腦硬死后遠隔部位小腦皮層NoGo-A蛋白表達的研究.pdf

1、目的:少突膠質細胞(OLIG)是構成中樞神經系統(CNS)髓鞘的主要成分，其變化與免疫反應之間有一定聯系。腦缺血損傷后CNS血腦屏障通透性發(fā)生改變，允許血液中的免疫成分進入腦內，同時OLIG被轉化成抗原提呈細胞(APC)和免疫效應細胞，釋放各種免疫抑制因子、激活APC提呈抗原，發(fā)揮抗原清除作用，抑制腦組織再生及修復。Nogo-A是CNS髓鞘中主要的軸索抑制因子，表現出強烈的抑制軸突生長作用，其主要由OLIG表達，離體和活體實驗均已證實它

2、與動物CNS神經軸索的再生關系密切。最新文獻報道，腦梗死造成的神經功能缺損不僅與梗死灶局部損傷后神經細胞壞死和凋亡有關，而且也與遠隔梗死灶相關部位的繼發(fā)性神經細胞壞死和凋亡有關。已有文獻報道，腦缺血后在缺血邊緣區(qū)及遠隔部位大量膠質細胞活化增殖，活化的膠質細胞對于維持腦微環(huán)境以及防止神經元死亡起一定的作用，但過度活化的膠質細胞可以釋放有害因子，并且形成的膠質疤痕可通過免疫學機制釋放軸索抑制因子（如Nogo-A）影響神經元軸突的生長、突觸的

3、重建及阻斷腦組織微循環(huán)，這表明腦梗死后遠隔部位的繼發(fā)性損傷與Nogo-A蛋白的抑制作用密切相關。本實驗采用改良的Zea Longa法制備持續(xù)性閉塞大鼠大腦中動脈的腦缺血模型，應用免疫組織化學法觀察遠隔部位小腦皮層Nogo-A蛋白的動態(tài)表達。
　　 方法:健康雄性SPF級SD(Sprague-Dawley)大鼠60只，體質量250-280g，隨機分為實驗組（n=30，制作大腦中動脈閉塞模型）和假手術對照組(n=30)，每組又按大腦

4、中動脈閉塞時間的不同隨機分為1d、3d、5d、7d、10d五個亞組，每個亞組6只大鼠。參照Zea Longa法制備大鼠大腦中動脈閉塞模型，Zea Longa的5級4分法評分，將評分在1-3分的動物納入下一步實驗。HE染色觀察小腦組織形態(tài)變化，免疫組化法檢測小腦皮層Nogo-A蛋白的表達，然后進行統計學分析，P＜0.05有顯著性差異。
　　 結果:
　　 1、HE染色結果示：大腦中動脈閉塞(MCAO)后1d、3d、5d、7

5、d、10d組與假手術組比較，神經細胞的數量、形態(tài)分布正常，未見明顯改變。
　　 2、免疫組織化學檢測Nogo-A蛋白表達：Nogo-A蛋白陽性免疫反應產物主要分布于OLIG的胞漿，染色呈棕黃色細顆粒沉積。假手術組各時間點Nogo-A蛋白表達無明顯差異；MCAO組Nogo-A蛋白的表達于術后第5d、7d、10d較假手術組明顯增高，第1d、3d無統計學差異。
　　 結論:大鼠大腦中動脈閉塞后遠隔部位小腦皮層Nogo-A蛋白呈