癃閉舒對(duì)大鼠肝臟細(xì)胞色素P450酶系mRNA及蛋白質(zhì)表達(dá)的調(diào)控作用.pdf

1、目的:癃閉舒膠囊是復(fù)方中藥制劑，臨床用于治療良性前列腺增生和慢性前列腺炎。長(zhǎng)期服用可能通過(guò)影響細(xì)胞色素P450酶系，進(jìn)而引起藥物間相互作用。本文旨在研究大鼠連續(xù)灌胃癃閉舒兩個(gè)月后，大鼠肝臟細(xì)胞色素P450酶系各亞型mRNA和蛋白質(zhì)表達(dá)的改變。
　　方法:健康雄性SD大鼠16只，體重180-200g，每組8只，隨機(jī)分成兩組，溶媒對(duì)照組(control，CON)灌胃給予0.5％的羧甲基纖維素鈉(CMC-Na)溶液;癃閉舒組灌胃給予15

2、4.3mg/kg的癃閉舒(longbishu，LBS)藥粉（相當(dāng)臨床成人劑量的6倍）。使用0.5％的CMC-Na溶液配置癃閉舒混懸液，連續(xù)灌胃給藥兩個(gè)月，于末次給藥后次日處死動(dòng)物。采用大鼠原位腦灌流的方法將大鼠肝臟用生理鹽水灌流至土黃色，迅速剪取肝臟約100mg，放入D/RNase-free凍存管，另取2g肝臟用于制備肝微粒體，-80℃低溫凍存?zhèn)溆?。采用Real-time PCR技術(shù)和Western-blot技術(shù)分別研究?jī)山M大鼠肝臟CY

3、P1A2、CYP2B1、CYP2C11、CYP2D1、CYP2E1、CYP3A1和CYP3A2亞型mRNA表達(dá)水平以及CYP1A1、CYP1A2、CYP2C11、CYP2D1、CYP2E1和CYP3A1亞型蛋白質(zhì)表達(dá)水平的變化。
　　結(jié)果:
　　1、癃閉舒對(duì)大鼠肝臟CYP各亞型mRNA表達(dá)水平的影響。
　　大鼠灌胃給予癃閉舒兩個(gè)月后，與對(duì)照組相比，癃閉舒組大鼠肝臟CYP1A2、CYP2B1、CYP2C11、CYP2E1

4、、CYP3A1、CYP3A2的mRNA表達(dá)水平顯著升高(P＜0.01)。將對(duì)照組mRNA表達(dá)量設(shè)為基準(zhǔn)1，癃閉舒組大鼠肝臟CYP1A2、CYP2B1、CYP2C11、CYP2E1、CYP3A1和CYP3A2的mRNA相對(duì)表達(dá)量分別為2.20±0.16、1.85±0.16、1.29±0.05、1.52±0.09、1.44±0.06和1.78±0.10。
　　與對(duì)照組相比，癃閉舒組大鼠肝臟CYP2D1的mRNA表達(dá)水平?jīng)]有明顯變化(P

5、＞0.05)。癃閉舒組大鼠肝臟CYP2D1的mRNA相對(duì)表達(dá)量為1.06±0.04。
　　2、癃閉舒對(duì)大鼠肝臟CYP各亞型蛋白質(zhì)表達(dá)水平的影響。
　　大鼠灌胃給予癃閉舒兩個(gè)月后，與對(duì)照組相比，癃閉舒組大鼠肝臟CYP1A1、CYP1A2、CYP2C11、CYP2D1、CYP3A1的蛋白質(zhì)表達(dá)水平顯著升高(P＜0.01)。癃閉舒組大鼠肝臟CYP1A1、CYP1A2、CYP2C11、CYP2D1和CYP3A1的蛋白質(zhì)表達(dá)量與GAP

6、DH蛋白表達(dá)量的比值分別為0.39±0.02、0.63±0.02、1.32±0.03、1.88±0.04和0.61±0.02。對(duì)照組大鼠肝臟CYP1A1、CYP1A2、CYP2C11、CYP2D1和CYP3A1的蛋白質(zhì)表達(dá)量與GAPDH蛋白表達(dá)量的比值分別為0.32±0.02、0.41±0.01、1.08±0.05、
　　1.56±0.02和0.44±0.01。
　　與對(duì)照組相比，癃閉舒組大鼠肝臟CYP2E1的蛋白質(zhì)表達(dá)水平

7、顯著降低(P＜0.05)。給藥組和對(duì)照組大鼠肝臟CYP2E1的蛋白質(zhì)表達(dá)量與GAPDH蛋白表達(dá)量的比值分別為0.19±0.01和0.24±0.01。
　　結(jié)論:
　　1、大鼠灌胃給予抗良性前列腺增生藥癃閉舒兩個(gè)月后，大鼠肝臟CYP1A2、CYP2B1、CYP2C11、CYP2E1、CYP3A1和CYP3A2亞型的mRNA表達(dá)水平顯著升高。
　　2、大鼠灌胃給予抗良性前列腺增生藥癃閉舒兩個(gè)月后，大鼠肝臟CYP2E1的蛋白