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文檔簡介
1、目的: 研究外源性給予apelin對大鼠肺動脈高壓和右心室肥大的防治作用,并探討其作用是否與一氧化氮系統(tǒng)有關(guān)。 方法: ①將清潔級雄性SD大鼠24只,體重180-220g,隨機(jī)分為對照組(control)、低氧組(hypoxia)和apelin用藥組(apelin),每組8只。低氧組和apelin用藥組進(jìn)常壓低氧艙(8h/d,6d/w,4weeks),艙內(nèi)充入氮?dú)馐寡鯘舛染S持在9%~11%,艙內(nèi)水蒸汽用無水CaC
2、l2吸收。其中apelin用藥組在第一次進(jìn)艙前在頸背部皮下植入含有[pGlu]apelin-13的微量滲透泵,劑量為10nmol/kg.d;對照組和低氧組在頸背部皮下植入含有等容積生理鹽水的微量滲透泵。對照組置于艙外,自由呼吸空氣,其它飼養(yǎng)條件與低氧組和apelin組相同。②平均肺動脈壓(mPAP)、平均頸動脈壓(mCAP)和右心室肥大指數(shù)[RV/(LV+S)]的測定:大鼠飼養(yǎng)4周后,用戊巴比妥鈉(35mg/kg BW,i.p.)麻醉,
3、采用右心導(dǎo)管法測量mPAP,頸總動脈插管測量平均頸動脈壓(mCAP),分別稱取右心室(RV)和左心室加室間隔(LV+S)的重量,計算RV/(LV+S)作為右心室肥大指數(shù)。③Masson三色染色測定肺細(xì)小動脈管壁面積/管總面積(WA/TA)、管腔面積/管總面積(CA/TA)及中膜厚度(PAMT)。④采用硝酸還原酶法測定血漿及肺組織一氧化氮(NO)代謝產(chǎn)物亞硝酸鹽/硝酸鹽的含量。⑤采用化學(xué)比色法測定肺組織勻漿一氧化氮合酶(NOS),包括tN
4、OS、cNOS和iNOS的活性。⑥分別用0.5nmol/L、5nmol/L和10nmol/L[3H]-L-精氨酸([3H]-L-arginine,[3H]-L-Arg)對肺動脈進(jìn)行體外孵育,用β液閃儀測定攝入的[3H]-L-Arg的放射活性。 結(jié)果: ①與對照組相比,低氧組的mPAP高40.07%(P<0.01),RV/(LV+S)高32.00%(P<0.01)。與低氧組相比:apelin組的mPAP低11.17%(P<
5、0.05),RV/(LV+S)低9.09%(P<0.05)。mCAP三組間無顯著性差異。②肺組織Masson三色染色結(jié)果顯示:低氧組大鼠與對照組相比,肺細(xì)小動脈管壁顯著增厚,中膜厚度(PAMT)顯著增加,內(nèi)彈力層扭曲明顯,管腔明顯狹窄。而apelin組與低氧組相比肺細(xì)小動脈管壁和中膜厚度均顯著降低,內(nèi)彈力層扭曲輕微,管腔大小接近與對照組。與對照組相比,低氧組的WA/TA高52.63%(P<0.01),PAMT高150.48%(P<0.0
6、1),CA/TA低13.97%(P<0.01)。與低氧組相比,apelin組的WA/TA低23.59%(P<0.01),PAMT低50.13%(P<0.01),CA/TA高11.09%(P<0.01)。③血漿NO含量:低氧組比對照組低50.32%(P<0.01),apelin組比低氧組高47.96%(P<0.05)。④肺組織NO:低氧組比對照組低50%(P<0.05),apellin組比低氧組高97.62%(P<0.05)。⑤肺組織的N
7、OS活性測定結(jié)果顯示:對照組、低氧組和apelin組三者間的肺組織的tNOS活性無顯著性差異(P>0.05);與對照組比,低氧組的肺組織iNOS活性高25.37%(P<0.05),低氧組的肺組織cNOS活性低49.27%(P<0.01);而與低氧組比,apelin組的肺組織iNOS活性低25%(P<0.01);apelin組的肺組織cNOS活性高74.29%(P<0.01)。⑥L-Arg的轉(zhuǎn)運(yùn):用0.5nmol/L[3H]-L-Arg孵
8、育過肺動脈組織的[3H]-L-Arg的轉(zhuǎn)運(yùn)量,低氧組比對照組低36.36%(P<0.05),apelin組比低氧組高121.43%(P<0.01);用5nmol/L[3H]-L-Arg孵育過肺動脈組織的[3H]-L-Arg的轉(zhuǎn)運(yùn)量,低氧組比對照組低35.65%(P<0.05),apelin組比低氧組高84.98%(P<0.05);用10nmol/L[3H]-L-Arg孵育過肺動脈組織的[3H]-L-Arg的轉(zhuǎn)運(yùn)量,低氧組比對照組低32.
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