霉茶總黃酮與霉茶蛋白對(duì)SHR大鼠血壓的影響及機(jī)制研究.pdf

1、目的：研究霉茶總黃酮和霉茶蛋白對(duì)SHR大鼠血壓的作用并探討其作用機(jī)制，為今后霉茶資源的開發(fā)利用提供依據(jù)。
　　方法：
　　1、霉茶總黃酮與霉茶蛋白對(duì)SHR大鼠血壓的影響研究
　　1.1單次給藥對(duì)SHR大鼠血壓的影響
　　健康SHR大鼠35只（雄性，7周齡），按體重隨機(jī)分為7組，每組5只：即模型組、霉茶總黃酮（低、中、高劑量）組、霉茶蛋白（低、高劑量）組、復(fù)方羅布麻片組，每組5只。大鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)及血壓測量訓(xùn)練1 W

2、后，每天上午9點(diǎn)開始實(shí)驗(yàn)，每天一組，監(jiān)測灌胃前和灌胃后大鼠的血壓變化，灌胃容量為10 mL?kg-1體重，模型組大鼠灌胃給予等容量蒸餾水，霉茶總黃酮低、中、高劑量組劑量分別為90 mg·kg-1、180 mg·kg-1、360 mg·kg-1，霉茶蛋白低、高劑量組劑量分別為70 mg·kg-1、140mg·kg-1，復(fù)方羅布麻片組劑量為0.05g?kg-1，灌胃后每隔15 min測量該大鼠的血壓。
　　1.2多次給藥對(duì)SHR大鼠血

3、壓的影響
　　健康SHR大鼠（雄性7周齡，SPF級(jí)）70只，按體重隨機(jī)分為7組：即模型組、霉茶總黃酮（低、中、高劑量）組、霉茶蛋白（低、高劑量）組、復(fù)方羅布麻片組，每組10只。大鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)及血壓測量訓(xùn)練3 W后，模型組大鼠灌胃給予等容量蒸餾水，灌胃容量為10 mL?kg-1體重，霉茶總黃酮低、中、高劑量組劑量分別為90 mg·kg-1、180 mg·kg-1、360 mg·kg-1，霉茶蛋白組低、高劑量組劑量分別為70 mg·k

4、g-1、140mg·kg-1，復(fù)方羅布麻片組劑量為0.05 g?kg-1，各組大鼠每天灌胃給藥2次，連續(xù)灌胃7周，每周測量各組大鼠血壓并記錄。末次給藥前12 h禁食不禁水。末次給藥后1 h頸總動(dòng)脈取血，取血后迅速鈍性剝離腎臟和心臟組織，用濾紙吸干水分，精密稱重，計(jì)算臟器指數(shù)（臟器指數(shù)=臟器質(zhì)量/體質(zhì)量），取部分組織用4％多聚甲醛溶液固定，進(jìn)行HE染色切片，然后在光學(xué)顯微鏡下觀察組織形態(tài)結(jié)構(gòu)。
　　2.霉茶總黃酮和霉茶蛋白對(duì)SHR大

5、鼠降壓作用機(jī)制的研究
　　分組和給藥方法同1.2項(xiàng)。末次給藥后1 h頸總動(dòng)脈取血，留取血清檢測血清中NO、ET-1和GSH-PX、SOD、MDA的含量，取血后迅速鈍性剝離腎臟和心臟組織，用濾紙吸干水分，取部分組織-80℃保存，作為實(shí)時(shí)熒光定量 PCR實(shí)驗(yàn)樣本，檢測腎臟組織 TLR-4、IL-6、TNF-α和心臟組織ACE、AngⅡ、CYP11B2的表達(dá)量。
　　結(jié)果:
　　1單次給藥實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：各給藥組在灌胃后30

6、min后均可降低SHR大鼠的血壓，其中霉茶蛋白在30 min左右降壓效果最明顯，霉茶總黃酮在1 h左右降壓效果最明顯，整個(gè)降壓過程可以持續(xù)約75min。
　　2多次給藥實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：與模型組比較，霉茶總黃酮（低、中、高劑量）組，霉茶蛋白（低、高劑量）組，復(fù)方羅布麻片組均可明顯的降低SHR大鼠的血壓。雖然霉茶總黃酮和霉茶蛋白對(duì)大鼠的臟器系數(shù)影響不明顯，但是病理切片結(jié)果顯示霉茶總黃酮高、中劑量組，霉茶蛋白高劑量組和復(fù)方羅布麻片組對(duì)SH

7、R大鼠的腎臟、心臟組織結(jié)構(gòu)具有一定的保護(hù)作用。
　　3血清學(xué)檢測結(jié)果顯示：與模型組比較，霉茶總黃酮（中、高劑量）組，霉茶蛋白高劑量組，復(fù)方羅布麻片組，NO含量明顯增加（P＜0.01），而ET-1含量顯著降低（均為P＜0.01）；與模型組比較霉茶總黃酮（低、中、高劑量）組，霉茶蛋白（低、高劑量）組，復(fù)方羅布麻片組GSH-PX、SOD活力水平升高（均為P<0.05）；與模型組比較霉茶總黃酮（中、高劑量）組，霉茶蛋白高劑量組，復(fù)方羅布麻

8、片組血清中MDA的含量明顯降低（均為P＜0.01）。
　　4實(shí)時(shí)熒光定量PCR結(jié)果顯示：與模型組比較，霉茶總黃銅高劑量、中劑量，蛋白高劑量 TLR-4、IL-6、TNF-α、ACE、AngⅡ、CYP11b2的mRNA的表達(dá)量明顯降低（均為P＜0.05）。
　　結(jié)論:
　　1、霉茶總黃酮和霉茶蛋白單次給藥均可降低SHR大鼠血壓，降壓作用可持續(xù)1 h左右；連續(xù)多次給藥能顯著降低SHR大鼠的血壓，并能改善腎臟和心臟組織的病理