黃芩苷對缺血性腦損傷的保護作用及作用機理研究.pdf

1、缺血性腦血管疾病(ICVD)嚴重危害人類健康，具有高發(fā)病率、高復發(fā)率和高致殘率的特點。因其發(fā)病機制復雜，涉及興奮性氨基酸損傷、氧自由基學說、炎癥反應以及細胞凋亡等多個方面，一直是各國研究的難點。現(xiàn)在臨床應用的藥物因存在顱內出血、腦水腫等問題，療效并不理想。因此，深入研究該病的發(fā)病機理、發(fā)現(xiàn)新的作用靶點以及尋找安全有效的治療藥物將會對缺血性腦血管疾病的防治產生重大意義。 近期研究表明，AngⅡ參與缺血性腦損傷的發(fā)生發(fā)展，但其具體作

2、用還未明確。炎癥在介導缺血再灌后繼發(fā)性損傷方面起著關鍵作用。黃芩苷是中藥黃芩根部的主要活性成分，臨床已用于抗菌、消炎和抗感染治療。研究發(fā)現(xiàn)，黃芩苷對腦缺血再灌注損傷有保護作用。 本實驗采用線栓法建立大鼠腦缺血再灌注損傷模型，單次尾靜脈注射給予黃芩苷。通過行為學、病理生理學以及分子生物學的方法論證黃芩苷對缺血性腦損傷的保護作用，探討其作用機制，為缺血再灌注損傷的防治提供新思路。 1. 黃芩苷對大鼠腦缺血再灌注損傷后腦梗死體

3、積的影響ITC染色測定腦梗死體積。結果顯示，與假手術組比較，模型組大鼠可見大面積腦梗死(p<0.01)。與模型組比較，尼莫地平0.4 mg·kg-1，黃芩苷50、100、200mg·kg-1均可顯著降低腦梗死體積。p值分別為P<0.01，p<0.05，p<0.01，p<0.01。與尼莫地平組比較，黃芩苷200 mg·kg-1顯著降低腦梗死體積(p<0.01)。 2. 黃芩苷對大鼠腦缺血再灌注損傷后神經功能學評分的影響結果顯示，與

4、假手術組比較，模型組大鼠出現(xiàn)明顯的神經功能缺損體征(P<0.01)。與模型組比較，尼莫地平0.4 mg·kg-1，黃芩苷50、100 mg·kg-1神經功能缺損體征改善不明顯。黃芩苷200 mg·kg-1可明顯改善神經功能缺損體征(p<0.05)。 3. 黃芩苷對腦缺血再灌注損傷大鼠病理形態(tài)學的影響HE染色結果可見，假手術組神經元細胞未見病理學損傷。模型組細胞出現(xiàn)明顯病理學損傷。尼莫地平0.4 mg·kg-1，黃芩苷50、100

5、、200 mg·kg-1均可減輕腦組織病理學損傷。 4. 黃芩苷對腦缺血再灌注損傷大鼠腦組織內AngⅡ含量的影響將大鼠腦組織勻漿，取上清液，按照放免試劑盒說明書操作。結果顯示，與假手術組比較，模型～AngII含量降低(p<0.05)。尼莫地平0.4 mg·kg-1，黃芩苷100、200 mg·kg-1可使腦中AngII含量升高(p<0.05)。 5. 黃芩苷對腦缺血再灌注損傷大鼠NF-κB p65核轉位的影響免疫組化結果

6、顯示，假手術組可見皮層神經元NF-κB p65胞漿表達，胞核表達陰性。與假手術組比較，模型組可見皮層神經元NF-κB p65胞核表達陽性(p<0.01)。與模型組比較，尼莫地平0.4 mg·kg-1，黃芩苷50、100、200 mg·kg-1可使胞核內NF-κB p65表達強度明顯減弱(p<0.01)，與尼莫地平組相比，黃芩苷200mg·kg-1可明顯減弱NF-κB p65在胞核內的表達(p<0.05)。 6. 黃芩苷對腦缺血再

7、灌注損傷大鼠NF-κBp65蛋白表達量的影響Western blotting結果顯示，假手術組NF-κBp65蛋白有一定的基礎表達。與假手術組比較，模型組表達量明顯升高(P<0.01)。與模型組比較，尼莫地平0.4mg·kg-1，黃芩苷50、100、200 mg·kg-1可顯著降低NF-κBp65蛋白的表達(p<0.01)。與尼莫地平組比較，黃芩苷200 mg·kg-1顯著降低蛋白表達量(p<0.05)。 7. 黃芩苷對腦缺血再

8、灌注損傷大鼠NF-κBp65 mRNA表達量的影響以β-actin為內參，RT-PCR半定量檢測缺血側皮層NF-κBp65 mRNA表達。結果顯示，模型組NF-κBp65 mRNA較假手術組明顯升高，尼莫地平0.4 mg·kg-1，黃芩苷50、100、200 mg·kg-1可顯著降低NF-κBp65 mRNA表達量(p<0.01)。與尼莫地平組比較，與尼莫地平組比較，黃芩苷200 mg·kg-1可顯著降低NF-κBp65mRNA表達量(