組胺誘導3T3L1細胞分化及對能量代謝調控的機制研究.pdf

1、背景：組胺是廣泛存在于體內(nèi)的一種物質，它既是一種神經(jīng)遞質，也是很重要的炎癥介質。組胺參與體內(nèi)許多生理生化反應，調控機體內(nèi)諸多功能，包括機體的能量代謝、心血管系統(tǒng)調節(jié)等。很多實驗已經(jīng)證實組胺在體內(nèi)可以抑制食欲、增加外周脂肪細胞UCP的表達，也有研究認為組胺可以刺激3T3L1細胞分化為脂肪細胞，但是組胺是如何調節(jié)機體脂肪細胞的能量代謝，目前尚不清楚。 目的：培養(yǎng)3T3L1細胞，在體外探索組胺對脂肪細胞能量代謝的影響及其作用機

2、制。 方法：1)細胞培養(yǎng)和細胞分化：培養(yǎng)3T3L1細胞，待細胞融合后兩天，用insulin、DEX、IBMX誘導細胞變?yōu)橹炯毎?，用油紅染色觀察脂滴。2)運用RT-PCR．以及western-blot技術檢測組胺和苯海拉明對白色脂肪細胞中UCP2，aP2基因mRNA水平和蛋白質表達水平的影響。 結果：1)白色脂肪細胞在不同劑量組組胺的刺激下，UCP2的表達值在不同劑量組之間存在顯著差異(P<0.05)，U

3、CP2的表達水平隨著組胺劑量的增加而增加，在組胺劑量為30umol·L<'-1>時達到最高值，2)在相同劑量組胺下，觀察不同時間對細胞內(nèi)UCP2表達的影響，結果發(fā)現(xiàn)，不同時間組之間存在顯著性差異(P<0.05)，當時間為6h時UCP2表達量達到最高。3)組胺可以增加分化成熟的3T3L1細胞aP2的表達，劑量效應圖顯示組胺為20gmol·L<'-1>時aP2表達量為最高，時間效應圖顯示在共同孵育6小時后aP2表達量達到最高。4)在20um