16.16％（DUS）、0.84%（FSW）、0.66%（STD）、0.73%（MSM）、0.25%（DRV）、0.72%（MPO）、0.30%（PRG）和0.07%（YST）。本研究從中共收集363份血清，對(duì)各類人群HCV抗體陽(yáng)性標(biāo)本進(jìn)行核酸檢測(cè)，共檢出核酸陽(yáng)性214份（DUS152份、FSW22份、STD17份、MSM9份、MPO9份、PRG4份和DRV1份），YST未檢出

7、HCV核酸陽(yáng)性。核酸檢出率分別為57.36%（DUS）、70.59%（FSW）、76.19%（STD）、66.67%（MSM）、100%（DRV）、45.00%（MPO）、44.44%（PRG）和0.00%（YST）。所收集的16份抗-HCV陽(yáng)性血漿，共檢出核酸8份。
　　2.研究結(jié)果顯示，DUS人群中HCV單獨(dú)基因型共有八種，混合基因型三種，各型所占比例分別為：3b型39.47%、3a型21.71%、1b型11.84%、6n型9

8、.21%、6a型6.58%、6u型3.29%、2a型2.63%和1a型0.66%，混合型1b/3b型和2a/3b型均占1.32%，3a/3b型占1.35%；FSW人群中HCV基因型共有五種，所占比例分別是1b型56.52%，6a型21.74%，3a型13.04%，2a和3b亞型，均為4.35%；MSM人群中有三種HCV基因型，1b型75.00%，2a和6a亞型具有相同比例，均占12.50%；STD人群中也檢出三種HCV基因型，各型所占比

9、例分別為1b型70.59%，6a型23.53%和6n型5.88%；DRV人群中僅檢出1份HCV RNA陽(yáng)性標(biāo)本，HCV基因型為1b亞型；MPO人群中檢出兩種HCV基因型，分別為1b型55.56%和2a型44.44%；PRG人群中共檢出4例，1a型2例，占50.00%，3a和6a各檢出1例，均占25.00%；GP人群中也檢出兩種HCV基因型，分別為1b型75.00%和2a型25.00%。研究中未發(fā)現(xiàn)4、5和7型三種基因型。
　　3.

10、正確HCV基因分型且性別資料明確的149份吸毒人群樣本中，男性100名，以3b型為主，其次為3a型，分別占38.00%和22.00%，6型和1型也占相當(dāng)大比例，分別為21.00%和15.00，混合型僅檢出1份；女性49名，也以3b型為主，3a型次之，所占比例分別為44.90%和22.45%，6型和混合型所占比例較小，分別為14.29%和10.20%。丙肝患者中男性3名，女性5名，以1b型（37.5%）為主，其次是2a(62.5%)型。由

11、于研究例數(shù)限制及監(jiān)測(cè)人群的特點(diǎn)，僅對(duì)吸毒人群（DUS）和丙型肝炎患者（GP）的157份樣本進(jìn)行HCV基因型的性別特征進(jìn)行匯總分析，經(jīng)確切概率檢驗(yàn)，HCV基因型在兩種人群性別中的分布無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（F=9.589，P>0.05）。
　　4.吸毒人群HCV基因型在年齡上的分布特征表現(xiàn)為：<45歲年齡組的不同HCV基因型所占的比例分別為3b型（37.21%）、3a（22.48%）、6型（20.16%）1型（13.18%）和混合型（4.65

12、%），2a亞型所占比例最小（2.33%）；≥45歲年齡組的HCV基因型所占的比例分別為，3b型（60.00%）、3a型（20.00%）、6型（10.00%）和1型（10.00%），混合基因型在該年齡組沒有檢出。HCV基因型在吸毒人群兩個(gè)年齡組中的總體分布差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=6.159，P>0.05）；但感染3型在兩年齡組中均有較高比例，混合基因型僅見于低年齡組。FSW、STD、MSM人群中小于45歲年齡組的HCV基因型分布以1b型為

13、主（28份），其次為6型（10份）；45歲及以上年齡組的HCV基因型只有1型（3份）和6型（1份），2型和3型在該年齡組中未檢測(cè)出。 DRV、MPO、PRG和GP人群中小于45歲年齡組的HCV基因型分布以1b型（7份）為主，2a型次之（3份），3b型在該年齡組中未檢測(cè)出；45歲及以上年齡組的HCV基因型僅有1b（7份）和2a（3份）亞型，3型和6型在該年齡組中均未檢測(cè)出。以上分析可以看出，1型在除吸毒人群以外的7類人群的兩年齡組中均有較

14、高比例；但6型僅在FSW、STD、MSM人群的兩年齡組有較高比例，且2型和3型在高年齡組中未檢測(cè)出；2a型僅在DRV、MPO、PRG和GP人群的兩年齡組中有較高比例，而3型和6型在高年齡組中均未檢測(cè)出。年齡(計(jì)量資料)滿足正態(tài)分布，平均年齡（35.4±9.46）歲，采用單因素方差分析，差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=1.012，P>0.05）。
　　5.219份抗-HCV陽(yáng)性人群中，68.04%有吸毒傳播史，21.92%為性傳播，10.

15、05%來(lái)自其他感染途徑如輸血和其他不明原因的傳播路徑。經(jīng)確切概率檢驗(yàn)，HCV基因型在不同感染途徑中的分布存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（F=98.046，P<0.01）。吸毒途徑傳播中HCV基因型主要為3（3a/3b）型和6（6a/6n/6u），分別占62.42%和18.79%，其次是1型（1a/1b）（12.75%），2a型占有較小比例（2.01%）；經(jīng)性接觸傳播包括FSW、MSM和STD人群，其HCV基因型分布以1型為主（64.58%），其次為6型

16、（22.92%），2型和3型也占有一定比例，分別為4.17%和8.33%；其他感染途徑包括DRV、PRG、GP和MPO三類人群，主要為輸血和不明原因的傳播，其HCV基因型主要以1型（63.64%）和2型（27.27%）為主，3型（4.55%）和6型（4.55%）均占較小比例。
　　6. HCV NS5B區(qū)測(cè)出216份序列，C/E2區(qū)測(cè)出178份，兩區(qū)同測(cè)出172份，165份樣本兩區(qū)測(cè)出分型結(jié)果一致，可以確定基因型，基因分型總體一致

17、率為95.93%（165/172）；7份兩區(qū)測(cè)出分型結(jié)果不一致，混合基因型分別為1b/3b混合型2份、3a/3b混合型3份和2a/3b混合型2份。
　　結(jié)論：安徽省艾滋病重點(diǎn)監(jiān)測(cè)人群中流行的HCV單獨(dú)基因亞型有1a、1b、2a、3a、3b、6a、6n和6u共8種，目前尚未見安徽省對(duì)1a型、3型、6型及混合型的文獻(xiàn)報(bào)道；本研究未發(fā)現(xiàn)4、5和7型三種基因型。
　　不同人群中基因型分布具有明顯差異，DUS人群中主要流行的HCV基因