糖尿病對(duì)椎間盤和終板退變的影響臨床觀察和實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、研究背景:
　　 椎間盤退變可能是多因素協(xié)同作用的結(jié)果,其中營養(yǎng)因素是不可忽視的原因之一。作為全身最大的無血管組織,任何對(duì)椎間盤周圍毛細(xì)血管網(wǎng)產(chǎn)生的干擾都是對(duì)椎間盤營養(yǎng)供給的潛在危險(xiǎn)因素和椎間盤退變的可能易感因素。糖尿病不但引起體內(nèi)代謝紊亂,而且極易誘發(fā)周圍微血管病變。因此有學(xué)者認(rèn)為糖尿病可能也是椎間盤退變的影響因素之一。糖尿病同時(shí)伴發(fā)下腰痛患者往往在日常生活和治療過程中承受更大的痛苦和受到更多的限制。盡管有少量文獻(xiàn)報(bào)道,但是關(guān)

2、于糖尿病與椎間盤和終板退變的相關(guān)性及其具體機(jī)制并未深入研究。此外,糖尿病時(shí)椎間盤細(xì)胞外基質(zhì)中的主要成分以及影響代謝的相關(guān)因子的變化情況仍不清楚。
　　 研究目的:
　　 1.通過臨床影像學(xué)觀察,研究糖尿病對(duì)椎間盤退變的影響,分析椎間盤和終板Modic退變?cè)谙卵窗榛虿话樘悄虿』颊咧蟹植嫉漠愅?br>　　 2.通過觀察經(jīng)典的糖尿病大鼠模型,利用影像學(xué)和組織學(xué)方法研究糖尿病狀態(tài)時(shí)椎間盤退變的情況,探討糖尿病大鼠模型是否能

3、作為一種新的研究椎間盤退變疾患的動(dòng)物模型；
　　 3.通過研究糖尿病大鼠椎間盤細(xì)胞外基質(zhì)的變化,深入探討糖尿病對(duì)水分、膠原和蛋白多糖,以及與之相關(guān)的代謝相關(guān)因子的影響,同時(shí)進(jìn)一步研究這些代謝因子的變化在糖尿病椎間盤退變中的意義。
　　 研究方法:
　　 1.回顧性分析2007年～2010年以下腰痛為主述來我科行手術(shù)治療的患者127例,以及同期至我院行其它擇期手術(shù)患者145例,比較糖尿病在兩組患者間的構(gòu)成比；通過影

4、像學(xué)MRI分析和比較椎間盤退變和終板Modic退變?cè)谔悄虿『头翘悄虿』颊咧械谋壤头植记闆r；對(duì)下腰痛患者進(jìn)行跟蹤隨訪,對(duì)患者術(shù)前術(shù)后VAS評(píng)分和ODI評(píng)分進(jìn)行評(píng)價(jià)；
　　 2.取20只SD大鼠,利用STZ誘導(dǎo)輔以高糖高脂飲食制作糖尿病大鼠模型,另取20只SD大鼠做對(duì)照；對(duì)模型進(jìn)行不同時(shí)間點(diǎn)(造模前、4周、8周和12周)的影像學(xué)研究,分析X線上椎間盤高度指數(shù)和T2加權(quán)像MRI椎間盤信號(hào)強(qiáng)度的變化；同期取部分樣本做HE常規(guī)染色和Sa

5、franin O染色,在排除其它可能致椎間盤退變偏倚因素的基礎(chǔ)上,分析糖尿病在動(dòng)物模型上對(duì)椎間盤退變的影響；
　　 3.對(duì)糖尿病狀態(tài)時(shí)椎間盤細(xì)胞外基質(zhì)主要成分的分布與含量進(jìn)行生化學(xué)研究,包括測(cè)定髓核水分含量,DMMB法測(cè)定GAG含量,和免疫印跡測(cè)定Ⅰ型、Ⅱ型膠原以及aggrecan蛋白的含量變化；利用實(shí)時(shí)定量PCR對(duì)椎間盤代謝相關(guān)因子MMP-3、BMP-2、TIMP-1的mRNA水平進(jìn)行定量分析。
　　 研究結(jié)果:

