口腔鱗癌分子診斷及分子分型生物標(biāo)志物的初步研究.pdf

1、目的:口腔鱗癌的個(gè)體化診斷和治療需要分子診斷及分子分型方法的支持。本研究的主要目的是建立口腔鱗癌分子診斷及分子分型技術(shù)和方法,并對(duì)潛在的生物標(biāo)志物進(jìn)行篩選、分析和驗(yàn)證,以確定口腔鱗癌分子診斷、分化程度、侵襲、轉(zhuǎn)移和個(gè)體化化療等相關(guān)的分子靶點(diǎn)。
　　方法:1.在前期基因表達(dá)譜研究初步篩選的78個(gè)口腔鱗癌相關(guān)基因基礎(chǔ)上,采用Real-time PCR的方法在mRNA水平檢測(cè)了120例臨床腫瘤組織標(biāo)本和120例正常組織標(biāo)本中78個(gè)候選基

2、因和1個(gè)管家基因的表達(dá),并采用統(tǒng)計(jì)學(xué)方法分析和確定口腔鱗癌差異基因及與其發(fā)生、侵襲及轉(zhuǎn)移等相關(guān)基因表達(dá)譜型。
　　2.應(yīng)用免疫組化方法在口腔鱗癌組織芯片中檢測(cè)cyclin D1蛋白表達(dá),采用統(tǒng)計(jì)學(xué)方法分析cyclin D1蛋白表達(dá)與各項(xiàng)臨床病理學(xué)參數(shù)和預(yù)后的關(guān)系。
　　3.應(yīng)用免疫組化技術(shù)檢測(cè)100例接受誘導(dǎo)化療(誘導(dǎo)組)和124未接受誘導(dǎo)化療(非誘導(dǎo)組)的晚期口腔鱗癌患者活檢組織標(biāo)本中cyclin D1蛋白表達(dá)情況,分析該

3、蛋白表達(dá)與各項(xiàng)臨床病理學(xué)參數(shù)、化療療效及各亞組中的生存情況的關(guān)系,從而驗(yàn)證該蛋白作為指導(dǎo)臨床個(gè)體化化療生物標(biāo)志物的可行性。
　　結(jié)果:1.“SPP1+KRT15+MAI”3個(gè)基因是口腔鱗癌差異基因的表達(dá)譜型(AUC:0.986,95％CI:0.961-0.997;敏感度96.4％,特異度94.7％)。
　　2.“CDK2+ITPR1+PLAU”3個(gè)基因是預(yù)測(cè)病理分級(jí)高低(Ⅰ,Ⅱ級(jí)與Ⅲ級(jí))的最佳基因表達(dá)譜型(AuC:0.811

4、,95％CI:0.726 to0.879;敏感度為86.7％,特異度為63.5％);而“MMP7+MMP1+p21+IL1RN+CDKN2A”5個(gè)基因是預(yù)測(cè)浸潤(rùn)性生長(zhǎng)的最佳基因表達(dá)譜型(AUC:0.749,95％CI:0.661 to0.823;敏感度為60.3％,特異度為87.7％)。
　　3.“PDGFRA+PLAU+SOX9+SPP1+CDKN2A+CASP1+MAL”7個(gè)基因是預(yù)測(cè)頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的最佳基因組合(AUC:0.7

5、69,95％CI:0.675 to0.846;敏感度為71％,特異度為75％);而"GPD1L+NMU”2個(gè)基因是預(yù)測(cè)原發(fā)灶分級(jí)的最佳基因表達(dá)譜型(AUC:0.743,95％CI:0.651 to0.822;敏感度為67％,特異度為79％)。
　　4.組織芯片中cyclin D1蛋白表達(dá)與口腔鱗癌各項(xiàng)臨床病理學(xué)參數(shù)比較,差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;Kaplan-Meier生存分析發(fā)現(xiàn),cyclin D1低表達(dá)組患者與高表達(dá)患者相比明顯能獲

6、得更好的總生存(6.71±2.95&5.38±3.45,83.1％&43.2％;P=0.009)。多因素生存分析表明,cyclin D1表達(dá)(HR:2.260,95％CI:1.074-4.758;P=0.032)是判斷口腔鱗癌患者預(yù)后的獨(dú)立預(yù)測(cè)因子。
　　5.單純根據(jù)經(jīng)驗(yàn)化療時(shí),誘導(dǎo)組和非誘導(dǎo)組晚期口腔鱗癌患者無(wú)病生存和總生存均無(wú)明顯差異(P=0.929和P=0.760)。但誘導(dǎo)組中cyclin D1低表達(dá)患者更有可能化療有效(p

7、0.001),而且與高表達(dá)患者相比能夠獲得更好的總生存和無(wú)病生存(73％vs8％,P＜0.001;63％vs6％,P＜0.001)。更重要的是,誘導(dǎo)組中cyclin D1低表達(dá)患者與非誘導(dǎo)組中cyclin D1低表達(dá)患者比較明顯獲得更好的總生存(P=0.016):而誘導(dǎo)組中cyclinD1高表達(dá)患者與非誘導(dǎo)組中cyclin D1高表達(dá)患者相比明顯獲得更差的總生存(P=0.032)。多因素生存分析表明,cyclin D1表達(dá)是晚期口腔鱗癌

8、接受誘導(dǎo)化療患者預(yù)后判斷的獨(dú)立預(yù)測(cè)因子(P＜0.001)。
　　結(jié)論:1.“SPP1+KRT15+MAL”三個(gè)基因可能與口腔鱗癌發(fā)生密切相關(guān),有望應(yīng)用于口腔鱗癌分子診斷等領(lǐng)域。
　　2.“CDK2+ITPR1+PLAU”和“MMP7+MMP1+p21+IL1RN+CDKN2A”兩組基因表達(dá)譜型與口腔鱗癌組織分化程度和侵襲性生長(zhǎng)密切相關(guān),有望作為口腔鱗癌分子病理診斷潛在的生物標(biāo)志物。
　　3.“PDGFRA+PLAU+S