肌纖維母細胞在肺間質(zhì)維化中的作用.pdf

1、目的:通過動物實驗，從器官病理、超微病理、細胞水平研究肌纖維母細胞，以探討肌纖維母細胞在肺纖維化發(fā)病中的作用及意義。 方法:健康Wistar大鼠64只，隨機分為2組：對照組和模型組，每組32只。模型組經(jīng)氣管內(nèi)注入博萊霉素(bleomycin，BLM)誘導肺纖維化，對照組氣管內(nèi)灌注生理鹽水代替。各組動物均于氣管內(nèi)灌藥后3、7、14、28天分別處死8只大鼠，測動物體重及肺濕重，計算肺系數(shù)(肺濕重mg/體重g)；取肺組織做蘇木精-伊紅

2、(haematoxylin-eosin，HE)染色、Van Gieson氏膠原纖維(VG)染色和制備電鏡標本，并進行體外培養(yǎng)大鼠肺成纖維細胞。HE染色觀察肺組織結(jié)構(gòu)的病理改變；VG染色觀察肺組織膠原纖維的表達情況；透射電鏡觀察肺組織的超微結(jié)構(gòu)的改變。免疫組化方法測定α-平滑肌肌動蛋白(α-smooth muscle actin，α-SMA)和I型膠原(Type I codagen，∞l-I)的表達水平；免疫細胞化學方法測定培養(yǎng)的成纖維細

3、胞α-SMA表達水平。 結(jié)果:與對照組相比，模型組大鼠的肺系數(shù)值均顯著增高(P<0.05)；a-SMA、∞l-I在正常對照組大鼠肺組織中呈弱表達，在模型組大鼠肺組織中呈較高表達(P<0.05)；模型組大鼠細胞培養(yǎng)爬片測定α-SMA表達水平顯著增高(P<0.05)；光鏡下，HE染色顯示模型組大鼠的肺組織結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，肺泡間隔增寬，炎性細胞滲出，肺泡結(jié)構(gòu)破壞，融合，形成纖維灶；VG染色顯示模型組大鼠膠原纖維大量表達；電鏡下，肺組織超