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1、目的:建立大鼠離體肝臟保存模型,探討丹參和HO-1的mRNA及其蛋白在離體肝臟保存時的關(guān)系,進(jìn)一步明確丹參對肝臟的保護(hù)作用的生物機(jī)制,為進(jìn)一步提出丹參在缺血再灌注對肝臟保護(hù)作用提供理論依據(jù)。 方法:一、通過逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶反應(yīng)(RT-PCR)測定各組時間段保存后HO-1mRNA表達(dá)情況;二、通過蛋白免疫組化監(jiān)測各組時間段保存后HO-1蛋白表達(dá)水平;三、用光鏡觀察各組不同時相肝細(xì)胞、肝竇皮細(xì)胞的形態(tài)變化;四、HO-1的mRNA表達(dá)相
2、對值及其蛋白的表達(dá)灰度值與肝臟損傷評分相關(guān)分析。 結(jié)果:一、成功建立大鼠離體肝臟保存模型;二、RT—PCR結(jié)果顯示,丹參使HO-1mRNA的表達(dá)上調(diào),經(jīng)ZnPP預(yù)處理組微量表達(dá);三、免疫組化結(jié)果顯示丹參使HO-1蛋白相對應(yīng)于HO-1mRNA的表達(dá)上調(diào)而上調(diào);四、病理切片可以證明經(jīng)丹參處理后肝標(biāo)本比對照組的干細(xì)胞、肝竇、損害明顯較小,而經(jīng)ZnPP預(yù)處理組較其他兩組損害嚴(yán)重;五、在不同組相應(yīng)的時間段HO-1mRNA的表達(dá)與肝組織損傷
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