重癥肌無(wú)力胸腺瘤天然調(diào)節(jié)T細(xì)胞變化及其影響因素研究.pdf

1、重癥肌無(wú)力(myasthenia gravis,MG)是一種神經(jīng)肌肉接頭傳遞障礙為特征的自身免疫性疾病,由T細(xì)胞輔助、由針對(duì)神經(jīng)肌肉接頭處乙酰膽堿受體的抗體介導(dǎo),免疫平衡的破壞在其發(fā)病機(jī)制中起重要作用。天然調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(natural occurring regulartory T cell,nTreg)細(xì)胞是一群能抑制免疫功能的負(fù)調(diào)控細(xì)胞,可以抑制其它免疫細(xì)胞的功能。Treg細(xì)胞高表達(dá)CD25(白細(xì)胞介素2受體的α鏈)、細(xì)胞毒性T細(xì)胞

2、相關(guān)抗原4(CTLA4)和轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β(transforming growth factor β,TGF-β)。最近的研究證實(shí)雙叉頭轉(zhuǎn)錄因子(forkhead/winged helix transcription factor,FoxP3)是Treg細(xì)胞重要的標(biāo)記分子,對(duì)于Treg細(xì)胞的發(fā)育和功能有重要作用。嚙齒類動(dòng)物模型證實(shí)CD4+CD25+Treg可以抑制MG等自身免疫性疾病的發(fā)生。然而Treg細(xì)胞在人類MG發(fā)病中的作用機(jī)制仍不明

3、確。胸腺間質(zhì)淋巴細(xì)胞生成素(thymic stromal lymphopoietin,TSLP)是一種IL-7樣細(xì)胞因子,可以通過(guò)激活樹(shù)突狀細(xì)胞(dendritic cells,DC),誘導(dǎo)nTreg細(xì)胞的發(fā)育和增殖。目前認(rèn)為胸腺異常是MG發(fā)病起始器官,MG多伴有胸腺增生或胸腺瘤。為了進(jìn)-步研究Treg細(xì)胞在MG發(fā)病機(jī)制中的作用及影響Treg細(xì)胞生成的因素,我們著眼于胸腺瘤中nTreg細(xì)胞數(shù)量和功能的變化,通過(guò)免疫組化檢測(cè)不同病理類型胸

4、腺瘤中nTreg細(xì)胞的數(shù)量變化,通過(guò)實(shí)時(shí)定量反轉(zhuǎn)錄PCR(Realtime reverse trancription polymerase chain reaction,realtime RT-PCR)檢測(cè)FoxP3mRNA表達(dá),研究nTreg功能的變化,同時(shí)檢測(cè)TSLPmRNA表達(dá),分析其與nTreg細(xì)胞之間的關(guān)系。 第一部分：重癥肌無(wú)力胸腺瘤天然調(diào)節(jié)T細(xì)胞數(shù)量變化 目的:研究重癥肌無(wú)力(myasthenia grav

5、is,MG)合并胸腺瘤患者胸腺瘤中天然調(diào)節(jié)T細(xì)胞數(shù)目變化及其與胸腺瘤類型的關(guān)系。 方法:應(yīng)用免疫組織化學(xué)FoxP3標(biāo)記Treg細(xì)胞檢測(cè)23例MG合并胸腺瘤患者與4例正常對(duì)照胸腺中CD4+CD25+FoxP3+T細(xì)胞數(shù)目。 結(jié)果:MG患者胸腺瘤中FoxP3+Treg細(xì)胞數(shù)目較正常胸腺明顯減少,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);在各種胸腺瘤中,B1型胸腺瘤中Treg數(shù)目較多,與其它各組之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);A

6、型、B2、B3型胸腺瘤中Treg細(xì)胞數(shù)目少,3組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),2例B3型中未見(jiàn)陽(yáng)性細(xì)胞。 結(jié)論:MG合并胸腺瘤FoxP3+Treg細(xì)胞減少提示胸腺瘤患者存在Treg發(fā)育異常所致免疫耐受失衡。 第二部分：重癥肌無(wú)力患者胸腺FoxP3 mRNA、TSLP mRNA表達(dá) 目的:重癥肌無(wú)力(MG)合并胸腺瘤患者胸腺及正常胸腺中FoxP3及TSLP的mRNA水平以及二者表達(dá)之間的相關(guān)性。 方法

7、:Realtime RT-PCR方法測(cè)定MG合并胸腺瘤患者胸腺瘤中FoxP3及TSLP的mRNA轉(zhuǎn)錄水平。 結(jié)果:MG患者胸腺瘤FoxP3mRNA標(biāo)準(zhǔn)值較正常胸腺明顯降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);胸腺瘤組中,B1型胸腺瘤FoxP3 mRNA標(biāo)準(zhǔn)值最高,與B2、B3型差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);MG患者胸腺瘤TSLP mRNA標(biāo)準(zhǔn)值較正常胸腺明顯減少,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);胸腺瘤組中,B1型胸腺瘤TSL