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文檔簡介
1、腦血管疾病是嚴重威脅人類健康的常見病、多發(fā)病,具有發(fā)病率高、致死率高、致殘率高的特點。因此,研制治療腦血管疾病的藥物是我們面臨的一個艱巨任務。YQ分針是我中心研制的新藥,具有補氣逐瘀、清熱涼血的功效,主要用于治療腦梗塞等腦缺血性疾病。我們首先通過體內(nèi)及體外實驗相結合的方法對YQ粉針進行配比篩選,從而確定了方中A藥和B藥的比例為1:1。同時為了驗證其藥效,并為臨床用藥提供依據(jù),我們通過復制急性不完全性全腦缺血模型、局灶性腦缺血和局灶性腦缺
2、血再灌注模型、大鼠微循環(huán)障礙以及實驗性動脈血栓形成觀察了其對腦梗塞的治療效果,并通過觀察其對血小板功能的影響、對炎性因子的影響及抗氧化性損傷的程度對YQ粉針治療腦梗塞的作用作初步探討。
1.配比篩選實驗:通過小鼠肺栓塞實驗及家兔離體血小板聚集實驗,探討YQ粉針劑中A藥與B藥的最佳劑量配比及其配伍的合理性。實驗結果表明,5號配伍組(A1.0g生藥/ml+B1.5g生藥ml)在上述體內(nèi)、體外實驗中均優(yōu)于其它各配比組及單味藥組。
3、因此,我們認為YQ粉針的最佳配伍比例(生藥比)為A:B=1:12.對大鼠局灶性腦缺血再灌注的影響:采用線栓法制備局灶性腦缺血再灌注模型,探討YQ粉針劑對模型大鼠行為學評分、腦梗塞范圍、腦含水量、腦指數(shù)、血液流變性及凝血指標的影響。實驗結果表明:靜脈注射YQ粉針劑2.0g/kg、1.0g/kg可明顯改善造模后行為學障礙;降低MCAO大鼠腦梗塞率、腦含水量、腦指數(shù),同時YQ粉針劑還能降低模型大鼠的全血粘度及血漿粘度,延長TT、PT、APTT
4、時間。提示YQ粉針劑對局灶性腦缺血再灌注大鼠具有保護作用。
3.對大鼠局灶性腦缺血的影響:采用電凝大鼠一側中動脈制備大鼠局灶性腦缺血模型,探討YQ粉針劑對模型大鼠行為學評分、腦梗塞范圍、腦含水量、腦指數(shù)、血液流變性及血漿中纖維蛋白原的影響。實驗結果表明,YQ粉針劑可明顯改善造模后行為學障礙;降低局灶性腦缺血大鼠腦梗塞率、腦含水量、腦指數(shù),同時YQ粉針劑還能降低模型大鼠的全血粘度,降低模型大鼠血漿中纖維蛋白原的含量。提示,Y
5、Q粉針劑對局灶性腦缺血具有保護作用。
4.對腦血流量的影響:采用靜脈注射15%高分子右旋糖酐的方法復制腦微循環(huán)障礙模型,觀察YQ粉針劑對大鼠腦血流量的影響。實驗結果表明,YQ粉針劑2.0g/kg、1.0g/kg能夠顯著增加腦微循環(huán)障礙模型大鼠的腦血流量,提示YQ粉針可以通過增加腦血流量來改善腦微循環(huán)障礙。
5.對實驗性動脈血栓的影響:通過電刺激的方法制備大鼠實驗性體內(nèi)血栓模型和小鼠肺栓塞模型,觀察YQ粉針對實
6、驗性動脈血栓的影響。實驗結果表明,YQ粉針劑各劑量均能明顯延長大鼠實驗性體內(nèi)血栓形成的時間,縮短小鼠肺栓塞的恢復時間。提示YQ粉針劑具有抗動脈血栓形成的作用。
6.對血小板聚集功能的影響:通過對大鼠在體血小板聚集和家兔離體血小板聚集的測定,觀察YQ粉針劑對血小板聚集功能的影響。實驗結果表明YQ粉針劑靜脈注射可以明顯抑制局灶性腦缺血再灌注大鼠及局灶性腦缺血大鼠血小板的聚集,并且YQ粉針劑還可以明顯抑制ADP、從、PAF誘導的
7、家兔離體血小板聚集,其半數(shù)抑制濃度分別為162.12mg生藥/ml、82.38mg生藥/ml、300.45生藥mg/ml。提示YQ粉針劑具有抑制血小板聚集的作用。
7.對腦缺血再灌注大鼠腦組織ICAM-1、TNF-α表達及血漿IL-6含量的影響:采用免疫組化的方法觀察ICAM-1、TNF-a在局灶性腦缺血再灌注大鼠腦組織內(nèi)的表達,采用ELISA法檢測局灶性腦缺血大鼠血漿中IL-6的含量。YQ粉針劑能夠明顯減少模型大鼠腦組織
8、中ICAM-1陽性血管數(shù),降低模型大鼠腦組織TNF-a的陽性細胞數(shù),還能降低永久性大腦中動脈阻斷模型大鼠血漿中IL-6的含量。提示YQ粉針劑可以抑制大鼠腦缺血再灌注損傷時炎癥細胞因子的表達,減少白細胞的浸潤,降低腦缺血再灌注損傷的程度。
8.對血栓素(TXB2)、前列環(huán)素(6-K-PGF1α)、內(nèi)皮素(ET)的影響:采用放射免疫的方法檢測局灶性腦缺血再灌注大鼠血漿中TXB2、6-K-PGF1α、ET的含量。實驗結果表明YQ
9、粉針劑能夠明顯降低TXB2的含量,升高6-K-PGF1a的水平,對ET含量影響不大。提示YQ粉針劑可以通過調(diào)節(jié)TXB2/6-K-PGF1a比例失調(diào)從而減輕大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷。
9.對局灶性腦缺血再灌注大鼠血漿中SOD、MDA、NO、NOS等指標的影響:YQ粉針劑能夠明顯降低模型大鼠血漿中MDA、NO、NOS的水平,提高SOD的活性。提示YQ粉針劑能夠通過抗氧化自由基的作用減輕大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷。
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