大黃復(fù)方配伍組分及配伍環(huán)境相互作用規(guī)律研究.pdf

1、目的：研究大黃藥對(duì)中總蒽醌的水提取工藝。建立可見分光光度法測(cè)定大黃及其藥對(duì)水提液中總蒽醌的含量。建立反相高效液相色譜法測(cè)定大黃及其藥對(duì)水提液中蘆薈大黃素、大黃酸、大黃素、大黃酚、大黃素甲醚等5個(gè)成分的含量。分別考察枳實(shí)、厚樸、黃連、黃芩、醋甘遂、牡丹皮、附子水提液提供的pH環(huán)境，研究其對(duì)大黃蒽醌類成分溶出的影響。研究pH值和藥物劑量變化對(duì)大黃蒽醌類成分含量的影響。
　　方法：考察大黃藥對(duì)中總蒽醌的水提取方法，建立可見分光光度法測(cè)定

2、總蒽醌的含量：以大黃素為對(duì)照品，1%醋酸鎂甲醇溶液對(duì)其進(jìn)行顯色，在510nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度，測(cè)定大黃、枳實(shí)藥對(duì)中總蒽醌的含量；采用L9(34)正交試驗(yàn)法優(yōu)選大黃藥對(duì)總蒽醌的最佳提取工藝。反相高效液相色譜法測(cè)定蘆薈大黃素、大黃酸、大黃素、大黃酚、大黃素甲醚的含量：采用Diamonsil C18（2）柱（5μm，250 x4.6mm），甲醇-0.1%磷酸溶液（v/v）為流動(dòng)相，進(jìn)行梯度洗脫，流速1.0mL·min-1，檢測(cè)波長(zhǎng)為254nm

3、，柱溫為30℃。采用pH計(jì)精密測(cè)定各藥液pH值，用36%鹽酸與蒸餾水配制各pH值的鹽酸水溶液用于提取大黃，反相高效液相色譜法測(cè)定上述5個(gè)成分的含量，分析pH環(huán)境對(duì)其溶出的影響。應(yīng)用星點(diǎn)設(shè)計(jì)-響應(yīng)曲面法，研究并分析瀉心湯中黃連、黃芩劑量變化及提取溶劑pH值變化對(duì)大黃蒽醌類成分溶出的影響。
　　結(jié)果：各藥對(duì)總蒽醌的提取方法單因素考察結(jié)果：各味藥先用100倍量蒸餾水提取20min，后加入等量大黃在提取10min?？梢姺止夤舛确y(cè)定大黃、

4、枳實(shí)藥對(duì)中總蒽醌的含量：線性范圍為8.67～17.3μg·mL-1（r=0.9993），平均回收率為99.0%，RSD為2.5%。反相高效液相色譜法測(cè)定蘆薈大黃素、大黃酸、大黃素、大黃酚、大黃素甲醚的含量：蘆薈大黃素的進(jìn)樣量在0.00560～0.112μg（r=0.9999）范圍內(nèi)具有良好的線性關(guān)系，平均回收率為97.4%，RSD=2.3%（n=6）。大黃酸的進(jìn)樣量在0.0807～1.62μg（r=0.9999）范圍內(nèi)具有良好的線性關(guān)系

5、，平均回收率為98.0%， RSD=2.1%（n=6）。大黃素的進(jìn)樣量在0.0276～0.552μg（r=0.9999）范圍內(nèi)具有良好的線性關(guān)系，平均回收率為99.5%，RSD=1.9%（n=6）。大黃酚的進(jìn)樣量在0.0169～0.338μg（r=0.9999）范圍內(nèi)具有良好的線性關(guān)系，平均回收率為100.2%，RSD=2.4%（n=6）。大黃素甲醚的進(jìn)樣量在0.0350～0.700μg（r=0.9999）范圍內(nèi)具有良好的線性關(guān)系，平均

6、回收率為101.2%， RSD=0.7%（n=6）。經(jīng)pH計(jì)測(cè)定，枳實(shí)藥液、厚樸藥液、黃連藥液、黃芩藥液、醋甘遂藥液、牡丹皮藥液及附子藥液的pH值分別為5.70、6.35、5.60、5.50、5.37、5.37、5.68，可見分光光度法測(cè)定大黃總蒽醌的溶出率隨鹽酸水溶液pH值降低而減小。在與各藥味的配伍中，大黃、黃芩藥對(duì)總蒽醌的溶出率最高，大黃、黃連藥對(duì)總蒽醌的溶出率最低。星點(diǎn)設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)中，自變量黃連（X1）的線性效應(yīng)、二次效應(yīng)和交互效應(yīng)

7、均有較高的顯著性，提取溶劑的pH值（X3）的二次效應(yīng)也有較高的顯著性。
　　結(jié)論：本實(shí)驗(yàn)確定了大黃與各藥味配伍蒽醌類成分的水提取方法，建立了可見分光光度法測(cè)定各配伍藥液中總蒽醌的含量，以及采用高效液相色譜法測(cè)定蘆薈大黃素、大黃酸、大黃素、大黃酚、大黃素甲醚的含量；初步對(duì)大黃在配伍過(guò)程中目標(biāo)成分受藥液pH環(huán)境及各藥味所含成分的影響進(jìn)行了分析。由多元回歸方程和方差分析結(jié)果可知，大黃蒽醌類成分的溶出量受方劑中黃連劑量的影響較顯著，其次，