烏司他丁對(duì)勞力型熱射病大鼠腸粘膜屏障保護(hù)作用的研究.pdf

1、目的:為進(jìn)一步研究勞力型熱射病(EHS)發(fā)病機(jī)制,探索利用熱應(yīng)激+運(yùn)動(dòng)建立穩(wěn)定的EHS大鼠模型,觀察烏司他丁(UTI)對(duì)EHS大鼠腸粘膜通透性的影響,并檢測(cè)腸粘膜免疫狀態(tài)的變化。初步探討不同劑量烏司他丁對(duì)腸粘膜機(jī)械屏障、免疫屏障的保護(hù)作用。
　　方法:取30只SPF級(jí)成年雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠,應(yīng)用環(huán)境訓(xùn)練實(shí)驗(yàn)室將溫度設(shè)定至(40±0.5)℃,濕度70％±5%,通過(guò)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物運(yùn)動(dòng)跑臺(tái)跑步,建立EHS大鼠模型,留

2、取血清測(cè)CK、ALT、AST,取股四頭肌做HE染色,觀察病理學(xué)變化,以驗(yàn)證EHS模型建立成功,并觀察大鼠肛溫變化、發(fā)病時(shí)間(體溫達(dá)42.5℃),以及存活時(shí)間、死亡率。
　　取SPF級(jí)成年雄性 SD大鼠134只隨機(jī)分為以下4組:空白對(duì)照組(Normal-Control,n=8)、勞力型熱射病組(EHS,n=42)、大劑量烏司他丁治療組( LUTI-EHS,n=42)、小劑量烏司他丁治療組( SUTI-EHS,n=42)。EHS、LU

3、TI-EHS、SUTI-EHS3組大鼠應(yīng)用熱應(yīng)激+運(yùn)動(dòng)建立EHS模型,成模后分別立即給予2mL0.9%NaCl、5×104U/Kg UTI、2×104U/Kg UTI尾靜脈注入。建模后EHS、LUTI-EHS、SUTI-EHS組分別取10只觀察存活時(shí)間、死亡率,其余大鼠根據(jù)發(fā)病后30min、2h、4h、6h隨機(jī)分為4個(gè)亞組(每組8只)。經(jīng)頸動(dòng)脈取血測(cè)定血漿中二胺氧化酶(DAO)活性及D-乳酸濃度,觀察烏司他丁對(duì)大鼠腸粘膜通透性的影響,取

4、小腸組織標(biāo)本進(jìn)行形態(tài)學(xué)、免疫組化檢測(cè),并對(duì)比不同劑量烏司他丁對(duì)勞力型熱射病大鼠腸粘膜屏障的保護(hù)作用、對(duì)存活時(shí)間及死亡率的影響。
　　結(jié)果:(1)EHS大鼠平均發(fā)病時(shí)間為57.8±18.9min,8h死亡率100%。EHS模型組大鼠CK、ALT、AST顯著升高;骨骼肌組織肉眼觀:骨骼肌紋理不清,組織韌性降低;鏡下觀:模型組肌纖維排列紊亂,出現(xiàn)廣泛結(jié)構(gòu)破裂,炎性細(xì)胞浸潤(rùn)。
　　(2)本實(shí)驗(yàn)觀察到LUTI-EHS、SUTI-EHS

5、兩組的存活時(shí)間均高于EHS組大鼠的存活時(shí)間,且8h死亡率均低于EHS大鼠的8h死亡率。
　　(3)在發(fā)病后的4個(gè)時(shí)間點(diǎn)中,與對(duì)照組比較,EHS、LUTI-EHS、SUTI-EHS組大鼠的DAO活性及D-乳酸濃度均為先升高后降低;烏司他丁治療能顯著降低血清DAO活性及D-乳酸濃度,減輕腸粘膜損傷,但仍可見(jiàn)炎性細(xì)胞浸潤(rùn)、血管擴(kuò)張等,而大劑量烏司他丁治療優(yōu)于小劑量;此外,在4個(gè)時(shí)間點(diǎn),三組大鼠腸粘膜CD4+T淋巴細(xì)胞百分比降低、CD8+