

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文檔簡介
1、目的:
檢測ADD3及其剪接體在結直腸癌(CRC)組織、結直腸息肉組織以及人CRC細胞株SW480和SW620中的表達情況,分析ADD3及其剪接體與CRC的相關關系,探討ADD3及其剪接體在CRC發(fā)生發(fā)展中的可能作用及其臨床意義。
方法:
建立T-ADD3、ADD3(-14)和ADD3(+14)Taqman實時熒光定量逆轉錄聚合酶鏈反應(FQ-RT-PCR)的方法。用此方法對收集來自本院2012年7月-20
2、13年9月期間的50對CRC組織,20對結直腸息肉組織進行檢測。用奧沙利鉑和5-FU分別干預人CRC細胞株SW480(低侵襲性)和SW620(高侵襲性的),用建立的FQ-RT-PCR檢測干預前后各樣本中ADD3及剪接體的表達水平。結果用SPSS17.0統(tǒng)計軟件進行分析。
結果:
1.成功建立了T-ADD3、ADD3(-14)和ADD3(+14)Taqman FQ-R T-P CR的方法,擴增效率(95%-100%之間
3、),重復性穩(wěn)定(批間和批內CV<1%)。
2.在 CRC組織中 T-ADD3與 ADD3(-14)表達低于正常組織(P<0.001), ADD3(+14)/(-14)比值高于正常組織(P<0.001)。
3.在結直腸息肉組織中T-ADD3、ADD3(-14)、ADD3(+14)較正常組織表達減少(P<0.01),ADD3(+14)/(-14)比值與正常組織相比無顯著差異(P>0.05)。
4.SW620中
4、ADD3(-14)、ADD3(+14)較 SW480表達減少(P<0.01, P<0.05),ADD3(+14)/(-14)比值高于SW480(P<0.001)。
5.經奧沙利鉑和5-FU分別處理兩株細胞后發(fā)現(xiàn)SW620升高較SW480顯著:SW480僅ADD3(+14)表達增加,SW620的ADD3(-14)、ADD3(+14)均有不同程度的升高,SW620的T-ADD3僅在奧沙利鉑組升高顯著。
結論:
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