“嗅三針”對AD海馬區(qū)膽堿能系統(tǒng)代謝的干預(yù)效應(yīng)研究.pdf

1、目的：本研究將通過在保留和切斷嗅覺通路情況下，觀察AD模型大鼠的行為學(xué)能力變化、膽堿能系統(tǒng)神經(jīng)遞質(zhì)活性、受體含量及其mRNA的表達(dá)，揭示“嗅三針”對AD大鼠行為學(xué)及病理的改變和對海馬區(qū)中樞膽堿能系統(tǒng)的調(diào)節(jié)作用。證實(shí)嗅覺通路是“嗅三針”對AD海馬區(qū)膽堿能系統(tǒng)代謝的干預(yù)效應(yīng)研究的主要途徑，闡明“嗅三針”通過嗅覺通路治療AD的分子機(jī)制。
　　 方法：選用60只SD大鼠隨機(jī)分為6組（每組10 只）：Ⅰ組（對照組）：于顱頂如AD造模方法中

2、鉆孔注無菌生理鹽水后即縫合皮膚，術(shù)后4周如嗅神經(jīng)切斷術(shù)中顱頂鉆孔后即縫合皮膚，再行常規(guī)飼養(yǎng)4周后檢測相應(yīng)指標(biāo)。Ⅱ組（AD模型組）：于顱頂如AD 造模方法中鉆孔注Aβ-淀粉樣肽后即縫合皮膚，術(shù)后4周如嗅神經(jīng)切斷術(shù)中顱頂鉆孔后即縫合皮膚，再行常規(guī)飼養(yǎng)4周后檢測相應(yīng)指標(biāo)。Ⅲ組（嗅神經(jīng)切斷組）：于顱頂如AD 造模方法中鉆孔注無菌生理鹽水后即縫合皮膚，術(shù)后4周行嗅神經(jīng)切斷術(shù)，再行常規(guī)飼養(yǎng)4周后檢測相應(yīng)指標(biāo)。Ⅳ組（AD模型+嗅神經(jīng)切斷組）：于顱頂如

3、AD 造模方法中鉆孔注Aβ-淀粉樣肽后即縫合皮膚，術(shù)后4周行嗅神經(jīng)切斷術(shù)，再行常規(guī)飼養(yǎng)4周后檢測相應(yīng)指標(biāo)。Ⅴ組（AD模型+嗅三針組）：于顱頂如AD造模方法中鉆孔注Aβ-淀粉樣肽后即縫合皮膚，術(shù)后4周如嗅神經(jīng)切斷術(shù)中顱頂鉆孔后即縫合皮膚，行“嗅三針”治療4周后檢測相應(yīng)指標(biāo)。Ⅵ組（AD模型+嗅神經(jīng)切斷+嗅三針組）：于顱頂如AD 造模方法中鉆孔注Aβ-淀粉樣肽后即縫合皮膚，術(shù)后4周行嗅神經(jīng)切斷術(shù)，行“嗅三針”治療4周后檢測相應(yīng)指標(biāo)。電針方法：

4、迎香穴向內(nèi)上方斜刺0.3cm，印堂穴向鼻根部平刺0.3cm；電針參數(shù)：1mA 疏密波；正極接印堂穴，負(fù)極接一側(cè)迎香穴，疏密波刺激10分鐘；負(fù)極換接另測迎香穴，疏密波刺激10分鐘，1次/日。以上電針處理均在造模成功后第一天進(jìn)行，5日為一個療程，休息2天，共進(jìn)行4個療程。未行電針治療組常規(guī)飼養(yǎng)至電針療程結(jié)束。
　　 結(jié)果：Morris 水迷宮、免疫組化及RT-PCR測試：在保留嗅覺通路的情況下，“嗅三針”治療后，與Ⅱ組（AD模型組）

5、相比，Ⅴ組（AD模型+嗅三針組）水迷宮潛伏期及游泳總路程皆明顯減少，ChAT的活性明顯升高，AchE的活性明顯降低，Ach的含量明顯增高，膽堿能M1受體的含量增高，M1受體mRNA表達(dá)也提高，有顯著性差異（P＜0.05）；而在切斷嗅覺通路的情況下，Ⅳ組（AD模型+嗅神經(jīng)切斷組）與Ⅵ組（AD模型+嗅神經(jīng)切斷+嗅三針組）比較無顯著性差異（P＞0.05），Ⅲ組（嗅神經(jīng)切斷組）與Ⅳ組（AD模型+嗅神經(jīng)切斷組）比較有顯著性差異（P＜0.05）；提