6、>　　 1.在下腰痛患者中糖尿病的構(gòu)成比明顯高于其它擇期手術(shù)患者,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(X2=16.17,P<0.01)；糖尿病患者并發(fā)其它嚴(yán)重合并癥,特別是高血壓(P<0.01)和骨質(zhì)疏松(P<0.05)的比例也明顯高于非糖尿病患者；椎間盤退變Ⅲ級(jí)在非糖尿病患者中比例明顯較糖尿病患者多(P<0.05),但是椎間盤退變V級(jí)在糖尿病患者中明顯增多(P<0.05)；Modic退變2型在糖尿病患者中分布明顯多于非糖尿病患者(P<0.05)；醫(yī)師

7、測(cè)評(píng)糖尿病與非糖尿病患者手術(shù)優(yōu)良率并無差異；兩者在術(shù)前術(shù)后VAS評(píng)分和ODI改善率上并無明顯差別(P>0.05)；
　　 2.STZ誘導(dǎo)輔以高糖高脂飲食可以成功復(fù)制糖尿病大鼠模型,在觀察期內(nèi)實(shí)驗(yàn)組大鼠平均血糖值仍保持在16.7mmol／L,以上,具有良好的模型穩(wěn)定性；影像學(xué)X線觀察發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)組大鼠造模后4周椎間隙開始出現(xiàn)狹窄,椎體逐漸失穩(wěn),第12周時(shí)椎間隙狹窄明顯,并出現(xiàn)骨贅；與同期對(duì)照組相比,第8周和第12周實(shí)驗(yàn)組椎間隙明顯狹窄

8、,結(jié)果有顯著性差異(P<0.01)。T2加權(quán)像MRI上隨時(shí)間的延長實(shí)驗(yàn)組大鼠椎間盤信號(hào)降低的趨勢(shì)越明顯,與同期對(duì)照組相比,椎間盤信號(hào)指數(shù)有顯著性差異(P<0.05)；同期HE染色和Safranin O染色也證明椎間盤有明顯的退變,這些改變與影像學(xué)有較好的相關(guān)性；
　　 3.糖尿病椎間盤的細(xì)胞外基質(zhì)中,水分含量在實(shí)驗(yàn)組椎間盤中逐漸減少,第8周和第12周時(shí)分別為(68.2±6.2)％和(60.1±9.7)％,顯著少于同期對(duì)照組(P<

9、0.05,P<0.01)；實(shí)驗(yàn)組GAG含量總體呈下降趨勢(shì),在第8周時(shí)顯著少于對(duì)照組(P<0.05)；免疫印跡發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)組大鼠椎間盤中aggrecan蛋白的表達(dá)量隨著時(shí)間的推移而逐漸下降,到第8周時(shí)表達(dá)最低,而第12周時(shí)其表達(dá)又略有增加；Ⅰ型膠原蛋白表達(dá)自第8周開始,在糖尿病模型大鼠椎間盤組織中有較高的表達(dá),并且一直持續(xù)到第12周；Ⅱ型膠原蛋白的表達(dá)則逐漸減少,至第12周時(shí)最低；實(shí)時(shí)定量PCR結(jié)果發(fā)現(xiàn),實(shí)驗(yàn)組MMP-3在8周時(shí)mRNA水平表

10、達(dá)明顯增高,與同期對(duì)照組相比有顯著差異(P<0.05),并且之后繼續(xù)升高,至第12周時(shí)為(8.5±1.3)倍(P<0.01)；BMP-2在第4周時(shí)表達(dá)升高至(5.4±2.1)倍,與對(duì)照組相比結(jié)果有顯著差異(P<0.05),但此后又呈下降趨勢(shì),至第12周時(shí)已降至造模前的水平；TIMP-1僅在第12周時(shí)有顯著高表達(dá)(P<0.05)。
　　 研究結(jié)論:
　　 1.糖尿病是椎間盤退變的影響因素之一；糖尿病患者合并其它并發(fā)癥的比例

11、明顯增高；椎間盤退變的終末期與Modic退變2型比例在糖尿病患者中較多；但是糖尿病與非糖尿病患者手術(shù)療效并無差別；
　　 2.以STZ輔以高糖高脂誘導(dǎo)的糖尿病大鼠模型具有良好的穩(wěn)定性,可以作為研究糖尿病與椎間盤退變關(guān)系的動(dòng)物模型；糖尿病狀態(tài)時(shí)大鼠椎間盤退變的進(jìn)展加速;
　　 3.糖尿病狀態(tài)時(shí)椎間盤細(xì)胞外基質(zhì)中主要成分水分和aggrecan蛋白含量減少,Ⅰ型／Ⅱ膠原比例增加,椎間盤內(nèi)代謝紊亂,代謝相關(guān)因子的異常變化很可能是