VEGF、miR-205及其靶蛋白Ezrin、LaminA-C在卵巢癌中的表達及意義.pdf

1、早期轉(zhuǎn)移是卵巢癌的惡性特征之一，但其轉(zhuǎn)移機制尚未明確。血管內(nèi)皮生長因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)在卵巢癌患者血清以及癌組織中高表達，并促進腫瘤細胞的生長、侵襲和轉(zhuǎn)移。本課題組前期對VEGF誘導上皮性卵巢癌細胞株HO-8910后進行比較蛋白質(zhì)組學研究，鑒定出17種差異蛋白，結(jié)合文獻發(fā)現(xiàn)其中兩種差異蛋白:Ezrin和Lamin A/C與上皮性卵巢癌侵襲轉(zhuǎn)移高度相關，推測VEGF可能通過

2、直接或間接調(diào)控二者，參與卵巢癌侵襲轉(zhuǎn)移。同時利用生物信息學方法預測miR-205在Ezrin和Lamin A/C的3'UTR均有結(jié)合位點。進一步通過miRNA基因芯片檢測VEGF誘導后HO-8910的miRNA表達譜，發(fā)現(xiàn)其miR-205表達上調(diào)。由此推測，VEGF可能部分通過miR-205調(diào)節(jié)Ezrin和Lamin A/C的表達實現(xiàn)調(diào)控卵巢癌侵襲和轉(zhuǎn)移。
　　目的:
　　進一步探討VEGF、miR-205及其靶蛋白Ezri

3、n、Lamin A/C在卵巢癌組織中的表達及意義。
　　方法:
　　采用ELISA檢測上皮性卵巢癌及健康志愿者血清中VEGF的含量;采用免疫組化檢測上皮性卵巢癌組織、卵巢良性腫瘤組織和正常卵巢組織中血管內(nèi)皮生長因子受體1(vascular endothelial growthfactor receptor1,VEGFR-1)、VEGFR-2、Ezrin、Lamin A/C蛋白的表達情況和CD31所標記的MVD（micro-v

4、essel density）;采用免疫細胞化學技術檢測VEGFR-1和VEGFR-2在四株細胞中的表達情況;采用熒光定量PCR方法檢測上皮性卵巢癌組織、卵巢良性腫瘤組織和正常卵巢組織中miR-205、Ezrin和Lamin A/C的相對表達量。
　　結(jié)果:
　　(1) ELISA檢測VEGF在上皮性卵巢癌患者血清中的表達水平（101.48±19.44）高于在健康志愿者血清中的表達水平(30.69±3.13)，且差異具有統(tǒng)計學

5、意義(P＜0.05);(2)免疫組化結(jié)果顯示:VEGFR-1、VEGFR-2在上皮性卵巢癌組織中的陽性表達率分別為75.9％和91.4％，高于卵巢良性腫瘤組織和正常卵巢組織中的陽性表達率(P＜0.05)，且差異具有統(tǒng)計學意義;VEGFR-1和VEGFR-2在卵巢良性腫瘤組織和正常卵巢組織中的表達差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05);(3)免疫細胞化學顯示:VEGFR-1和VEGFR-2在四株卵巢癌細胞株中呈強陽性表達;(4) MVD在上皮性

6、卵巢癌組織中的平均計數(shù)（7.56±0.508）高于在正常卵巢組織中的平均計數(shù)(1.22±0.556)，差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05);在上皮性卵巢癌組織中的平均計數(shù)（7.56±0.508）高于在卵巢良性腫瘤組織的MVD平均計數(shù)(0.7±0.389)，差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。MVD在卵巢良性腫瘤組織和正常卵巢組織中的表達差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）;(5) Ezrin蛋白和LaminA/C蛋白在上皮性卵巢癌組織中的陽性

7、表達率分別為51.7％和60.3％，低于卵巢良性腫瘤組織和正常卵巢組織中的陽性表達率，差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，但兩者分別在卵巢良性腫瘤組織和正常卵巢組織中的表達差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）.(6)熒光定量PCR結(jié)果顯示:miR-205在上皮性卵巢癌中的相對表達量高于在正常卵巢組織中的相對表達量，差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05); miR-205在上皮性卵巢癌組織中的相對表達量高于在卵巢良性腫瘤組織中的相對表達量，但差異

8、無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。Ezrin和LaminA/C mRNA在上皮性卵巢癌組織中的相對表達量低于在正常卵巢組織中的相對表達量，差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05);Ezrin和LaminA/C mRNA在上皮性卵巢癌組織中的相對表達量低于在卵巢良性組織中的相對表達量，但差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。
　　結(jié)論:
　　(1) VEGF在上皮性卵巢癌患者血清中高水平表達且差異有意義。(2) miR-205在上皮性卵巢癌