鼻咽癌相關(guān)分子標(biāo)志物篩選、鑒定及意義.pdf

1、中山大學(xué)博士學(xué)位論文鼻咽癌相關(guān)分子標(biāo)志物篩選、鑒定及意義姓名：曹京燕申請學(xué)位級別：博士專業(yè)：腫瘤學(xué)指導(dǎo)教師：曾木圣20100608中山大學(xué)博士學(xué)位論文 鼻咽癌相關(guān)分子標(biāo)志物篩選、鑒定及意義與否以及不同臨床分期的鼻咽癌病人的判別能力。利用定量P C R 與W e s t e r nB l o t 方法檢測鼻咽癌細胞系C E N P ．F 表達情況，用免疫組化分析C E N P —F 在2 0 2 例鼻咽癌石蠟標(biāo)本中的表達情況，并分析與鼻咽

2、癌預(yù)后的關(guān)系。用M T T 評價唑來膦酸或法呢基轉(zhuǎn)移酶抑制劑( F T I ．2 7 7 ) 與順鉑聯(lián)合作用的效果。裸鼠移植瘤實驗證實唑來膦酸增加順鉑的抗腫瘤作用。利用定量P C R ，W e s t e r nB l o t 與免疫組化方法檢測鼻咽癌組織中L M P 2 A 、E ．c a d h e r i n 、F i b r o n e t i n 、A B C G 2 和B m i ．1 的表達水平，S p e a r m a

3、 n 相關(guān)性檢驗分析L M P 2 A 與E ．c a d h e r i n 、F i b r o n e t i n 、A B C G 2 和B m i ．1 表達水平的相關(guān)性。結(jié)果：與健康對照相比，鼻咽癌病人外周血m R N A 共有8 1 8 4 個探針存在顯著性差異( P < O ．0 5 ，t - t e s t ) ，其中差異倍數(shù)大于1 ．5 的有1 2 5 7 個。差異基因多與細胞周期，病毒的免疫反應(yīng)以及調(diào)節(jié)淋巴細

4、胞介導(dǎo)的免疫相關(guān)。利用S V M 進行特征選擇，篩選出7 個基因的m R N A 分子標(biāo)志物組合。在1 2 8 例樣本組成的訓(xùn)練集中，證實7 個基因標(biāo)志物的分類模型敏感性可達到7 8 ％，特異性可達到8 1 ．3 ％，R O C曲線下面積可達8 6 ．3 ％。在3 2 例獨立驗證組中，其敏感性為8 7 ．5 ％，特異性為6 2 ．5 ％，R O C 曲線下面積可達8 4 ．O ％。7 基因標(biāo)志物模型對E B V 陰性和陽性的鼻咽癌病人、

5、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與否及不同分期的病人的預(yù)測能力沒有明顯差別。與正常、永生化鼻咽上皮細胞及非鼻咽癌組織相比，C E N P ．F 在鼻咽癌細胞系及組織中表達水平升高。免疫組化分析結(jié)果顯示，在2 0 2 例鼻咽癌組織中9 8例( 4 8 ．5 ％) 表達水平增高。統(tǒng)計分析證實C E N P ．F 的表達水平與T 分期( P 《0 ．0 0 1 ) ，臨床分期儼< 0 ．0 0 1 ) ，顱底侵襲( 氏0 ．0 0 1 ) 及遠處轉(zhuǎn)移儼0 ．

6、0 1 2 ) 呈正相關(guān)，與病人總生存率呈負相關(guān)儼< o ．0 0 1 ) 。多因素分析提示C E N P ．F 的表達水平可以作為獨立的預(yù)后分析因素。在高表達C E N P ．F 的鼻咽癌細胞( H O N E l 和6 ．1 0 B ) 中，聯(lián)合順鉑與唑來膦酸或法呢基轉(zhuǎn)移酶抑制劑，可以提高細胞對順鉑的化療敏感性。高C E N P ．F 表達的H O N E l 裸鼠移植瘤模型中證實，唑來膦酸可以增加順鉑的抗腫瘤作用。在鼻咽癌組