腰痹舒對兔椎間盤退變髓核組織中水通道蛋白AQP1、AQP3mRNA及蛋白質(zhì)表達的影響.pdf

1、目的：
　　腰椎間盤突出癥是人類特有的常見病之一，據(jù)國內(nèi)學(xué)者不完全統(tǒng)計骨科門診人數(shù)的大約70％左右病人是因腰腿痛而來就診的，而這其中約有30%的病人的腰腿痛是由腰椎間盤突出所導(dǎo)致的，同時相關(guān)的資料顯示腰椎間盤突出也是造成我國50歲以下人群勞動力喪失的的重要原因，而且我國每年用于治療椎間盤疾病的經(jīng)濟費人力及物力都是非常巨大，因此在目前骨科領(lǐng)域的研究當(dāng)中涉及腰椎間盤的發(fā)病的機制和相關(guān)的臨床治療方法一直都是研究中的重點和熱點。目前已明確

2、椎間盤退變是腰椎間盤突出癥、腰椎管狹窄、慢性下腰痛等疾病的主要原因之一，但椎間盤退變的病理過程及機制至今尚未完全闡明，還有許多內(nèi)容值得研究探討。據(jù)此，本研究就腰椎間盤退變與水通道蛋白之間的可能關(guān)系進行了探索。
　　腰痹舒是導(dǎo)師李曉聲教授經(jīng)過20余年研究的中藥驗方，雖然腰痹舒制劑治療的臨床效果非常顯著，但是腰痹舒治療腰椎間盤退變的相關(guān)藥理學(xué)機制仍未完全清楚，影響了該中藥制劑的大范圍廣泛應(yīng)用于臨床。因此本研究從水通道蛋白的角度上對腰痹

3、舒治療腰椎間盤退變的可能機制進行有效的探索，以期揭示中藥的治療機制。
　　方法：
　　將42只新西蘭大白兔隨機分為3組，即腰痹舒治療組、對照組、空白組。對腰痹舒組及對照組行腰椎間盤退變造模處理，空白組行假手術(shù)處理。腰痹舒組術(shù)后第8天開始灌服腰痹舒，對照組和空白組不灌服腰痹舒。分別于術(shù)后1、2、4、6周，腰痹舒組、對照組、空白組各隨機處死3只，拍攝腰椎X光平片并取椎間盤組織行解剖觀察、組織切片(HE染色)觀察，并行Real-T

4、ime- PCR及Western blot法測定，觀察三組之間髓核組織中AQP1、AQP3mRNA及蛋白質(zhì)表達的差別，并且對實驗所得的相關(guān)結(jié)果，采用SPSS13.0軟件進行統(tǒng)計學(xué)數(shù)據(jù)分析，組間比較采用單因素方差分析(F檢驗)，并用最小顯著差法(LSD法)比較各組之間的差異。
　　結(jié)果：
　　1，三組術(shù)后1周AQP1 mRNA的擴增倍數(shù)不存有顯著的統(tǒng)計學(xué)差異，但空白組的數(shù)據(jù)均比腰痹舒組和對照組升高，說明動物造模成功。對照組術(shù)后

5、1周、術(shù)后2周、術(shù)后4周以及術(shù)后6周AQP1 mRNA的擴增倍數(shù)表現(xiàn)出逐步下降的趨勢，空白組術(shù)后1周、術(shù)后2周、術(shù)后4周以及術(shù)后6周AQP1 mRNA的擴增倍數(shù)則基本維持在同一水平上，說明空白組構(gòu)建成功，具有一定的參照作用。腰痹舒組術(shù)后1周、術(shù)后2周、術(shù)后4周以及術(shù)后6周AQP1 mRNA的擴增倍數(shù)呈現(xiàn)出逐步上升并趨于平穩(wěn)的態(tài)勢。
　　2，三組術(shù)后1周AQP3 mRNA的擴增倍數(shù)存有顯著的統(tǒng)計學(xué)差異，空白組的數(shù)據(jù)均比腰痹舒組和對照

6、組要顯著升高。對照組術(shù)后1周、術(shù)后2周、術(shù)后4周以及術(shù)后6周AQP3 mRNA的擴增倍數(shù)表現(xiàn)出逐漸下低的現(xiàn)象，空白組術(shù)后1周、術(shù)后2周、術(shù)后4周以及術(shù)后6周AQP3 mRNA的擴增倍數(shù)則基本維持不變。然而腰痹舒組術(shù)后1周、術(shù)后2周、術(shù)后4周以及術(shù)后6周AQP3 mRNA的擴增倍數(shù)表現(xiàn)出逐步升高的趨勢。
　　3，三組術(shù)后1周AQP1蛋白相對表達量不具有顯著的統(tǒng)計學(xué)差異。對照組術(shù)后1周、術(shù)后2周、術(shù)后4周以及術(shù)后6周AQP1蛋白相對表

7、達量也表現(xiàn)出逐漸降低的趨勢，空白組術(shù)后1周、術(shù)后2周、術(shù)后4周以及術(shù)后6周AQP1蛋白相對表達量則基本維持不變。腰痹舒組術(shù)后1周、術(shù)后2周、術(shù)后4周以及術(shù)后6周AQP1蛋白相對表達量呈現(xiàn)出逐步上升的趨勢。
　　4，三組術(shù)后1周AQP3蛋白相對表達量不具有顯著的統(tǒng)計學(xué)差異。對照組術(shù)后1周、術(shù)后2周、術(shù)后4周以及術(shù)后6周AQP3蛋白相對表達量表現(xiàn)出逐漸降低的趨勢，空白組術(shù)后1周、術(shù)后2周、術(shù)后4周以及術(shù)后6周AQP3蛋白相對表達量則基

8、本維持在同一水平上。然而腰痹舒組術(shù)后1周、術(shù)后2周、術(shù)后4周以及術(shù)后6周AQP3蛋白相對表達量呈現(xiàn)出逐步上升的態(tài)勢。
　　結(jié)論：
　　1，腰椎間盤退變過程中伴發(fā)著水通道蛋白表達量的降低，意味著水通道蛋白在維持、鞏固腰椎間盤的正常功能與形態(tài)上發(fā)揮著相應(yīng)的生理作用，增強并維持腰椎間盤中水通道蛋白的表達能作為應(yīng)對、治療腰椎間盤退變的對策，值得在臨床工作中加以考慮。
　　2，腰痹舒作為一種治療腰椎間盤退變的藥制劑，發(fā)揮其治療效