組胺誘導(dǎo)3T3L1細(xì)胞分化及對(duì)能量代謝調(diào)控的機(jī)制研究.pdf

1、背景：組胺是廣泛存在于體內(nèi)的一種物質(zhì)，它既是一種神經(jīng)遞質(zhì)，也是很重要的炎癥介質(zhì)。組胺參與體內(nèi)許多生理生化反應(yīng)，調(diào)控機(jī)體內(nèi)諸多功能，包括機(jī)體的能量代謝、心血管系統(tǒng)調(diào)節(jié)等。很多實(shí)驗(yàn)已經(jīng)證實(shí)組胺在體內(nèi)可以抑制食欲、增加外周脂肪細(xì)胞UCP的表達(dá)，也有研究認(rèn)為組胺可以刺激3T3L1細(xì)胞分化為脂肪細(xì)胞，但是組胺是如何調(diào)節(jié)機(jī)體脂肪細(xì)胞的能量代謝，目前尚不清楚。 目的：培養(yǎng)3T3L1細(xì)胞，在體外探索組胺對(duì)脂肪細(xì)胞能量代謝的影響及其作用機(jī)

2、制。 方法：1)細(xì)胞培養(yǎng)和細(xì)胞分化：培養(yǎng)3T3L1細(xì)胞，待細(xì)胞融合后兩天，用insulin、DEX、IBMX誘導(dǎo)細(xì)胞變?yōu)橹炯?xì)胞，用油紅染色觀察脂滴。2)運(yùn)用RT-PCR．以及western-blot技術(shù)檢測(cè)組胺和苯海拉明對(duì)白色脂肪細(xì)胞中UCP2，aP2基因mRNA水平和蛋白質(zhì)表達(dá)水平的影響。 結(jié)果：1)白色脂肪細(xì)胞在不同劑量組組胺的刺激下，UCP2的表達(dá)值在不同劑量組之間存在顯著差異(P<0.05)，U

3、CP2的表達(dá)水平隨著組胺劑量的增加而增加，在組胺劑量為30umol·L<'-1>時(shí)達(dá)到最高值，2)在相同劑量組胺下，觀察不同時(shí)間對(duì)細(xì)胞內(nèi)UCP2表達(dá)的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，不同時(shí)間組之間存在顯著性差異(P<0.05)，當(dāng)時(shí)間為6h時(shí)UCP2表達(dá)量達(dá)到最高。3)組胺可以增加分化成熟的3T3L1細(xì)胞aP2的表達(dá)，劑量效應(yīng)圖顯示組胺為20gmol·L<'-1>時(shí)aP2表達(dá)量為最高，時(shí)間效應(yīng)圖顯示在共同孵育6小時(shí)后aP2表達(dá)量達(dá)到最高。4)在20um