大葉蛇葡萄抗乙肝病毒活性物質(zhì)及含量分析研究.pdf

1、大葉蛇葡萄(Ampelopsis megalophylla Diels et.Gilg)為葡萄科蛇葡萄屬藥用植物，湖北恩施地區(qū)民間將其加工制成“霉茶”，為常用民間藥。其性平，味酸、澀，具有清熱涼血的功效；現(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，該屬部分藥用植物具有抗乙肝病毒的作用。本論文通過(guò)學(xué)科交叉的方法對(duì)大葉蛇葡萄抗乙肝病毒的活性物質(zhì)以及主要活性成分的含量分析進(jìn)行了相關(guān)研究。
　　 采用溶劑法將大葉蛇葡萄提取分離為乙醇提取物(①)、石油醚萃取物質(zhì)

2、部位(②)、乙酸乙酯萃取物質(zhì)部位(③)、水溶液物質(zhì)部位(④)。采用2215細(xì)胞模型進(jìn)行的體外抗乙肝病毒篩選結(jié)果表明，石油醚萃取物質(zhì)部位和乙酸乙酯萃取物質(zhì)部位為大葉蛇葡萄抗乙肝病毒的主要有效物質(zhì)部位。其半數(shù)毒性濃度(TC50)分別為99.1μg/ml和250μg/ml；石油醚萃取物質(zhì)部位對(duì)HBsAg和HBeAg的半數(shù)有效濃度(IC50)分別為4.2μg/ml和26.3μg/ml，選擇指數(shù)(TI)值分別為23.6和3.8；乙酸乙酯萃取物質(zhì)部

3、位對(duì)HBsAg和HBeAg的IC50分別為16.7μg/ml和62.5μg/ml，TI值分別為14.9和4.0。
　　 大葉蛇葡萄的乙酸乙酯萃取物質(zhì)部位的化學(xué)成分前期已進(jìn)行了研究。本論文對(duì)該藥用植物的石油醚萃取物質(zhì)部位的化學(xué)成分進(jìn)行了研究。采用現(xiàn)代色譜分離技術(shù)從大葉蛇葡萄的主要有效部位—石油醚萃取物質(zhì)部位中分離和鑒定了4種化合物，分別為大黃酚(Chrysophanol)、大黃素甲醚(Physcion)、楊梅素(Myricetin

4、)、β-谷甾醇(β-sitosterol)。其中大黃酚和大黃素甲醚均為首次從該植物中分離得到。將石油醚萃取物質(zhì)部位分離得到的化合物大黃酚和楊梅素及前期從乙酸乙酯萃取物質(zhì)部位得到的蛇葡萄素、楊梅苷、槲皮素和槲皮苷等化合物進(jìn)行體外抗乙肝病毒篩選。研究結(jié)果表明，蛇葡萄素和楊梅素對(duì)HBsAg和HBeAg均有顯著的抑制作用。其細(xì)胞毒性的TC50分別為187.5μg/ml和250μg/ml，蛇葡萄素對(duì)HBsAg和HBeAg的IC50分別為44.0μ

5、g/ml和15.4μg/ml，TI值分別為4.3和12.2；楊梅素對(duì)HBsAg和HBeAg的IC50分別為59.3μg/ml和12.2μg/ml，TI值分別為4.2和20.5；槲皮素對(duì)HBeAg有一定的抑制作用，其TC50為1000μg/ml，IC50為162.4μg/ml，TI值為6.1。
　　 采用現(xiàn)代色譜分析方法對(duì)大葉蛇葡萄藥材中主要活性成分“蛇葡萄素”的含量進(jìn)行了分析研究，建立了簡(jiǎn)約可行和可靠性強(qiáng)的含量測(cè)定方法。研究結(jié)果