廣西瑤山甜茶總黃酮抗腫瘤活性的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:研究甜茶總黃酮抗腫瘤作用及其作用機(jī)制。
　　 方法:1.甜茶總黃酮經(jīng)60％的乙醇提取、聚酰胺柱分離后，用化學(xué)反應(yīng)、薄層層析法和高效液相法進(jìn)行鑒定。2.采用MTT法、含藥血清法對(duì)腫瘤株S180(小鼠移植性肉瘤細(xì)胞)、H22(小鼠腹水型肝癌細(xì)胞)、L1210(小鼠白血病細(xì)胞)進(jìn)行篩選，篩選出對(duì)甜茶總黃酮最敏感的細(xì)胞株S180。3.以S180移植性腫瘤為模型進(jìn)行體內(nèi)實(shí)驗(yàn):將S180細(xì)胞懸液接種于昆明小鼠腋下，建立S180實(shí)體瘤腫

2、瘤模型。24h后隨機(jī)分為6組:正常對(duì)照組，模型對(duì)照組，環(huán)磷酰胺組，甜茶總黃酮高、中、低劑量組。接種S180肉瘤細(xì)胞24h給藥，每天1次;11d后，處死小鼠，摘眼球采血，取瘤、脾臟、胸腺稱重，通過(guò)抑瘤率、脾臟指數(shù)、胸腺指數(shù)研究甜茶總黃酮對(duì)S180的影響。用HE染色法研究甜茶總黃酮對(duì)S180腫瘤細(xì)胞形態(tài)學(xué)的影響;用比色法測(cè)定荷瘤小鼠血清的超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MDA)的含量;通過(guò)測(cè)定白介素-2(IL-2)、腫瘤壞死因子(TNF-

3、α)的含量研究甜茶總黃酮對(duì)S180的抑制作用。4.急性毒性實(shí)驗(yàn)給實(shí)驗(yàn)小鼠灌服不同濃度的甜茶總黃酮，測(cè)定小鼠灌胃的最大耐受量。
　　 結(jié)果:1.甜茶總黃酮在體外對(duì)腫瘤株S180、H22、L1210的增殖有較好的抑制作用.其中對(duì)H22抑制作用最強(qiáng)(IC50=46.31μg/ml);對(duì)S180抑制作用較強(qiáng)(IC50=71.48μg/ml)。2.甜茶總黃酮的含藥血清(500mg/kg)對(duì)腫瘤株S180、L1210的增殖有較強(qiáng)的抑制作用。

4、3與模型組S180小鼠瘤重對(duì)比，CTX組有非常顯著性差異;甜茶總黃酮高劑量(500mg/kg)、中劑量(250mg/kg)有顯著性差異(P＜0.05);與模型組S180小鼠的脾臟指數(shù)、胸腺指數(shù)對(duì)比，甜茶總黃酮各劑量組無(wú)顯著性差異(P＞0.05)。4.HE染色結(jié)果顯示，與模型組對(duì)比，甜茶總黃酮高劑量(500mg/kg)和中劑量(250mg/kg)可抑制S180細(xì)胞的增殖。5.甜茶總黃酮高劑量(500mg/kg)能增加S180小鼠血清中SO

5、D的含量，與模型組對(duì)比，差異有顯著性意義(P＜0.05)，提示甜茶總黃酮高劑量能提高機(jī)體的抗氧化能力，對(duì)腫瘤有一定的抑制作用。6.與模型組S180小鼠血清中TNF-α的含量對(duì)比，甜茶總黃酮高劑量(500mg/kg)有顯著性差異(P＜0.05)，即甜茶總黃酮高劑量(500mg/kg)能促進(jìn)S180小鼠TNF-α的分泌，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。7.甜茶總黃酮不能延長(zhǎng)S180小鼠的生命期，與模型組對(duì)比，差異無(wú)顯著性意義(P＞0.05)。8.急性毒性試驗(yàn)