膀胱癌分子標志物的探索及尿液SNCG檢測的臨床意義研究.pdf

1、目的:
　　膀胱癌是威脅人類健康最常見的泌尿系統(tǒng)惡性腫瘤之一，其發(fā)病率及死亡率不斷上升。由于膀胱癌發(fā)病率的不斷增加以及膀胱癌的高復(fù)發(fā)率和多中心性，使其成為泌尿外科醫(yī)生及患者承受壓力最重的腫瘤之一。目前膀胱鏡檢查仍是膀胱癌診斷和隨訪的金標準，但膀胱鏡為侵入性的檢查，給患者造成很大痛苦，不宜被患者所接受;同時細胞學(xué)檢查的敏感性低。目前還沒有非常理想的分子標志物應(yīng)用于臨床。所以，尋找新的腫瘤標志物以提高膀胱癌診斷的準確性和及時性是一個迫

2、切需要解決的問題。
　　研究方法:
　　首先，我們回顧性研究了北京協(xié)和醫(yī)院膀胱癌患者的臨床資料，收集了北京協(xié)和醫(yī)院有完整臨床病理和5年以上隨訪資料的患者，選擇膀胱癌患者及相應(yīng)病理切片共計140例，回顧性的研究了SNCG(synuclein-γ，神經(jīng)突觸核蛋白γ)、ARD1(arrestdefective1，N-乙?；D(zhuǎn)移酶調(diào)節(jié)亞基)及PRL-3(phosphatase of regenerationliver-3，促肝再生磷

3、酸酶3)在膀胱癌組織中的表達及其與膀胱癌臨床病理學(xué)特點和預(yù)后的關(guān)系;其次，我們選擇了其中在膀胱癌組織中表達最高的SNCG作為研究對象，進一步探索研究了76例膀胱癌患者血清及尿液SNCG蛋白表達，并分析了SNCG的表達及分泌方式，最后，為研究尿液SNCG檢測的臨床價值，我們進行了大規(guī)模的，多中心的隊列研究，以驗證尿液SNCG作為膀胱癌診斷和術(shù)后監(jiān)測工具的價值，并與NMP22進行了對比研究。
　　研究結(jié)果:
　　140例膀胱癌組

4、織通過免疫組化研究發(fā)現(xiàn)SNCG蛋白的陽性表達率為90.7％(127/140); ARD1蛋白的陽性表達率為80.7％(113/140);PRL-3蛋白的陽性表達率為17.1％(24/140)。膀胱癌組織中SNCG蛋白的表達方式較為復(fù)雜，有細胞核陽性表達、也有彌漫細胞漿和細胞膜表達，總體陽性率較高，并提示膀胱癌細胞能自主分泌SNCG蛋白。前期試驗證實SNCG蛋白可以從MCF7-SNCG細胞中分泌到細胞外的培養(yǎng)上清中，證明SNCG是一種分泌

5、性蛋白，且為腫瘤細胞特異表達的蛋白，膀胱癌細胞既可以分泌SNCG入血，也可以直接分泌到腫瘤周圍的尿液中。膀胱癌患者血清中的SNCG水平明顯高于正常人，而同一患者尿液中SNCG濃度明顯高于血清中的水平。同時我們建立的雙抗夾心ELISA法檢測SNCG水平具有很好的特異性、穩(wěn)定性和可靠性。大規(guī)模多中心的隊列研究證明了膀胱癌患者尿SNCG濃度顯著高于年齡和性別相匹配的健康對照組。在測試隊列中膀胱癌組SNCG診斷試驗的ROC曲線下面積(area

6、under the ROC curve,AUC)為0.903±0.019(95％可信區(qū)間為0.867至0.940);在驗證隊列中的ROC曲線下面積為0.929±0.015(95％可信區(qū)間0.901至0.958)。Youden指數(shù)越大，說明診斷準確度越高。根據(jù)這一原則，最終確認1.874納克/毫升作為最佳診斷界值，在測試隊列得到的敏感度及特異度分別為68.4％和97.4％;在驗證隊列中得到的敏感度和特異度分別為62.4％和97.8％;。此

7、外，我們發(fā)現(xiàn)，膀胱癌患者手術(shù)后尿液SNCG下降，術(shù)后復(fù)查時SNCG水平在復(fù)發(fā)患者(17.18±44.19 ng/mL)比無復(fù)發(fā)患者(2.81±11.95 ng/mL，P=0.001)要高。在一個小的隊列研究中，膀胱癌診斷試驗結(jié)果發(fā)現(xiàn)SNCG敏感性較NMP22稍低(46.2％對56.4％，P=0.344)但特異性較NMP22高(74.5％對51.0％，P=0.008)，SNCG診斷效能優(yōu)于NMP22，且不受血尿因素影響。
　　研究結(jié)

8、論:
　　SNCG作為一種分泌性蛋白，不僅在膀胱癌組織中有極高的表達，在膀胱癌患者的尿液中也有較高的表達，尿液SNCG檢測具有鑒別膀胱癌患者與健康人及泌尿系統(tǒng)其他良性病變的能力，且尿液SNCG檢測并不受血尿的影響。不僅具有診斷早期膀胱癌的價值，對膀胱癌術(shù)后復(fù)發(fā)也有很好的監(jiān)測作用。SNCG表達與癌細胞增殖、轉(zhuǎn)移和藥物抗性有關(guān)。檢測癌組織SNCG水平可預(yù)測腫瘤患者的預(yù)后;抑制SNCG活性可增加對化療藥物的敏感性，因此SNCG有望成為膀