抗腦血栓片對缺血性腦損傷的保護(hù)作用及機(jī)制研究.pdf

1、研究背景與目的缺血性腦血管病，亦稱腦卒中，是嚴(yán)重危害人類健康的疾病之一。其發(fā)病機(jī)理主要是，由于各種原因所致的血管狹窄和血液流變學(xué)異常導(dǎo)致血液淤積或血栓形成，最終發(fā)展為腦梗塞。以中醫(yī)中藥治療腦卒中、腦中風(fēng)類疾病已有悠久歷史，抗腦血栓片(KangNaoxueshuanTablet，KNT)，針對缺血性腦血管病，是由紅花、當(dāng)歸、水蛭、赤芍、桃仁、川芎、丹參、土鱉蟲、羚羊焦、牛黃等傳統(tǒng)中藥組成，經(jīng)由現(xiàn)代科技方法提取制成的片劑。其復(fù)方組成成分經(jīng)證

2、實(shí)，具有抗血小板、抗凝血和抑制血栓形成的作用。該方劑的主要功能主治：活血化瘀，醒腦通絡(luò)，潛陽熄風(fēng)，用于因瘀血、肝陽上亢所致的中風(fēng)先兆，以及腦血栓形成。本研究采用大鼠大腦中動脈栓塞(MCAO)局灶性腦缺血模型，觀察抗腦血栓片對缺血性腦血管病的保護(hù)作用，并初步探討其發(fā)揮抗腦缺血作用的機(jī)理，為該復(fù)方制劑的進(jìn)一步開發(fā)應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法 1.本研究以線栓法制備大鼠大腦中動脈栓塞(middlecerebralarteryocc

3、lusion,MCAO)局灶性腦缺血模型，分別在缺血后3h，6h和24h評價(jià)大鼠的神經(jīng)功能狀態(tài)，并于缺血24h時(shí)，處死大鼠取腦測腦梗死體積。觀察不同劑量抗腦血栓片混懸液對缺血后大鼠神經(jīng)運(yùn)動功能癥狀的改善以及減少腦梗死體積的作用。 2.采用線栓法，通過大鼠頸動-靜脈旁路，制備大鼠體外血栓，對血栓的干重和濕重進(jìn)行稱量。觀察服用不同劑量的抗腦血栓片混懸液對血栓干、濕重的影響。 3.經(jīng)大鼠頸動脈取血抗凝，觀察不同劑量抗腦血栓片混

4、懸液對大鼠血小板計(jì)數(shù)和血小板聚集功能以及對大鼠紅細(xì)胞壓積、血漿粘度和全血粘度的影響。 在MCAO模型和體外血栓模型實(shí)驗(yàn)中，均設(shè)模型組(或空白對照組)、陽性藥組、原料藥組和藥物治療組。模型組(或空白對照組)動物給予等容積生理鹽水；陽性藥組給予消栓通(中國藥典己收錄)；原料藥組給予抗腦血栓片干浸膏粉；治療組分為低、中、高劑量三個劑量并配制成相應(yīng)濃度；各組動物均按等體積不等濃度灌胃給與。 結(jié)果 1.模型組大鼠缺血后出現(xiàn)

5、明顯的神經(jīng)運(yùn)動功能障礙，神經(jīng)癥狀隨缺血時(shí)間延長而加重，評分分別為：3h，2.80±1.3；6h，3.00±1.33；24h，3.56±1.5。與模型組相比，抗腦血栓片各劑量對神經(jīng)癥狀均有明顯的改善作用，且作用隨劑量的增加而增強(qiáng)：低劑量組評分，3h，1.44+0.53；6h，1.56±0.53；24h，1.67±0.87(P＜0.01)；中劑量組評分，3h，1.10±0.57；6h，1.30±0.48；24h，1.40±0.69(P＜0.

6、01)；高劑量組評分，3h，0.90±0.44；6h，1.00±0.71；24h，1.30±0.53(P＜0.01)。缺血24h后，與模型組腦梗死體積(27.51±4.71)％相比，抗腦血栓片各劑量組均可減少腦梗死體積百分比：低劑量組，(15.37±7.21)％(P＜0.01)；中劑量組，(14.60±7.00)％(P＜0.01)；高劑量組，(11.18±3.35)％(P＜0.01)。 2.結(jié)果顯示，抗腦血栓片各劑量組均可明顯減

7、輕體外血栓的干、濕重。與模型組血栓干重4.93±2.17mg相比，治療組血栓干重量分別為3.35±1.44，3.13±1.38mg(P＜0.05)，2.88±1.02mg(P＜0.05)。模型組血栓濕重為24.23±8.21mg，治療組血栓的濕重分別為，15.56±5.13mg(P＜0.05)，12.26±3.55mg(P＜0.01)，11.08±3.10mg(P＜0.01)。 3.與對照組比較，抗腦血栓片高劑量給藥后，對ADP

8、誘導(dǎo)的血小板聚集有抑制作用，對1、3、5分鐘各時(shí)間點(diǎn)聚集率和最大聚集率的抑制率分別為(40.24±12.9)％，(43.08±5.44)％，(56.43±7.93)％和(42.13±8.45)％(P＜0.01)。而中劑量組只在1min的時(shí)間點(diǎn)與對照組比較有顯著差異(P＜0.05)；低劑量組各時(shí)間點(diǎn)與對照組比較，均無顯著差異。對血小板計(jì)數(shù)，僅高劑量組會降低血小板計(jì)數(shù)(P＜0.05)，中和低劑量組對血小板計(jì)數(shù)均無明顯影響。 4.對大

9、鼠紅細(xì)胞壓積和血漿粘度，各治療組均未表現(xiàn)出明顯作用。而在37.5/s，90/s和300/s切變率下的全血粘度，與對照組比較，中劑量組可使其分別降低(36.03±5.45)％，(41.41+7.71)％和(32.97±6.17)％(P＜0.01)，高劑量組則可使其分別降低(30.31±11.44)％，(35.51+8.37)％和(19.84±3.80)％(P＜0.05)。 結(jié)論以上藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，抗腦血栓片可改善大鼠局灶性腦缺