MicroRNA-145和c-myc在急性髓系白血病患者中的表達(dá)及意義.pdf

1、研究目的：本研究應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量 PCR技術(shù)，檢測(cè) microRNA-145（miR-145)及c-myc基因在急性髓系白血病患者骨髓細(xì)胞中的表達(dá)情況，分析miR-145及c-myc基因在急性髓系白血病患者中表達(dá)水平的相關(guān)性，并探討其臨床意義。
　　研究方法：
　　1.研究對(duì)象：收集70例急性髓系白血病患者骨髓標(biāo)本，其中初治組46例，按FAB分型M16例，M211例，M311例，M47例，M56例，M65例。緩解組24例，按

2、FAB分型M11例，M29例，M36例，M43例，M52例，M63例。并收集14例非血液系統(tǒng)腫瘤性疾病患者作為對(duì)照組。
　　2.引物設(shè)計(jì)與合成：應(yīng)用軟件premier5.0設(shè)計(jì)并參照文獻(xiàn)設(shè)計(jì)miR-145、內(nèi)參基因 U6、c-myc基因及內(nèi)參基因GAPDH的引物序列。
　　3.采用淋巴細(xì)胞分離液分離骨髓單個(gè)核細(xì)胞并提取總RNA，應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR對(duì)miR-145及c-myc基因的表達(dá)進(jìn)行檢測(cè)，并計(jì)算其相對(duì)表達(dá)值。

3、　　4.應(yīng)用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理數(shù)據(jù)。因?yàn)閿?shù)據(jù)呈非正態(tài)分布或方差不齊，所有數(shù)據(jù)均采用中位數(shù)(極小值~極大值)表示，采用Mann-whitney U秩和檢驗(yàn)對(duì)數(shù)據(jù)分別進(jìn)行差異性分析，miR-145表達(dá)水平與c-myc基因、骨髓原始細(xì)胞比例、外周血白細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白含量及血小板計(jì)數(shù)相關(guān)性分析行Spearman相關(guān)性檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　研究結(jié)果：
　　1.miR-145在AML各組相對(duì)表達(dá)水平呈

4、偏態(tài)分布：初治組表達(dá)為0.560（0.004~6.037）、緩解組表達(dá)為5.712（1.323~22.846）、對(duì)照組表達(dá)為14.547（2.019~41.466）。初治組miR-145表達(dá)水平明顯低于緩解組及對(duì)照組，具有顯著性差異（P<0.001），緩解組低于對(duì)照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.012<0.05）。
　　2.初診AML患者中miR-145表達(dá)水平與初診時(shí)外周血白細(xì)胞數(shù)、血紅蛋白、血小板計(jì)數(shù)及初診時(shí)骨髓原始細(xì)胞百分

5、比均無統(tǒng)計(jì)學(xué)相關(guān)性（r=-0.129，P=0.394；r=-0.075，P=0.620；r=-0.009，P=0.95；r=-0.125，P=0.408）。
　　3.通過檢測(cè)9例的初治白血病患者與其第一次緩解后骨髓中miR-145的表達(dá)水平發(fā)現(xiàn)，緩解后比初診時(shí)miR-145的表達(dá)水平明顯上調(diào)（P<0.05)。
　　4.miR-145在亞型中表達(dá)的差異：46例AML患者中miR-145在預(yù)后較好的M3型表達(dá)為0.639（0.0

6、13~5.751），非M3型表達(dá)為0.545（0.004~41.466），差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.887）。
　　5.c-myc基因的mRNA在AML患者各組表達(dá)不同，初治組表達(dá)為7.668（0.013~36.098）、緩解組表達(dá)為0.976（0.076~13.212）、對(duì)照組表達(dá)為0.190（0.005~2.702）。初治組c-myc表達(dá)水平明顯高于緩解組及對(duì)照組，具有顯著性差異（P<0.001），緩解組高于對(duì)照組，差異具有統(tǒng)

7、計(jì)學(xué)意義（P=0.015<0.05）。
　　6.c-myc在亞型中表達(dá)的差異：46例AML患者中c-myc在預(yù)后較好的M3型表達(dá)為7.48（0.06~23.98），非M3型表達(dá)為7.75（0.01~36.10），差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.78）。
　　7.統(tǒng)計(jì)學(xué)分析miR-145和c-myc基因mRNA表達(dá)水平之間的相關(guān)性：初治AML患者中miR-145與靶基因c-myc的表達(dá)水平之間存在負(fù)相關(guān)（r=-0.564，p<0.0

8、01）。
　　8.結(jié)論：
　　1、AML患者骨髓單個(gè)核細(xì)胞中miR-145的表達(dá)水平比對(duì)照組明顯降低，提示miR-145可能在AML發(fā)病起抑制作用。
　　2、c-myc基因在AML患者骨髓單個(gè)核細(xì)胞中的表達(dá)水平比對(duì)照組明顯增高，c-myc基因與AML的發(fā)生密切相關(guān)。
　　3、AML中miR-145的表達(dá)和c-myc基因mRNA表達(dá)水平呈負(fù)相關(guān)。
　　4、miR-145及與c-myc初診時(shí)外周血白細(xì)胞數(shù)、血紅