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文檔簡介
1、目的:研究霉茶總黃酮和霉茶蛋白對SHR大鼠血壓的作用并探討其作用機制,為今后霉茶資源的開發(fā)利用提供依據(jù)。
方法:
1、霉茶總黃酮與霉茶蛋白對SHR大鼠血壓的影響研究
1.1單次給藥對SHR大鼠血壓的影響
健康SHR大鼠35只(雄性,7周齡),按體重隨機分為7組,每組5只:即模型組、霉茶總黃酮(低、中、高劑量)組、霉茶蛋白(低、高劑量)組、復方羅布麻片組,每組5只。大鼠適應性飼養(yǎng)及血壓測量訓練1 W
2、后,每天上午9點開始實驗,每天一組,監(jiān)測灌胃前和灌胃后大鼠的血壓變化,灌胃容量為10 mL?kg-1體重,模型組大鼠灌胃給予等容量蒸餾水,霉茶總黃酮低、中、高劑量組劑量分別為90 mg·kg-1、180 mg·kg-1、360 mg·kg-1,霉茶蛋白低、高劑量組劑量分別為70 mg·kg-1、140mg·kg-1,復方羅布麻片組劑量為0.05g?kg-1,灌胃后每隔15 min測量該大鼠的血壓。
1.2多次給藥對SHR大鼠血
3、壓的影響
健康SHR大鼠(雄性7周齡,SPF級)70只,按體重隨機分為7組:即模型組、霉茶總黃酮(低、中、高劑量)組、霉茶蛋白(低、高劑量)組、復方羅布麻片組,每組10只。大鼠適應性飼養(yǎng)及血壓測量訓練3 W后,模型組大鼠灌胃給予等容量蒸餾水,灌胃容量為10 mL?kg-1體重,霉茶總黃酮低、中、高劑量組劑量分別為90 mg·kg-1、180 mg·kg-1、360 mg·kg-1,霉茶蛋白組低、高劑量組劑量分別為70 mg·k
4、g-1、140mg·kg-1,復方羅布麻片組劑量為0.05 g?kg-1,各組大鼠每天灌胃給藥2次,連續(xù)灌胃7周,每周測量各組大鼠血壓并記錄。末次給藥前12 h禁食不禁水。末次給藥后1 h頸總動脈取血,取血后迅速鈍性剝離腎臟和心臟組織,用濾紙吸干水分,精密稱重,計算臟器指數(shù)(臟器指數(shù)=臟器質(zhì)量/體質(zhì)量),取部分組織用4%多聚甲醛溶液固定,進行HE染色切片,然后在光學顯微鏡下觀察組織形態(tài)結(jié)構(gòu)。
2.霉茶總黃酮和霉茶蛋白對SHR大
5、鼠降壓作用機制的研究
分組和給藥方法同1.2項。末次給藥后1 h頸總動脈取血,留取血清檢測血清中NO、ET-1和GSH-PX、SOD、MDA的含量,取血后迅速鈍性剝離腎臟和心臟組織,用濾紙吸干水分,取部分組織-80℃保存,作為實時熒光定量 PCR實驗樣本,檢測腎臟組織 TLR-4、IL-6、TNF-α和心臟組織ACE、AngⅡ、CYP11B2的表達量。
結(jié)果:
1單次給藥實驗結(jié)果顯示:各給藥組在灌胃后30
6、min后均可降低SHR大鼠的血壓,其中霉茶蛋白在30 min左右降壓效果最明顯,霉茶總黃酮在1 h左右降壓效果最明顯,整個降壓過程可以持續(xù)約75min。
2多次給藥實驗結(jié)果顯示:與模型組比較,霉茶總黃酮(低、中、高劑量)組,霉茶蛋白(低、高劑量)組,復方羅布麻片組均可明顯的降低SHR大鼠的血壓。雖然霉茶總黃酮和霉茶蛋白對大鼠的臟器系數(shù)影響不明顯,但是病理切片結(jié)果顯示霉茶總黃酮高、中劑量組,霉茶蛋白高劑量組和復方羅布麻片組對SH
7、R大鼠的腎臟、心臟組織結(jié)構(gòu)具有一定的保護作用。
3血清學檢測結(jié)果顯示:與模型組比較,霉茶總黃酮(中、高劑量)組,霉茶蛋白高劑量組,復方羅布麻片組,NO含量明顯增加(P<0.01),而ET-1含量顯著降低(均為P<0.01);與模型組比較霉茶總黃酮(低、中、高劑量)組,霉茶蛋白(低、高劑量)組,復方羅布麻片組GSH-PX、SOD活力水平升高(均為P<0.05);與模型組比較霉茶總黃酮(中、高劑量)組,霉茶蛋白高劑量組,復方羅布麻
8、片組血清中MDA的含量明顯降低(均為P<0.01)。
4實時熒光定量PCR結(jié)果顯示:與模型組比較,霉茶總黃銅高劑量、中劑量,蛋白高劑量 TLR-4、IL-6、TNF-α、ACE、AngⅡ、CYP11b2的mRNA的表達量明顯降低(均為P<0.05)。
結(jié)論:
1、霉茶總黃酮和霉茶蛋白單次給藥均可降低SHR大鼠血壓,降壓作用可持續(xù)1 h左右;連續(xù)多次給藥能顯著降低SHR大鼠的血壓,并能改善腎臟和心臟組織的病理
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