超聲波和運(yùn)動(dòng)療法對兔膝骨關(guān)節(jié)炎軟骨細(xì)胞凋亡,BCL-2和MMP-13的影響.pdf

1、目的：
　　 觀察超聲波和運(yùn)動(dòng)療法對兔實(shí)驗(yàn)性骨關(guān)節(jié)炎軟骨細(xì)胞凋亡、Bcl-2和MMP-13表達(dá)的影響，探討超聲波和運(yùn)動(dòng)療法治療骨關(guān)節(jié)炎的機(jī)制。
　　 方法：
　　 取健康新西蘭大白兔26只，體重2kg左右。隨機(jī)抽取6只作為正常組，余下20只采用右后膝關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射木瓜蛋白酶法制作OA模型，隨機(jī)處死兩只驗(yàn)證造模成功。剩余18只隨機(jī)分為模型組、運(yùn)動(dòng)組、超聲波組。治療前予以測定右膝關(guān)節(jié)活動(dòng)度。模型組不作處理，籠內(nèi)自由活動(dòng)

2、。運(yùn)動(dòng)組在減重跑步機(jī)上跑步，每日1次，每次30分鐘，第1周速度為0、8米/分，第2周速度為1.0米/分，第3周及第4周速度為1.2米/分。超聲波組右膝給予水下超聲波治療，頻率1KHz，強(qiáng)度500mW/cm2，通斷比為20％的超聲波治療，每天1次，每次10分鐘，連續(xù)4周。所有動(dòng)物在造模前、治療前、治療結(jié)束后進(jìn)行體重及關(guān)節(jié)活動(dòng)度測定;治療結(jié)束后行空氣栓塞法處死，切開膝關(guān)節(jié)囊，肉眼觀察關(guān)節(jié)軟骨，滑膜和關(guān)節(jié)液變化情況;取患膝股骨內(nèi)髁表面軟骨和關(guān)

3、節(jié)囊滑膜，常規(guī)固定、包埋、切片，HE染色。TUNE法（脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的缺口末端標(biāo)記法）檢測軟骨細(xì)胞凋亡并計(jì)算凋亡率，免疫組化法檢測Bcl-2及MMP-13的表達(dá)。
　　 結(jié)果：
　　 1.大體及病理觀察顯示超聲組、運(yùn)動(dòng)組關(guān)節(jié)軟骨損傷程度較模型組減輕，且各治療組雙后膝關(guān)節(jié)活動(dòng)度較模型組變化小。
　　 2.HE染色正常組滑膜無明顯炎癥表現(xiàn)，模型組滑膜炎癥明顯，經(jīng)超聲治療及運(yùn)動(dòng)治療后，滑膜炎癥減輕。模型組

4、滑膜評分較正常組高(P＜0.05);超聲組、運(yùn)動(dòng)組滑膜評分較模型組低(P＜0.05);超聲組和運(yùn)動(dòng)組無明顯差異(P＞0.05)。
　　 3、TUNEL法檢測各組均可見凋亡細(xì)胞。模型組凋亡細(xì)胞明顯增多，與正常組比較有明顯差異(P＜0.05);超聲組、運(yùn)動(dòng)組凋亡率降低，與模型組有明顯差異(P＜0.05)。運(yùn)動(dòng)組與超聲組比較差異無顯著性。
　　 4、Bcl-2免疫組化顯示:模型組Bcl-2表達(dá)較低，染色較淺，與正常組比較，差異

5、有顯著性(P＜0.05)，超聲組、運(yùn)動(dòng)組Bcl-2表達(dá)明顯上升，染色較深，與模型組比較差異有顯著性(P＜0.05);運(yùn)動(dòng)組與超聲組比較差異無顯著性。
　　 5、MMP-13免疫組化顯示:正常組僅在軟骨表層有少量MMP-13陽性表達(dá)，模型組MMP-13表達(dá)明顯增高，與正常組比較，差異有顯著性(P＜0.05);超聲組及運(yùn)動(dòng)組MMP-13表達(dá)明顯下降，與模型組比較差異有顯著性(P＜0.05)。運(yùn)動(dòng)組與超聲組比較差異無顯著性。