雷公藤內(nèi)酯醇對EAE小鼠IFN-γ、IL-10和TGF-β1等細(xì)胞因子表達(dá)影響的研究.pdf

1、目的:多發(fā)性硬化(multiple sclerosis,MS)的發(fā)病中，免疫學(xué)因素起著關(guān)鍵的作用。本實驗采用小鼠實驗性自身免疫性腦脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis，EAE)模型，用免疫制劑雷公藤內(nèi)酯醇(triptolide，Tri)對其進(jìn)行干預(yù)，通過對Th1、Th2、Th3分泌的多個細(xì)胞因子表達(dá)進(jìn)行觀察，從Th1/Th2細(xì)胞免疫偏移、調(diào)節(jié)性T細(xì)胞功能等方面對MS免疫病理機(jī)制進(jìn)行研

2、究，為多發(fā)性硬化的治療尋求一種有效途徑。
　　 方法：雌性C57BL/6黑色小鼠45只，按相同的平均體重將其分為3組：EAE組(15只)，Tri治療組(15只)，佐劑組(15只)，采用EAE法建立MS的實驗動物模型。Tri治療組從免疫后(post-immunization，p.i.)5天開始按照50μg/(kg·d)腹腔注射Tri，EAE組和佐劑組同期注射等量的生理鹽水，直至p.i.15停止。按照國際通用的五分制評分法，采用雙人

3、雙盲的方式隔天觀察和評估各組小鼠臨床癥狀，觀察發(fā)病率、體重變化、平均起始發(fā)病時間、平均最高臨床評分。于p.i.38-40天處死動物，解剖分離脊髓并制成石蠟切片，行HE、LFB髓鞘染色和IL-10、IFN-γ、TGF-β1、TNF-a和IL-12免疫組化染色。采用SPSS13.0軟件對所得數(shù)據(jù)進(jìn)行分析處理。
　　 結(jié)果:
　　 1.利用MOG35～55多肽成功地誘導(dǎo)了C57BL/6小鼠EAE模型，HE染色可見脊髓有“袖套樣

4、”炎性細(xì)胞浸潤。LBF髓鞘染色可見EAE組小鼠脊髓髓鞘脫失。與EAE組相比，Tri治療組發(fā)病率、體重改變、平均最高癥狀評分差別均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，炎性細(xì)胞浸潤明顯減輕。
　　 2.EAE組、Tri治療組和佐劑組小鼠脊髓中均有IL-10、IFN-γ、TGF-β1、TNF-α和IL-12表達(dá)。與佐劑組相比，EAE組IFN-γ、TNF-α、IL-12表達(dá)增高(p＜0.05)，TGF-β1、IL-10表達(dá)降低(p＜0.05)

5、。與EAE組相比，Tri治療組IFN-γ、TNF-α、IL-12表達(dá)降低(p＜0.05)，IL-10、TGF-β1表達(dá)增加(p＜0.05)。
　　 結(jié)論:
　　 1.Tri可以有效治療小鼠EAE，減低發(fā)病率、緩解發(fā)病高峰癥狀，減輕炎性浸潤和髓鞘破壞。
　　 2.Tri有效抑制小鼠EAE的可能機(jī)制：抑制INF-γ、IL-12和TNF-a等促炎性細(xì)胞因子分泌，促進(jìn)IL-10、TGF-β1等保護(hù)性細(xì)胞因子的分泌；逆轉(zhuǎn)T