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1、目的: 1、研究大黃素對(duì)原代培養(yǎng)的人牙周膜細(xì)胞生物學(xué)活性的影響。 2、研究大黃素對(duì)大鼠實(shí)驗(yàn)性牙周炎模型的牙周組織中IL-6、BGP表達(dá)的影響。 方法: 1、在體外培養(yǎng)人牙周膜細(xì)胞的基礎(chǔ)上,采用噻唑藍(lán)(MTT)比色法、考馬斯亮藍(lán)法、酶動(dòng)力學(xué)方法檢測(cè)探討大黃素對(duì)原代培養(yǎng)的人牙周膜細(xì)胞增殖活性、蛋白合成、堿性磷酸酶(ALP)活性的影響。 2、在成功建立大鼠實(shí)驗(yàn)性牙周炎模型的基礎(chǔ)上,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分別灌服大黃素
2、后第1、2、3、4周處死(每次每組10只),取牙周組織標(biāo)本作切片,行常規(guī)HE染色,觀察牙周組織病理變化狀況,并采用免疫組織化學(xué)法檢測(cè)IL-6、BGP水平變化。 結(jié)果: 1、大黃素對(duì)牙周膜細(xì)胞生長(zhǎng)增殖的影響:與對(duì)照組比較,作用24h,大黃素(B,C,D組)均能明顯增強(qiáng)人牙周膜細(xì)胞增殖能力(p<0.05),而A、E組與對(duì)照組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;作用48h,大黃素(A,B,C組)均能明顯增強(qiáng)人牙周膜細(xì)胞增殖能力(P<0.05),
3、而D、E組與對(duì)照組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;作用72h,大黃素(A,B,C組)均能明顯增強(qiáng)人牙周膜細(xì)胞增殖能力(p<0.05),而D、E組與對(duì)照組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。而且大黃素在20-50 μg/ml濃度范圍內(nèi)作用時(shí)間最長(zhǎng)。 2、大黃素對(duì)牙周膜細(xì)胞蛋白總含量的影響:大黃素組(A,B,C組)細(xì)胞培養(yǎng)液中蛋白總含量均明顯高于對(duì)照組(P<0.05),而大黃素組(D、E組)與對(duì)照組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。說明大黃素在10-50 μg/ml濃度范圍內(nèi)蛋白
4、總含量增加,100-200μg/ml濃度時(shí)對(duì)蛋白總含量無明顯影響。 3、大黃素對(duì)牙周膜細(xì)胞ALP活性的影響:大黃素(C組)細(xì)胞培養(yǎng)液中ALP活性均明顯高于對(duì)照組(p<0.05),而大黃素組(A,B,D,E組)與對(duì)照組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。說明大黃素在50 μg/ml濃度范圍內(nèi)能增強(qiáng)人牙周膜細(xì)胞ALP活性,10、20、100、200 μg/ml濃度時(shí)對(duì)ALP活性無明顯影響。 4、大黃素對(duì)大鼠實(shí)驗(yàn)性牙周炎模型的牙周組織中IL-6、BGP
5、表達(dá)的影響:牙周炎組牙周組織中IL-6表達(dá)明顯高于正常組(P<0.05),IL-6表達(dá)于治療第3、4周明顯低于牙周炎平行對(duì)照組(P<0.05),牙周炎治療組IL-6表達(dá)第1、2周相比無明顯差異,第3、4周IL-6表達(dá)相比亦無明顯差異,而第3、4周IL-6表達(dá)明顯低于第1、2周(P<0.05)。牙周炎組牙周組織中BGP表達(dá)低于正常組(P<0.05),各時(shí)間段牙周炎治療組牙周組織中BGP表達(dá)明顯高于牙周炎平行對(duì)照組(P<0.05),牙周炎治
6、療組BGP表達(dá)第1、2周相比無明顯差異,第3、4周BGP表達(dá)明顯高于第1周(P<0.05),而第3、4周之間BGP表達(dá)無明顯差異。 結(jié)論: 大黃素在一定濃度范圍內(nèi)(20-50 μg/ml)能提高牙周膜細(xì)胞的增殖活性、蛋白合成及ALP活性,大鼠實(shí)驗(yàn)性牙周炎模型牙周組織中IL-6含量較正常對(duì)照組明顯升高,BGP含量較正常對(duì)照組明顯降低,應(yīng)用大黃素能抑制實(shí)驗(yàn)性大鼠牙周炎模型牙周組織中IL-6的表達(dá),增加了BGP的表達(dá)。根據(jù)上述
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