Apelin對(duì)低氧性肺動(dòng)脈高壓大鼠的作用及與一氧化氮的關(guān)系.pdf

1、目的： 研究外源性給予apelin對(duì)大鼠肺動(dòng)脈高壓和右心室肥大的防治作用，并探討其作用是否與一氧化氮系統(tǒng)有關(guān)。 方法： ①將清潔級(jí)雄性SD大鼠24只，體重180-220g，隨機(jī)分為對(duì)照組(control)、低氧組(hypoxia)和apelin用藥組(apelin)，每組8只。低氧組和apelin用藥組進(jìn)常壓低氧艙(8h/d，6d/w，4weeks)，艙內(nèi)充入氮?dú)馐寡鯘舛染S持在9％～11％，艙內(nèi)水蒸汽用無(wú)水CaC

2、l2吸收。其中apelin用藥組在第一次進(jìn)艙前在頸背部皮下植入含有[pGlu]apelin-13的微量滲透泵，劑量為10nmol/kg.d；對(duì)照組和低氧組在頸背部皮下植入含有等容積生理鹽水的微量滲透泵。對(duì)照組置于艙外，自由呼吸空氣，其它飼養(yǎng)條件與低氧組和apelin組相同。②平均肺動(dòng)脈壓(mPAP)、平均頸動(dòng)脈壓(mCAP)和右心室肥大指數(shù)[RV/(LV+S)]的測(cè)定：大鼠飼養(yǎng)4周后，用戊巴比妥鈉(35mg/kg BW，i.p.)麻醉，

3、采用右心導(dǎo)管法測(cè)量mPAP，頸總動(dòng)脈插管測(cè)量平均頸動(dòng)脈壓(mCAP)，分別稱(chēng)取右心室(RV)和左心室加室間隔(LV+S)的重量，計(jì)算RV/(LV+S)作為右心室肥大指數(shù)。③Masson三色染色測(cè)定肺細(xì)小動(dòng)脈管壁面積/管總面積(WA/TA)、管腔面積/管總面積(CA/TA)及中膜厚度(PAMT)。④采用硝酸還原酶法測(cè)定血漿及肺組織一氧化氮(NO)代謝產(chǎn)物亞硝酸鹽/硝酸鹽的含量。⑤采用化學(xué)比色法測(cè)定肺組織勻漿一氧化氮合酶(NOS)，包括tN

4、OS、cNOS和iNOS的活性。⑥分別用0.5nmol/L、5nmol/L和10nmol/L[3H]-L-精氨酸([3H]-L-arginine，[3H]-L-Arg)對(duì)肺動(dòng)脈進(jìn)行體外孵育，用β液閃儀測(cè)定攝入的[3H]-L-Arg的放射活性。 結(jié)果： ①與對(duì)照組相比，低氧組的mPAP高40.07％(P<0.01)，RV/(LV+S)高32.00％(P<0.01)。與低氧組相比：apelin組的mPAP低11.17％(P<

5、0.05)，RV/(LV+S)低9.09％(P<0.05)。mCAP三組間無(wú)顯著性差異。②肺組織Masson三色染色結(jié)果顯示：低氧組大鼠與對(duì)照組相比，肺細(xì)小動(dòng)脈管壁顯著增厚，中膜厚度(PAMT)顯著增加，內(nèi)彈力層扭曲明顯，管腔明顯狹窄。而apelin組與低氧組相比肺細(xì)小動(dòng)脈管壁和中膜厚度均顯著降低，內(nèi)彈力層扭曲輕微，管腔大小接近與對(duì)照組。與對(duì)照組相比，低氧組的WA/TA高52.63％(P<0.01)，PAMT高150.48％(P<0.0

6、1)，CA/TA低13.97％(P<0.01)。與低氧組相比，apelin組的WA/TA低23.59％(P<0.01)，PAMT低50.13％(P<0.01)，CA/TA高11.09％(P<0.01)。③血漿NO含量：低氧組比對(duì)照組低50.32％(P<0.01)，apelin組比低氧組高47.96％(P<0.05)。④肺組織NO：低氧組比對(duì)照組低50％(P<0.05)，apellin組比低氧組高97.62％(P<0.05)。⑤肺組織的N

7、OS活性測(cè)定結(jié)果顯示：對(duì)照組、低氧組和apelin組三者間的肺組織的tNOS活性無(wú)顯著性差異(P>0.05)；與對(duì)照組比，低氧組的肺組織iNOS活性高25.37％(P<0.05)，低氧組的肺組織cNOS活性低49.27％(P<0.01)；而與低氧組比，apelin組的肺組織iNOS活性低25％(P<0.01)；apelin組的肺組織cNOS活性高74.29％(P<0.01)。⑥L-Arg的轉(zhuǎn)運(yùn)：用0.5nmol/L[3H]-L-Arg孵

8、育過(guò)肺動(dòng)脈組織的[3H]-L-Arg的轉(zhuǎn)運(yùn)量，低氧組比對(duì)照組低36.36％(P<0.05)，apelin組比低氧組高121.43％(P<0.01)；用5nmol/L[3H]-L-Arg孵育過(guò)肺動(dòng)脈組織的[3H]-L-Arg的轉(zhuǎn)運(yùn)量，低氧組比對(duì)照組低35.65％(P<0.05)，apelin組比低氧組高84.98％(P<0.05)；用10nmol/L[3H]-L-Arg孵育過(guò)肺動(dòng)脈組織的[3H]-L-Arg的轉(zhuǎn)運(yùn)量，低氧組比對(duì)照組低32.