智三針干預(yù)對AD模型大鼠學(xué)習(xí)記憶的影響及作用機制研究.pdf

1、目的：本研究以AD大鼠模型為實驗載體，應(yīng)用智三針進行干預(yù)，通過觀察智三針對AD大鼠的學(xué)習(xí)記憶能力、大腦海馬PP1、PP2A蛋白表達、AChAT（膽堿乙酰化酶）、AChE（乙酰膽堿酯酶）活性以及大鼠血清GSH-Px活力影響，初步探討針刺的抗AD作用機制。
　　方法：將80只SD雄性大鼠按體重隨機分成A、B、C、D四組，每組20只，分別編予A1～20號、B1～20號、C1～20、D1～20號，其中D組又稱正常組。4組均經(jīng)腹腔內(nèi)連續(xù)注射

2、D-半乳糖50mg/Kg/d6周，之后ABC三組進行造模。模型組大鼠用牙科鉆在顱骨上打孔，注射Aβ1-40溶液2ul(10ug)。AD模型大鼠被分為三組，分別是智三針組、非穴組和模型組。造模成功1周后，智三針組予針刺神庭及雙側(cè)本神穴，非穴組予針刺大鼠雙肋下固定非穴點針刺方法:毫針針刺，均勻捻轉(zhuǎn)，角度180°，頻率60次/min。持續(xù)刺激2min，休息1min，如此反復(fù)，持續(xù)15min。療程:每天1次，周末休息，治療4周，共20次。正常組

3、大鼠和模型組大鼠同樣抓取、固定、取穴、消毒，但是不予針刺治療。沿額極后2mm-8mm冠狀位切取大腦海馬組織，做免疫組化。大鼠學(xué)習(xí)記憶能力測試在Y迷宮系統(tǒng)中進行。實驗結(jié)束后處死實驗大鼠，檢測大腦海馬PP1、PP2A蛋白表達、AChAT（膽堿乙?；福ChE（乙酰膽堿酯酶）活性以及大鼠血清GSH-Px活力。
　　結(jié)果：⑴相同時間點，不同組間TRT比較:第1、2、3、4、31天，模型組、智三針組都大于正常組(P＜0.05);第31天

4、，智三針組小于模型組(P＜0.05)。同一組別，不同時間點TRT比較:(1)模型組第1天與第2、3、4、31天比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，第2、3、4、31天兩兩比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。(2)正常組第1天與第2天比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05);與第3、4、31天比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜=0.05);第2天與第3、4天比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05);與第31天比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜=0

5、.05);第3、4、31天兩兩比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。(3)智三針組第1天與第2、3、4、31天比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜=0.05);第2天與第3、4天比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05);與第31天比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜=0.05)。⑵免疫組織化學(xué)檢測研究表明，與正常組大鼠比較，模型組大鼠大腦海馬的PP1、PP2A蛋白表達均顯著降低，經(jīng)過智三針干預(yù)PP1、PP2A蛋白表達均顯著上升，但跟正常大鼠比較還有顯著

6、差異。⑶與正常組大鼠比較，模型組大鼠大腦海馬的ChAT、AchE活性均顯著降低，經(jīng)過智三針干預(yù)ChAT、AchE活性均顯著上升，但跟正常組的大鼠比較還有顯著差異，而與非穴位組的大鼠的ChAT、AchE活性進行比較，差異顯著。⑷模型組、非穴位組及智三針組大鼠血清的GSH-Px活力較正常組均顯著降低，經(jīng)統(tǒng)計學(xué)分析，差異有極顯著性(P＜0.001)，智三針組與模型組外周血清GSH-Px活力比較，經(jīng)統(tǒng)計學(xué)分析，差異有極顯著性(P＜0.01)，非

7、穴組與智三針組外周血清GSH-Px活力比較，經(jīng)統(tǒng)計學(xué)分析，差異有極顯著性(P＜0.01)。
　　結(jié)論：①智三針干預(yù)治療AD模型大鼠可以減少全天總反應(yīng)時間(TRT)，且TRT明顯較模型組和非穴位組縮短，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義，表明智三針可以改善AD大鼠的學(xué)習(xí)記憶功能。②智三針干預(yù)AD模型大鼠可能是通過升高大鼠大腦海馬的PP1、PP2A蛋白表達起作用的。③智三針對AD大鼠模型的治療作用可能是通過增強大鼠腦內(nèi)ChAT、AchE活性而產(chǎn)生的，