利用無機結(jié)合肽可控制備納米鉑粒子的研究.pdf

1、無機結(jié)合肽是一類存在于生物體內(nèi)對相應(yīng)無機物（金屬單質(zhì)、氧化物、無機鹽等）具有特異吸附結(jié)合能力的小肽，大多數(shù)無機結(jié)合肽的長度在7-20AA之間。無機結(jié)合肽在生物體內(nèi)作為無機組織形成的模板和促發(fā)劑，對生物組織功能結(jié)構(gòu)的形成有重要意義。Pt結(jié)合肽是一類對Pt元素具有特異吸附結(jié)合力的具有7個氨基酸殘基的多肽，目前發(fā)現(xiàn)了4個序列：QSVTSTK、DRTSTWR、TSPGQKQ、SSSHLNK,(為了研究方便我們一次命名為PT1、PT2、PT3、P

2、T4)。
　　 實驗首先驗證了PT1和PT2離開體內(nèi)溫和中性的環(huán)境后對鉑的作用力。在離體條件下，0.5mg/ml的多肽和1.0mmol/L的Na2PtCl6室溫PH中性放置24h后，TEM檢測發(fā)現(xiàn)了直徑在1nm左右團聚在一起的呈方形和球形晶體，經(jīng)EDX分析顯示晶體的元素組成中Pt遠(yuǎn)大于Cl的含量，顯然晶體不可能是PtCl4或PtCl2晶體，因此晶體為鉑單質(zhì)。運用可見-紫外光譜儀對混合溶液全波長掃描發(fā)現(xiàn)，PtCl62+在258nm

3、處的吸收峰隨著時間進行逐漸減弱，24小時后完全消失，說明PtCl62+已經(jīng)消耗殆盡。
　　 用固定化于PET膜上無機結(jié)合肽制備出鉑微晶體，SEM檢測顯示所得微晶體的直徑在1-2微米之間，其XPS譜圖中出現(xiàn)了結(jié)合能值為71.0ev峰(Pt4f標(biāo)準(zhǔn)值71.lev)，確認(rèn)晶體為鉑納晶，由此推斷鉑結(jié)合肽在無細(xì)胞狀態(tài)下能夠作為模板仿生合成鉑晶體。對反應(yīng)前后的多肽進行原二色譜掃描后，發(fā)現(xiàn)多肽在200nm處的吸收峰逐漸減弱，200nm處一般被

4、認(rèn)為是無規(guī)則卷曲的吸收峰，因此證明多肽在吸附還原鉑離子的過程中自身的構(gòu)象也發(fā)生了變化。
　　 無機結(jié)合肽在跟PtCl62+作用的過程中，起到了激發(fā)劑、還原劑和模板的作用，為了進一步使制備所得的納米粒子的大小可控，我們在反應(yīng)體系中添加了3種典型的表面活性劑，PVP（聚乙烯吡咯烷酮）、聚丙烯酸鈉和殼聚糖來控制鉑晶體結(jié)晶的速度，使制備的鉑晶體的大小可控。TEM結(jié)果證明，三種表面活性劑均能顯著的改善納米粒子的團聚情況，使制備出的納米粒子

5、的大小均勻。然后對表面活性劑的種類和用量進行討論，發(fā)現(xiàn)三種表面活性劑用量為Pt4+的5倍的時候效果最佳，過少的穩(wěn)定劑所得納米粒子容易團聚，而過多的穩(wěn)定劑則由于穩(wěn)定劑分子間過多的相互作用使所得納米粒子沉淀。因此在10倍穩(wěn)定劑存在下，所得三種結(jié)果均不如5倍時理想。
　　 基于以上實驗結(jié)果以及受核-殼結(jié)構(gòu)的啟發(fā)，對可控大小制備納米鉑粒子的實驗進行了改進。事先采用T.Terranish等的方法，用甲醇還原法制備5-6nm的較小的納米鉑顆