EZH2-Trx1信號通路調(diào)控肝癌多藥耐藥的機制研究.pdf

1、EZH2是具有組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶活性的蛋白，參與X染色體失活、細胞分化和胚胎發(fā)育調(diào)節(jié)。在前列腺癌、肝癌、淋巴瘤、乳腺癌等多種腫瘤中EZH2都會過量表達，在腫瘤耐藥株細胞中表達量更高。EZH2與腫瘤的發(fā)生發(fā)展關系密切，能促進細胞增殖、腫瘤細胞擴散和轉(zhuǎn)移的惡性表型。Trx1在多種腫瘤中也過量表達，能促進腫瘤的生長和抑制由抗腫瘤藥物引起的細胞凋亡。因此，EZH2和Trx1都可能作為阻止腫瘤發(fā)生和治療腫瘤的分子靶點。我們研究發(fā)現(xiàn)EZH2可通過調(diào)控

2、Trx1參與肝癌耐藥，其結果如下：
　　1）肝癌細胞Bel7402中EZH2和Trx1表達量隨5-FU添加量增加而增加，而耐5-FU的肝癌細胞Bel7402/5-FU中EZH2和Trx1表達量沒有明顯變化。進一步沉默Bel7402/5-FU細胞中EZH2或Trx1水平使細胞對5-FU耐受性降低，而過表達EZH2或Trx1使Bel7402細胞耐受5-FU處理，但EZH2作用的效果與其SET區(qū)域無關。上述結果說明EZH2與Trx1都參

3、與肝癌細胞耐藥性。
　　2）將編碼EZH2蛋白的基因分成四個片段，插入原核載體中表達出GST融合蛋白，通過GST pull-down的方法發(fā)現(xiàn)Trx1與EZH2-C存在直接相互作用。進一步在Bel7402細胞中表達帶標簽的外源EZH2和Trx1，通過Co-IP實驗發(fā)現(xiàn)表達的帶標簽外源蛋白質(zhì)EZH2和Trx1存在相互作用。
　　3）EZH2過量表達上調(diào)Trx1活性，對EZH2表達進行干擾時能降低Trx1活性，說明EZH2能夠上