能量代謝對Balb-c 3T3成纖維細(xì)胞水通道蛋白AQP1表達的影響.pdf

1、目的：
　　 水的跨膜轉(zhuǎn)運對維持細(xì)胞的正常代謝具有重要作用。水通道蛋白（Aquaporins，AQPs）作為水選擇性通道家族，在體內(nèi)扮演著重要角色。其中AQP1是發(fā)現(xiàn)最早研究最多的水通道蛋白，參與滲透壓驅(qū)動下的水的轉(zhuǎn)運，介導(dǎo)藥理作用和參與水腫的形成等。它在腎臟、肺、腦，和眼均有表達，其調(diào)節(jié)機制是復(fù)雜的。本實驗應(yīng)用微管蛋白抑制劑諾考達唑（Nocodazole）、磷酸肌酸激酶抑制劑碘乙酰胺（Iodacetamide）和呼吸鏈抑制劑分

2、別作用于Balb/c 3T3小鼠成纖維細(xì)胞并觀察AQP1的表達量的變化，探討能量代謝對AQP1的影響。
　　 方法：
　　 采用體外培養(yǎng)的Balb/c 3T3小鼠成纖維細(xì)胞株。微管蛋白抑制劑諾考達唑（Nocodazole）、磷酸肌酸激酶抑制劑碘乙酰胺（Iodacetamide）和呼吸鏈抑制劑：一氧化氮（Nitric oxide）、抗霉素A（Antimycin A）、疊氮化鈉（Sodium azide）分別作用于該細(xì)胞，應(yīng)

3、用Western blotting分別檢測細(xì)胞在0小時、4小時、6小時及0小時、2小時、4小時、6小時、8小時AQP1的表達.
　　 結(jié)果：
　　 諾考達唑、碘乙酰胺、一氧化氮、抗霉素A與細(xì)胞作用4小時后可見細(xì)胞變圓、體積增大；6小時后細(xì)胞核增大、細(xì)胞溶解壞死。sodium azide與細(xì)胞作用后光鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)無明顯改變。免疫印跡結(jié)果顯示，Nocodazole和Iodacetamide與細(xì)胞作用4小時后，AQP1表達

4、開始增加，至6小時時AQP1表達大量增加；并且具有濃度依賴性。疊氮化鈉與細(xì)胞作用2小時后，AQP1表達增加；4小時后AQP1表達量達到高峰；6小時后AQP1表達開始逐漸下降.Nitric oxide和Antimycin A作用于細(xì)胞后 AQP1的表達量均無明顯改變。
　　 結(jié)論：
　　 微管蛋白抑制劑諾考達唑（Nocodazole）、磷酸肌酸激酶抑制劑碘乙酰胺（Iodacetamide）和呼吸鏈抑制劑均可誘導(dǎo)Balb/c